宜州市新生儿脐血血红蛋白电泳结果分析

凌显桢 莫丽莎

宜州市新生儿脐血血红蛋白电泳结果分析

凌显桢 莫丽莎

目的 了解宜州市新生儿地中海贫血的发生率，探讨新生儿脐血筛查地中海贫血的意义，为临床诊断及预防提供依据。方法 采用美国Helena SPIFE 3000全自动血红蛋白电泳仪对1413份新生儿脐血标本进行琼脂糖凝胶蛋白电泳，并对Hb区带进行扫描定量分析。结果 在1413份脐血标本中共检出Hb Bart's阳性（≥1.0%）187例，阳性率13.23%。其中静止型96例、标准型86例、中间型4例、重型1例，阳性率分别为6.794%、6.086%、0.283%、0.071%。另外发现异常血红蛋白病2例，发生率为0.142%，其中HbD 1例，可疑β-地中海贫血1例。结论 使用全自动血红蛋白电泳仪对新生儿脐血进行定量检测，能有效地检出α-地中海贫血患儿，对开展新生儿α-地中海贫血的早期筛查、遗传咨询有重要的指导意义。

α-地中海贫血；新生儿；脐血筛查；血红蛋白电泳；宜州市

α-地中海贫血（α-地贫）是由于α-珠蛋白基因缺失突变导致α-珠蛋白肽链缺如或合成减少而引起的一种遗传溶血性疾病[1]。地中海贫血的诊断产生于20世纪80年代初期，其诊断研究经历了DNA点杂交、限制性内切酶酶谱分析、限制性片段长度多态性连锁分析等等，其中PCR体外基于扩增诊断分析应用较为广泛，在地中海贫血的研究分析中，得到了广泛的应用，受到了人们的关注。广西是地贫高发区，胎儿水肿综合征发生率为6.66‰，居出生缺陷首位，给家庭和社会带来沉重的负担[2]。本研究选择1413例新生儿的脐血进行检测，探讨广西宜州市地方新生儿地中海贫血的发生率，报道如下。

1 资料与方法

1.1 对象 选择2012年8月～2014年9月在广西壮族自治区宜州市中医院出生的新生儿共1413例作为研究对象。

1.2 仪器与试剂 采用SPIFE 3000全自动电泳仪及其配套扫描仪和试剂，生产厂家为美国海伦娜（Helena）公司。

1.3 方法 在胎儿出生剪断脐带的时候取每1例婴儿的脐带血，血量为2mL，将其置于EDTA抗凝管中，在取血的过程中要注意避免母血污染。脐血以3000r/min离心5min，去除血浆后，取100μL红细胞加入5mL生理盐水，混匀洗涤红细胞，离心8min，吸去上清液，加270μL蒸馏水，充分振荡溶血，再用四氯化碳抽提离心，取上层血红蛋白液17μL，按仪器操作对所得血红蛋白液逐步进行点样、电泳、染色、脱色、烘干、胶片扫描以及结果分析。

1.4 诊断标准[3]α-地中海贫血携带者的诊断标准为脐血检出Hb Bart's。根据Hb Bart's含量分为4种类型：含量在1.0%～3.0%者为静止性，3.0%～20.0%者为标准型，20.0%～80.0%者为中间型，＞80.0%者为重型。

2 结果

在1413份脐血标本中共有187份检出Hb Bart's，且Hb Bart's含量≥1.0%，检出率为13.23%。其中静止性96例，检出率6.794%；标准型86例，检出率6.086%；中间型4例，检出率0.283%；重型1例，检出率0.071%。见表1。另外发现异常血红蛋白病2例，发生率为0.142%，其中HbD 1例；疑似β-地中海贫血1例，其标本HbA含量44.77%，HbF含量55.23%，但未做进一步的基因诊断分析。

