HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义分析

刘先勇 田丽娟 郑桂平 罗爱莲

HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义分析

刘先勇 田丽娟 郑桂平 罗爱莲

目的 分析HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义。方法 选取72例宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌患者做为此次试验研究对象，其中宫颈炎24例，宫颈癌前病变31例，宫颈癌17例。结果 宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌3组患者HPV阳性率以及HPV水平比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 HPV感染可作为宫颈癌前病变和宫颈癌病变的一个判断因素，预防和治疗HPV感染可以有效防止宫颈癌的发生。

人乳头瘤病毒；宫颈炎；宫颈癌前病变；宫颈癌

宫颈癌是最常见的恶性肿瘤之一，发病年龄主要集中在30～50岁，近年来患者数量呈现增长趋势[1]，且逐渐年轻化，因此逐渐受到重视。HPV称为人乳头瘤病毒，是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒，感染后症状主要表现为寻常疣、生殖器疣等，主要感染途径有性行为传播、密切接触、间接接触、医源性感染和母婴传播等[2]。分析人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染与宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌的关系对临床治疗方案的制定具有重大意义，本研究具体分析了HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究对象为2012年6月～2014年6月在上犹县妇幼保健院接受治疗，确诊为宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌的患者，随机选取72例：宫颈炎24例，宫颈癌前病变31例，宫颈癌17例。患者年龄23～68岁，平均年龄（15.3±11.2）岁，患者均无妊娠、月经，4周内无性生活，3 d内没有使用阴道药物。3组患者一般资料差异无统计学意义,具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 取样方法 对患者进行宫颈脱落细胞采样，将宫颈取样毛刷插入宫颈管内，使毛刷中央部分到达子宫颈口，按照顺时针方向转动5次，获得样本后，将毛刷浸泡在保存液中，循环操作数次后，将宫颈刷在保存液中迅速抖动，使细胞样本从毛刷上脱落，并将其保存以供检测。

1.2.2 检测方法 对取样进行脱氧核糖核酸(Deoxyribose Nucleic Acid，DNA)提取，将样品放置在细胞保存液中，进行离心处理后，使用基因组试剂盒对DNA进行提取。再对聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)进行扩增，对样本先进行加热，然后进行冰水浴处理。将两者进行杂交处理，在样品已经放置于杂交膜下且有硅胶圈隔离的条件下，将样品放置在杂交液中进行杂交，然后排除杂交液，加入变性DNA溶剂，进行混合，再次进行杂交，将杂交液冲洗干净。进行显色处理，在样品中加入显色溶液，并将样品置于显色器械中进行催化，一般3～5 min得到结果。

1.3 观察指标 使用肉眼观测，如果呈现清晰的蓝紫色圆点，则HPV为阳性，表示受到HPV感染，否则为阴性，表示未受到感染。使用HPV类型分布图判断HPV类型，具体措施如下，观察膜条HPV分型上得蓝紫色圆点，与对照图进行对比，阳性的HPV样本将在不同类型HPV对照图的相应位置出现蓝紫色圆点，而阴性的HPV样本不会出现蓝紫色圆点。

1.4 统计学方法 数据均采用SPSS 17.0软件进行统计学处理，计量资料采用“x±s”表示，计量资料采用t检验；计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 宫颈病变患者感染HPV检验结果 根据宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌3组检测结果分析，3组患者HPV阳性率以及HPV水平对比差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 宫颈病变患者感染HPV检验结果

2.2 宫颈病变患者感染HPV类型比较 感染HPV 16的患者数量最多，其次是HPV 31和HPV 58，与高危型HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68的分布具有一致性。见表2。

3 讨论

据本研究宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌3组检测结果分析，3组患者HPV阳性率以及HPV水平具有明显差异，其间对比具有统计学意义（P＜0.05），可见通过检测HPV感染可以有效预防宫颈癌病变。此外，HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等型号在本次监测中出现频次较高，是高危型病菌，需要在临床上予以高度重视。HPV检测也有其局限性，医护人员应该不断深入研究，完善检测方法，进一步提高宫颈疾病的检测水平，提高防治质量。

宫颈癌是一种恶性肿瘤，早期症状主要表现为阴道接触性出血，中晚表现为不规则地阴道流血，出血量根据病情不同而不同，并有阴道排液异常，表现为早期液体呈白色或血色，有异味，晚期其为浓稠液体且有脓性恶臭，并发症有尿频、尿急、便秘、下肢肿痛、输尿管梗阻、肾盂积水及尿毒症等[3]。宫颈癌患者数量呈逐年增长的趋势，且逐渐年轻化，引起了医学界的高度关注。预防和筛查宫颈疾病，尽快采取治疗措施，防止其恶化，是降低宫颈癌患者数量的重要方法。

