不规则抗体检测应用于孕妇产前检查的价值分析

谢楠楠 谢小燕

血型不规则抗体即除A、B、O型系统外的其他抗体，它可以通过注射、母婴血型不合妊娠等多种途径产生[1]。不规则抗体不仅能引发免疫溶血性输血反应及增加交叉配血难度，还可以经由胎盘进入胎儿体内，造成新生儿溶血病[2]。因此加强孕妇产前不规则抗体检测具有十分重要的意义。为探讨不规则抗体检测在孕妇产前检查中的价值，本研究比较分析行/不行不规则抗体检测的孕妇新生儿溶血情况，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年1月～2013年1月来揭阳市人民医院进行产前检查的200例夫妇血型不合孕妇为研究对象行不规则抗体检测，年龄22～39岁，平均（26.7±1.4）岁，孕次 1～5 次，平均（2.3±0.3）次。溶血新生儿纳入标准：（1）出生后3 d内出现黄疸症状，症状慢慢加重；（2）足月新生儿1～4 d内血清总胆红素在220.6 μmol/L以上，早产儿则在256.5 μmol/L以上，且2周内没有下降；（3）排除药物等其他原因引发溶血病。选择同期未行不规则抗体检测的200例夫妇血型不合孕妇为对照组。2组孕妇在年龄、妊娠情况等方面差异无统计学意义，有可比性。

1.2 方法

1.2.1 准备工作 （1）设备及试剂。不规则抗体检测中应用的设备及试剂包括离心机、漩涡混合器、抗A/B抗体、凝聚胺介质试剂、巯基乙醇应用液（0.2 mol/L）、标准红细胞及广谱抗人球蛋白等。（2）血液标本准备。①夫妇2人均分别采取凝血、抗凝血4 mL和2 mL，其中抗凝血和抗凝剂混合均匀；②于37℃环境中孵育至凝血45～60 min，离心血清备用；③利用抗凝血生理盐水清洗3次，配制红细胞悬液（浓度为3%～5%）；④酶处理红细胞。先准备好酶溶液及抑制剂，均2 mL，A细胞悬液及B细胞悬液，均1 mL，37℃环境下孵育10 min，然后把1 mL的酶液分别加入到A、B细胞悬液中，37℃环境下处理5 min，之后利用抑制剂停止反应，最后经由生理盐水清洗3次，配制酶（3%～5%）红细胞悬液备用。

1.2.2 ABO血型及Rh血型检测 （1）ABO血型。此类血型检测方式包括2种：①玻片法。正定型：将抗A试剂、抗B试剂均在玻片（已标记）上滴1滴，并把受检者红细胞分别滴入A、B试剂中，通过缓慢倾斜2 min让其充足混合，若凝集提示阳性；反定型：将A红细胞、B红细胞试剂均在纸板（已标记）上滴1滴，分别滴入1滴受检者血清，混合观察凝集情况。②试管法。于做好标记的2支试管中分别滴入1滴抗A、B试剂，随后把1滴受检者红细胞悬液加入2支试管中，然后进行离心，速率为3400转/min，离心1 min，观察凝集情况。（2）Rh血型定型。采取玻片法，把1滴抗D滴在玻片上，并于其上加入1滴受检者红细胞悬液，若凝集提示阳性。

1.2.3 不规则抗体检测 于3支试管中均加入2滴血清、1滴分型细胞、700 μL低离子介质及2滴凝聚胺，然后进行离心，3400转/min，离心1 min，去掉上清，在3支试管中分别加入2滴重悬液，轻轻晃动观察凝集情况，若凝集提示不规则抗体阳性。另外对于血型为Rh阴性血的孕妇来说，还要进行抗人球蛋白检查，以确定不规则抗体检查结果。

1.2.4 IgG抗A/B效价测定 采取酶法测定方式，选取受检者血清50 μL、2-Me应用液50 μL，将其封闭，于37℃环境下孵育15 min，然后加入700 μL生理盐水进行稀释。选择1∶32、1∶42、1∶128、1∶256 4 管，在其中加入 1 滴应酶处理红细胞A/B，37℃环境下孵育 7 min，离心 1 min，3400转/min，若效价在1∶64及以上提示阳性。对于孕妇血型为“O”、丈夫血型“AB”来说，行IgG抗A及抗B效价测定；对于夫妇血型相符者来说，则不用行IgG抗A/B效价测定。另外，对IgG抗A/B效价在1∶64及以上的孕妇进行临床干预。