表1 1413例脐血Hb Bart's含量及α-地中海贫血分型

3 讨论

地中海贫血是一种溶血性贫血，具有遗传性，是由于血红蛋白珠蛋白链合成部分受抑制或完全受抑制而导致的[4]。α-地中海贫血是由于α链合成的减少造成非α（如β、γ）的相对过剩而形成四聚体，如Hb Bart's（γ4）和HbH（β4）。根据总的α-基因缺失数目的不同，α-地中海贫血被分为静止型、标准型、中间型（HbH病）与重型（Bart's胎儿水肿综合征4种类型[5]。其中静止型α-地中海贫血的发病机制为1个α基因的缺失或者点突变，可造成各种肽链的合成障碍，致使血红蛋白的组分改变，一般在临床上没有明显的症状表现，只能在出生时的血液中Hb Bart's的含量为1%～3%。标准型α-地中海贫血的发病机制为2个α基因的缺失或者点突变，一般在临床上无明显症状表现，部分患者会出现轻度溶血性贫血症状，检测中可发现出生时血液中Hb Bart's的含量为3%～20%。中间型α-地中海贫血，也可以被称为HbH病，其发病机制为3个α基因的缺失或者点突变。慢性溶血性贫血的发病机制为红细胞中的β四聚体HbH（β4）附着于红细胞膜上，对红细胞造成破坏而引起的。患儿出生时Hb Bart's含量为20%～40%，3个月后逐渐变为HbH。重型α-地中海贫血的发病机制为4个α基因的缺失或者点突变，主要症状表现为新生儿在胎儿期不能合成正常的HbF(α2γ2)，从而导致胎儿出现全身水肿、四肢短小腹大以及肝脾肿大等，绝大部分此类新生儿都在出生前在子宫内发生死亡，或者出生后1～2h死亡[6]。在国际上α-地中海贫血都是以Hb Bart's这一特殊的血红蛋白含量为指标进行检测和诊断的，具有便捷性和准确性。随着医学技术的发展，基因诊断也开始应用于α-地中海贫血的诊断中，准确率有了进一步的提高，但是由于基因诊断技术对设备和操作的要求都较高，成本昂贵，因此难以在广大医院中得以广泛的推广和应用。而与之相比，血红蛋白电泳的方法具有取材方便、简便快速、准确灵敏以及无创伤等优点，将其应用于α-地中海贫血的筛查是一种非常可行的途径。

本研究对宜州市1413例新生儿脐血标本检测的结果发现，检出α-地中海贫血187例，发生率为13.23%。比张春荣等[7]统计的结果（12.36%）略高，但比黄作群[8]统计的结果（14.34%）稍低，这可能与人口分布和流动差异有关。在检出的患者中，有6.794%的新生儿为静止型α-地中海贫血，有6.086%的新生儿为标准型α-地中海贫血，这2种所占比例最多，由此可见静止型和标准型是广西宜州市地方α-地中海贫血的主要类型。在实际的医疗工作中，必须要重视脐血的筛查，并采取一定的措施对α-地中海贫血的防治工作进行的加强和完善，以降低地中海贫血的发生率。广西是地中海贫血高发区，对新生儿α-地中海贫血早期筛查显得尤为重要，新生儿α-地中海贫血筛查有利于及早发现患儿，做出相应的处理，为进一步进行基因诊断和遗传咨询提供基础。

[1] 陈廷娥，郭广洲，张宇英，等.α-地中海贫血产前筛查及基因型分析[J].中国热带医学，2007，7（4）:504-505.

[2] 黄越华，陈赤，曾萼.2000～2005年广西出生缺陷监测结果分析[J].应用预防医学杂志，2006，12（6）:367-368，344.

[3] 张之南.血液病诊断及疗效标准[M].2版，北京:科学出版社，1999:51.

[4] 李璞.医学遗传学[M].北京:中国协和医科大学出版社，2006.

[5] 康熙雄.临床电泳[M].北京:人民卫生出版社，2006:296-297.

[6] 陆国辉，徐湘民.临床遗传咨询[M].北京:北京大学医学出版社，2007:238.

[7] 张春荣，黄小明，马巧莹，等.全自动电泳系统对8093例产前孕妇和新生儿地中海贫血的检测分析[J].检验医学与临床，2009，7（6）: 1165-1166.

[8] 黄作群，唐萍，易菲，等.1422例新生儿脐血α-地中海贫血筛查[J].广西医学，2006，28（12）:1941-1942.

[摘 要] 目的 分析深圳市龙华新区2013年以来百白破疫苗接种的不良反应情况。方法 分析百白破疫苗接种不良反应的临床诊断，分析基础免疫和加强免疫引起的不良反应差别以及同期引起局部不良反应和全身不良反应的差别。结果 2013年以来全区共接种无细胞百白破疫苗198877例，疫苗引起不良反应共158例，发生率为79.44/100000；一般反应90例，异常反应49例，偶合反应17例，待定2例。基础免疫接种例数150550例，发生不良反应41例，发生率为27.23/100000；加强免疫接种例数48327例，发生不良反应117例，发生率为242.10/100000，两者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；2013年全年共接种135717例，发生不良反应71例，发生率为52.31/100000，2014年共接种63160例，发生不良反应87例，发生率为137.74/100000，两者比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 尽管百白破疫苗具有良好的预防传染病作用，但同时也有很多不良反应，一定要重视。疫苗运用之前要仔细检查是否清亮，有无分层等，使用时应充分摇匀。根据不同的月龄选择合适的针头，严格按操作规范注射，严格把握禁忌证，注意接种后婴儿、儿童的护理。

[关键词] 无细胞百白破疫苗；不良反应；发生率

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.28.113

广西 546300 广西壮族自治区宜州市中医院检验科 （凌显桢莫丽莎）