肿瘤坏死因子-α、白介素-6和白介素-8检测在胃癌中的临床价值

冯 宁，尚红港

(1.太康县人民医院检验科，河南 太康 461400；2.太康县第二人民医院内科，河南 太康 461400)

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，全世界每年大约10%的恶性肿瘤死亡是由胃癌引起的[1-3]。但由于其早期诊断率低，大部分患者在确诊时已处于晚期，因此胃癌早期筛查对于早期发现病灶尤为重要。研究[4-6]表明，幽门螺杆菌感染激活了胃癌相关信号级联反应，诱导细胞因子和趋化因子的产生，参与慢性炎症反应，驱动胃组织癌变，因此，本研究检测了循环细胞因子和趋化因子作为胃癌潜在的诊断生物标志物肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)和白介素-8(interleukin-8，IL-8)在胃癌患者血清和胃癌组织中的表达，并分析了其在临床应用中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取太康县人民医院2018年1月至2020年5月收治的115例胃癌患者，年龄35～80岁，中位年龄61岁。所有患者均进行电子胃镜取活检或手术取活检，并经过至少2位病理科医师判断，确诊为胃癌。

1.2 方法血清中TNF-α、IL-6和IL-8水平检测：采用酶联免疫吸附试验检测80例胃癌患者血清中TNF-α、IL-6和IL-8水平，抽取患者的清晨空腹静脉血5 mL，离心并留取上清，检测TNF-α、IL-6和IL-8的水平。(所用一抗、二抗及试剂盒均购自上海西唐生物科技有限公司)。判定血清TNF-α、IL-6和IL-8水平升高的标准分别为TNF-α≥8.1 pg/mL、IL-6≥5.9 pg/mL 和IL-8≥2.4 pg/mL。

肿瘤组织中TNF-α、IL-6和IL-8表达检测：采用免疫组化法检测肿瘤组织中TNF-α、IL-6和IL-8的表达，所有组织标本均经质量分数4%甲醛固定，并进行石蜡包埋，制成石蜡切片。然后进行免疫组化染色，TNF-α、IL-6和IL-8的单克隆抗体购自美国Sigma公司。

随访：对患者的性别、年龄、临床分期、分化程度、淋巴结转移及Lauren分型等进行随访，随访日期截至2020年5月。

2 结果

2.1 胃癌患者血清和肿瘤组织中TNF-α，IL-6和IL-8检测结果酶联免疫吸附试验检测结果显示：94例(81.7%)患者血清中TNF-α水平升高，44例(38.3%)患者血清中IL-6水平升高，61例(53.0%)患者血清中IL-8水平升高。免疫组化结果显示：肿瘤组织中86例(74.8%)患者TNF-α表达阳性，63例(54.8%)患者IL-6表达阳性，66例(57.4%)患者IL-8表达阳性。

2.2 胃癌患者TNF-α、IL-6和IL-8与临床病理参数之间的关系115例胃癌患者血清和肿瘤组织中TNF-α、IL-6、IL-8与肿瘤临床分期、分化程度、淋巴结转移和Lauren分型有关(P均<0.05)。见表1、2。

表1 胃癌血清中TNF-α、IL-6和IL-8与临床病理参数之间的关系

表2 胃癌肿瘤组织中TNF-α、IL-6和IL-8与临床病理参数之间的关系 n(%)

3 讨论

胃癌是世界上第2大致命的恶性肿瘤，预后较差[7-8]。胃癌的免疫抑制微环境有利于肿瘤的发生、发展，也降低了抗肿瘤治疗的效果[9-10]。肿瘤相关巨噬细胞是浸润肿瘤组织的巨噬细胞，是肿瘤微环境中最丰富的免疫细胞。肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤的生长、侵袭和转移中起着关键作用[11-12]。肿瘤微环境中的细胞绝大多数是免疫细胞，肿瘤相关巨噬细胞与肿瘤进展、血管形成、侵袭转移密切相关。肿瘤相关巨噬细胞具有杀灭肿瘤和促进肿瘤生长的双重作用，提示巨噬细胞释放的炎性细胞因子可促进胃癌细胞增殖[13-14]。本研究针对免疫微环境相关的TNF-α、IL-6和IL-8在胃癌患者血清和肿瘤组织中的表达进行检测，并分析了与临床病理参数的相关性，发现TNF-α、IL-6和IL-8异常高水平表达与胃癌的不良预后相关。

既往研究[15-17]表明，巨噬细胞释放的炎性细胞因子可促进胃癌肿瘤细胞增殖，巨噬细胞分泌IL-6和TNF-ɑ。IL-6是参与机体应激反应和免疫调节的重要细胞因子。IL-6主要来源于T细胞、B细胞和单核巨噬细胞，是组织损伤和应激反应的主要参与者，在手术、创伤或压力时，其水平会显著升高。TNF-α产生于活跃的单核巨噬细胞，对免疫功能的产生至关重要[18-20]，还能诱导炎症连锁反应，从而促进IL-1、IL-6、IL-8、血小板活化因子、前列腺素和白三烯等的释放，引起一系列反应，导致单核巨噬细胞、粒细胞、淋巴细胞等炎症相关细胞的激活，引起凝血系统和补体系统激活，导致血管内皮细胞损伤，进而诱发组织器官损伤[21]。本研究结果显示，81.7%的患者血清TNF-α水平升高，74.8%的患者肿瘤组织中TNF-α阳性表达，54.8%的患者肿瘤组织中IL-6阳性表达，57.4%的患者肿瘤组织中IL-8阳性表达，这表明胃癌患者处理免疫紊乱状态，存在一定的炎症应激反应，TNF-α、IL-6和IL-8参与了胃癌的发生、发展过程，与有关研究[22]结果一致。

本研究结果还显示，115例胃癌患者血清和肿瘤组织中TNF-α、IL-6、IL-8与肿瘤临床分期、分化程度、淋巴结转移和Lauren分型有关(P均<0.05)。结果表明，随着胃癌患者疾病进展，无论是血清还是肿瘤组织中，三者均异常高水平表达，而且分化程度越差、分型越差三者的表达水平也越高，而TNF-α、IL-6和IL-8高表达可能在一定程度上抑制胃癌的免疫应答，促进胃癌进展，这与有关研究[23]的结果一致。

综上所述，胃癌血清和病理组织中存在TNF-α、IL-6和IL-8的高表达，且与预后相关，可以作为胃癌进展及预后的参考指标，在临床应用中具有一定价值。