HPV称为人乳头瘤病毒，是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒。症状主要表现为寻常疣、生殖器疣等症状，主要感染途径有性行为传播、密切接触、间接接触、医源性感染和母婴传播等[4]。现代医学研究表明，HPV的持续感染将会导致宫颈癌的发生，长时间感染可能导致浸润瘤的出现[5]。从实验结果来看，宫颈炎、宫颈癌前病变和宫颈癌患者绝大部分都感染HPV病毒，本次研究所选72例患者中HPV阳性40例，其中宫颈炎患者4例，感染阳性率为16.7%，宫颈癌前病变患者例23例，感染阳性率为74.2%，宫颈癌患者例13例，感染阳性率为88.2%。宫颈癌的患病是一个漫长的过程，早期宫颈炎逐渐发展成慢性宫颈炎，如果得不到有效的治疗将会发展为宫颈癌前病变，进一步则发展成宫颈癌[6]。根据实验结果，宫颈炎HPV的感染率较低，但是宫颈癌前病变感染率较高，因此，HPV感染与宫颈癌的发生关系密切。在HPV类型中，感染率最高的是HPV 16、HPV 31和HPV 58，该型也属于高危型HPV，需要加强此类HPV预防和治疗措施的研究。

需要注意的是，HPV的检测需要对患者进行宫颈脱落细胞采样，对取样进行DNA提取，再对PCR进行扩增，将两者进行杂交处理，最后观察显色结果[7-8]，在操作过程中容易受到人为的影响，例如，对患者采样的位置有偏差，在进行DNA提取和PCR扩增过程中操作不当将会导致检验结果有误差[9]。因此，在实际操作过程中，应该对检测人员进行专业培训，保证检测质量，同时医疗工作者应该结合实际操作的经验，改进操作流程，使检测更加规范，避免结果的偏差导致临床上的误诊[10]。

本次研究对宫颈疾病的防治工作具有指导意义，目前我国宫颈疾病预防机制并不完善，我国对宫颈疾病筛查没有明确的科室规定也是防治工作质量不高的重要原因之一。在宫颈疾病防治工作中，要求医护人员重视HPV在宫颈炎、宫颈癌前病、宫颈癌中的检测结果，以HPV的检测情况作为宫颈疾病的判断标准。普及宫颈疾病的防治知识，要求女性主动配合宫颈癌的筛查工作，实现早发现、早治疗。根据我国宫颈疾病患者的实际情况，建立符合国情的筛查标准，减少宫颈疾病检查的遗漏现象，有效提高我国宫颈癌防治效率。建立健全的防治机制，保证女性生活的健康。

表2 宫颈病变患者感染HPV类型检验结果

[1] 亚力坤.穆罕默德,刘开江.HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义[J].新疆医科大学学报,2010,15（2）:160-162.

[2] 倪小平,雷丽红,陈秋生,等.高危型人乳头瘤病毒对宫颈癌及癌前病变诊断价值的探讨[J].中华肿瘤防治杂志,2010,23（22）:1886-1887.

[3] 亚力坤・穆罕默德,玛依努尔・尼牙孜,韩莉莉,等.患宫颈病变的维、汉族妇女高危型HPV分型比较研究[J].中国妇产科临床杂志,2014,3（1）:6-9.

[4] 金爱红,周霞平,周凤珍.HPV在宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌中的检测及意义分析[J].中国医药导刊,2014,18（3）:414-415.

[5] 惠燕,黄利鸣,叶红.survivin在人宫颈癌前病变和宫颈浸润癌组织中的定量分析及其临床价值的评估[J].肿瘤防治研究,2010,6（1）:39-42.

[6] 卢洪胜,石卫武,叶明,等.HPV感染与宫颈癌及癌前病变关系的研究[J].肿瘤学杂志,2008,22（9）:706-708.

[7] 何慧仪,卢丽娜,杜洪,等.Ki 67、Survivin、P 16表达在宫颈癌和宫颈癌前病变诊断中的意义[J].中国妇幼保健,2006,19（13）:1825-1827.

[8] 孙萍.Nlp、Aurora-A在宫颈脱落细胞中的表达及其与HPV感染的相关性[D].北京协和医学院,2011.

[9] 许超.HPV-DNA检测联合液基细胞学对宫颈癌筛查的意义及临床价值的研究[D].安徽医科大学,2009.

[10] 袁利.宫颈鳞癌及CIN中FOXP 3的表达与高危型HPV感染的关系及意义[D].遵义医学院,2013.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.33.011

；江西 341200 上犹县妇幼保健院检验科 （刘先勇 田丽娟 郑桂平 罗爱莲）