时间:2024-08-31
解金辉,种靖慧,黄 娴,王 维,董 峥,李立新,李彤彤,李 力,闫莉娜
(天津市血液中心,天津300110)
新生儿溶血病(hemolytic disease of the newborn,HDN)是一种由于母婴血型不合所引起的新生儿同种免疫性溶血疾病,常见于ABO血型系统,即母亲血型为O型,婴儿血型为A或者B型。该病仅发生于胎儿与早期新生儿,是新生儿早期黄疸的重要原因。本文将送检至本实验室的1939例怀疑因母婴ABO血型不合引起的新生儿标本进行检测,并对检测结果进行分析。
2012年8月至2013年8月间因临床表现怀疑患有HDN的新生儿血样送至本实验室进行HDN检测。新生儿血样均为EDTA抗凝保存。
抗A、抗B血清及反定型细胞Ac、Bc、Oc由上海血液生物医药有限责任公司提供;微柱凝胶检测卡由达亚美(Diamed)公司提供;抗体筛选细胞由sanquin公司提供,IgM抗D血清由长春博德生物技术有限责任公司提供。
试管法检测新生儿及母体ABO及RhD血型。
新生儿红细胞直接抗人球蛋白试验,红细胞抗体释放试验,游离抗体试验及母体不规则抗体筛选试验均由微柱凝胶法检测,试验操作遵守达亚美凝胶卡使用说明。其中新生儿细胞抗体释放试验采用56℃水浴热放散。
新生儿溶血的诊断标准:(1)母婴血型不合;(2)早期出现高胆红素血症(病理性黄疸)和/或贫血;(3)作改良直接抗人球蛋白试验,抗体释放试验及游离试验,其中,改良直接抗人球蛋白试验及/或抗体释放试验阳性可确诊[1]。
采用SPSS 21软件进行卡方检验。
在1939份标本中,母亲血型均为O型RhD阳性,并且抗体筛选试验均为阴性。A型血婴儿818例,其中直接抗人球蛋白试验阳性141例,红细胞抗体释放试验阳性730例。B型血婴儿1121例,其中直接抗人球蛋白试验阳性121例,红细胞抗体释放试验阳性881例。A型血与B型血婴儿的直接抗人球蛋白试验和释放试验阳性率差异有统计学意义(P<0.05,表 1)。
Tab.1 Positive rate contrast between blood type A and B
在1939份标本中,出生5 d内的婴儿有1779人,日龄大于5 d的婴儿160人,两组婴儿HDN阳性率差异有统计学意义(P<0.05,表 2)。
Tab.2HDN positive rate in different age group
ABO血型不合是引起新生儿溶血病常见的原因之一,主要为O型血的母亲引起A型血或B型血的婴儿患病,在本文的统计中,A型血的婴儿库姆试验阳性率和释放试验阳性率都较B型血的婴儿高,而且这种差异具有统计学意义。由于A型血婴儿红细胞表面的A抗原多于B型血婴儿红细胞表面的B抗原,所以当母体中的IgG抗A或者抗B进入胎儿体内后,A型红细胞表面吸附的抗体就会多于B型红细胞,所以A型血的婴儿直接抗人球蛋白试验和释放试验阳性率都会高于B型血的婴儿。本试验结果与其他文献报道是相同的[2]。
在检测婴儿血型时,只需正定型检测即可,如果正定型凝集强度弱,表示红细胞表面抗原数量少,可能是抗原仍未发育完全,也可能因为血型为亚型,在血清学试验不能确定血型时,我们可以通过高分辨的基因分型方法准确定型[3],因为抗原数量较少,母体中的IgG抗A或者抗B对其红细胞破坏也比较小,所以不会引起严重的HDN。
送检HDN的患儿血样采集时间与HDN检出率呈负相关关系,越早送检,HDN检出率就越高[4],所以如果婴儿临床表现怀疑HDN时,应当尽快送检,及时对症治疗。在本文释放试验阳性中,最大婴儿日龄为20 d,提示我们如果错过最佳检测时间,仍然应该尽快送检。
在HDN检测中,只有抗人球蛋白试验阳性和释放试验阳性是诊断标准,如果这两项试验结果阴性,而游离抗体试验阳性是不能确诊的,因为即使患儿血液中含有抗体,但是其红细胞表面没有该抗体对应的抗原,即红细胞不能被致敏,也就不会导致溶血。
HDN传统的检测方法是试管法,该方法操作繁杂,灵敏度低,结果不易判断,漏检率高。而微柱凝胶检测卡操作简单,重复性好,在新生儿溶血病检测试验中,也比试管法有明显高的灵敏度[5]。在本文中采用的方法微微柱凝胶法,使得有临床表现的患儿HDN检出率达到了83.1%(1611/1939)。此外,还要注意酶化细胞制备过程,避免酶化细胞发生溶血,影响最终检测结果。正确的检测结果能够指导临床及时对患儿进行有针对性的治疗,减少该病对婴儿造成的影响。
[1] 金汉珍,黄德珉,官希吉,等.实用新生儿学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2000:531-550.
[2] 薛向阳,金春子,吕胜利.105例母婴ABO血型不合的新生儿中溶血病的实验室检测结果分析[J].中国优生与遗传杂志,2006,14(8):64-67.
[3] 张纯武,王本泉,刘 彪,等.基因分型方法在疑难血型鉴定中的应用[J].中国应用生理学杂志,2013,29(5):461-464.
[4] Whyte J,Graham H.Prediction of the severity of ABO haemolytic disease of the newborn by cord blood tests[J].Acta Paediatr Scand,1981,70(2):217-222.
[5] 陈 华,伍 燕,王娇华.微柱凝胶技术在新生儿溶血病抗体检测中的应用研究[J].中国全科医学,2012,15(26):3079-3080.
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