1.3 观察指标 对200例受检者不规则抗体检测结果进行统计分析。观察和统计2组孕妇新生儿溶血病发生情况，包括溶血病发病率、新生儿血清总胆红素浓度等。

1.4 统计学方法 对本组研究的数据采用SPSS 19.0统计软件进行分析。计量资料采用“±s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不规则抗体检出情况 200例受检孕妇中，IgG抗A/B效价在1∶64及以上者103例，占51.5%；IgG抗A/B效价在1∶64以下者97例，占48.5%。不规则抗体检测阳性12例，占6.0%；阴性188例，占94.0%。

2.2 2组新生儿溶血病发生情况比较 对照组200例孕妇新生儿溶血病发生30例（15.0%），受检组新生儿溶血病发生8例（4%），2组比较差异有统计学意义（χ2=14.074，P＜0.05）。2组新生儿血清总胆红素浓度比较差异有统计学意义（χ2=11.589，P＜0.05）。见表 1。

表1 2组新生儿溶血病发生情况比较［n（%）］

3 讨论

近年来，血型不合引发的新生儿溶血病在临床上比较常见，主要原因包括以下几点：（1）母婴血型不合，母体红细胞缺乏胎儿红细胞中含有的某种血型抗原，当这种血型抗原经由胎盘进入母体后，会对母体产生相应的免疫性抗体[3]。（2）母体通过输血等方式或天然存在于胎儿红细胞血型抗原对应的抗体，这些抗体经由胎盘进入胎儿体内，与红细胞出现反应，导致其红细胞被破坏，进而出现溶血病[4]。溶血病主要表现为黄疸、贫血、血清总胆红素浓度较高等，严重时导致新生儿智力下降[5]。因此，产前及时的进行不规则抗体检测对预防新生儿溶血病具有十分重要的意义。

相关报道称母体为“O”型血、新生儿为“A”型时，新生儿溶血病发生率比新生儿B型高，这是因为胎儿红细胞A位点比B位点多[6]。本研究中，200例孕妇经不规则抗体检测，检出IgG抗A/B效价在1∶64及以上高达51.5%，不规则抗体检测阳性率为6.0%[7-8]。对上述孕妇进行临床干预，结果显示，受检组新生儿溶血病发生率为4.0%。明显低于对照组的15.0%（P＜0.05），且受检组新生儿血清总胆红素浓度明显低于对照组（P＜0.05）。可见产前进行不规则抗体检测，能及时发现血型抗体效价异常孕妇，给予相应的干预处理，以降低新生儿溶血病发生率，减轻溶血程度[9]。建议孕妇在妊娠16～20周开展第1次血型抗体检查，于30周开始第2次检查[10]。

综上所述，产前不规则抗体检测可作为预防孕妇产后新生儿溶血病诊断的重要指标之一。

[1] 王兰芳,蔡娟.孕妇产前血型不规则抗体检测1450例临床分析[J].蚌埠医学院学报,2011,12（1）:69-70.

[2] 林华峰,包广杰.孕妇血型不规则抗体检测在新生儿溶血病预防中的意义[J].国际检验医学杂志,2012,2（6）:764-765.

[3] 彭静.血型不合孕妇产前免疫性抗体检测对产后新生儿溶血病的诊断研究[J].医学理论与实践,2013,43（19）:2538-2540.

[4] 华敏玉,姜建,洪俊.不规则抗体检测在预测Non-ABO-HDN中的作用[J].中国输血杂志,2014,27（3）:257-258.

[5] 李就文，陈昌达，陈超群.微柱凝胶检测在新生儿溶血性疾病中的临床应用[J].中外医疗，2011,3（13）：7-8.

[6] 吴勇，吴远军，陈宝婵，等.红细胞血型不规则抗体的检测和分析[J].临床输血与检验，2010,7（4）：343-346.

[7] 林甲进,朱碎永.孕妇血型不规则抗体检测在诊断非ABO-HDN中的应用价值[J].中国妇幼保健,2009,24(11):1488-1490.

[8] 王兰芳,蔡娟.孕妇产前血型不规则抗体检测1 450例临床分析[J].蚌埠医学院学报,2011,36(1):69-70.

[9] 林华峰,包广杰.孕妇血型不规则抗体检测在新生儿溶血病预防中的意义[J].国际检验医学杂志,2012,33(6):764-765.

[10] 钟继生,张志强,陈翔,等.孕妇血型不规则抗体检测对预防新生儿溶血病HDN的临床意义[J].中外医学研究,2014,11(20):80-81.