赣南地区桃金娘果实多酚含量研究

刘晓东 龚小娇 廖禹东 郭忠 李明

摘要：桃金娘Rhodomyrtus tomentosa（Ait.）Hassk.为桃金娘科植物，属灌木，入药部位主要有根、叶以及果实，民间还以果实作为副食品以及酿制保健酒。本实验主要对江西省赣州市桃金娘果实富含的多酚类物质进行含量测定，并对相应的抗氧化活性进行检测，为合理开发利用赣南地区桃金娘果实提供理论依据。

关键词：桃金娘;多酚;抗氧化

【中图分类号】G644.5 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2021）14-01

桃金娘为桃金娘科桃金娘属灌木，国内主要分布在江西、福建、广东、广西、云南、贵州、湖南最南部及台湾等，入药部位有根、叶以及果实，功效为活血通络，收敛止泻。临床上将桃金娘开发成标准桃金娘油用于治疗急性支气管炎效果较显著[1]，刘立立[2]等对标准桃金娘油治疗慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病进行了系统评价，发现标准桃金娘油治疗慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病有效，安全性好。张奕[3]等对利用标准桃金娘油治疗分泌性中耳炎进行系统分析，发现有一定疗效。经笔者实地走访赣州地区发现，赣南地区人民每年七八九月间广泛食用桃金娘果实，同时也会将桃金娘果实泡酒食用，当成滋补型药酒进行食用，但通过走访也发现村民食用过量桃金娘果实后可以会引起便秘、结石等症状。鉴于桃金娘果实丰富的营养成分，同时具有开发成保健品的市场前景[4]。罗爽妍等[5]对桃金娘果实进行成分以及活性分析，测定结果每克桃金娘相当于67.2µmol抗坏血酸和28.5µmol没食子酸当量，而且他们认为桃金娘现出的高抗氧化性，与含大量多酚类物质有关。谷荣辉[6]等利用HPLC-TOF-MS法对桃金娘根、枝、叶与果实的化学成分进行分析，在果实中分离得到没食子酸、白藜芦醇、白皮杉醇、没食子酸乙酯、maslinic acid 5个成分。肖婷等[7]利用HPLC方法测定没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、鞣花酸、白藜芦醇5种酚类成分的含量发现，6个产地桃金娘中没食子酸和鞣花酸含量都较高，其中云南产地桃金娘中没食子酸、鞣花酸、白藜芦醇含量为6个产地中最高;DPPH法抗氧化能力的测定结果显示5种酚类成分抗氧化具有良好表现，抗氧化作用均强于VC的活性，且没食子酸的抗氧化活性最强。

根据以上信息，本课题主要利用高效液相色谱法研究赣南地区桃金娘果实富含的多酚类物质进行含量测定，并对赣南地区桃金娘果实相应的抗氧化活性进行检测，为合理开发利用赣南地区桃金娘果实提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料与试剂

桃金娘，产地为江西省赣州市大余县，采收时间为2019年9月份，采收后立即进行烘干，烘干后于零下15℃环境中冷冻保藏，干燥后的样品再次用中药粉碎机磨碎，后过120目筛混合后备用。没食子酸对照品（中国食品药品检定所）、白藜芦醇对照品（中国食品药品检定所），甲醇为色谱纯，水为哇哈哈纯净水。

1.2仪器与设备

高效液相色谱仪（waters 2695;PDA-3000二极管阵列紫外检测器），十万分之一电子天平（精度0.1mg，METTLER TOLEDO，LE204E），jzx-9070MBE数显鼓风干燥箱，YF-11B型中药粉碎机;超声波清洗机（KQ-300DE型超声波清洗机、300w、频率40）。

1.3实验方法

1.3.1多酚含量的测定

取150 mg的干燥粉末，溶于15 mL 90%甲醇中，超声提取15分钟，以6 000转每分钟的方式离心10分钟，离心沉淀后取上清液。重复提取沉淀物3次，直至上清液变为无色。混合前面四次提取离心得到的上清液，在40摄氏度条件下旋转蒸发去除甲醇。通过5 mL 100%甲醇回收旋转蒸发后的剩余物，剩余物用0.45 nm的PTFE注射器式过滤器过滤，及得到提取物。提取物于零下15℃保存备用。整个操作过程在避光橱中进行。[5]精密称定桃金娘果提取物样品15.00 mg，精密加入甲醇2mL溶解，摇匀，滤过，即得。

供试品处理：流动相采用色谱70%或80%甲醇梯度洗脱，0～20 min，5%A;22～25 min，8%A;42～70 min，11%A;72 min，14%A;74 min，17%A;76～90 min，22.5%A;92 min，100%A;體积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长为280 nm;进样量10μL。

对照品处理：取没食子酸2.00 mg、白藜芦醇2.00mg置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液。对照品色谱条件：流动相采用色谱纯70%或80%甲醇梯度洗脱，0～20 min，5%A;22～25 min，8%A;42～70 min，11%A;72 min，14%A;74 min，17%A;76～90 min，22.5%A;92 min，100%A;体积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长为280 nm;进样量10μL。

结果：精密吸取供试品溶液10μL，连续进样6次，测定色谱峰面积。结果显示没食子酸、白藜芦醇的平均含量分别为15.5911（mg·g-1）和6.2123（mg·g-1）。

讨论：目前，桃金娘果实、根、叶所含化学成分的研究，主要集中具有抗氧化活性的多酚成分、黄酮类成分，具有保肝降酶作用的桃金娘多糖成分，具有治疗急、慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病的挥发油成分，另外还有具有抗炎、平喘作用的石竹烯成分、对皮肤霉菌病有一定作用的石竹烯氧化物，最后肖婷等[6]还发现桃金娘具有α-葡萄糖苷酶抑制活性，具有一定的降血糖作用，但降血糖单体还有待进一步分析研究。目前临床上将桃金娘开发成标准桃金娘油用于治疗急、慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病，但是作为其他药物开发未见，基于桃金娘良好的抗氧化活性、降血糖作用，以及丰富的营养价格，有一定的药物以及保健品开发空间。同时，目前关于桃金娘的研究主要集中在桃金娘果实的抗氧化性能上，且产地集中在广东、广西等地，产地覆盖不够广阔，对于不同产地的桃金娘的果实纵向比较少见，针对桃金娘的根、叶所含各类化学成分的对比研究少见，可待进一步研究。2015年CFDA（2015年第53号）已经明令禁止销售标准桃金娘油，主要是经国家药监总局检查发现，德国保时佳大药厂的标准桃金娘油肠溶胶囊（儿童型）的实际处方与注册申报处方不一致，工厂留存的生产记录未能说明原料“标准桃金娘油”的原料来源，不符合《药品生产质量管理规范》第一百五十二条、第一百六十一条的要求，违反《药品注册管理办法》第八十四条第二款的规定。临床上研究发现将桃金娘开发成标准桃金娘油用于治疗急性支气管炎效果较显著[1]，刘立立[2]等对标准桃金娘油治疗慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病进行了系统评价，发现标准桃金娘油治疗慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病有效，安全性好，张奕[3]等对利用标准桃金娘油治疗分泌性中耳炎进行系统分析，发现有一定疗效。在临床疗效和2015年CFDA（2015年第53号）已经明令禁止销售标准桃金娘油的决定间，存在进一步研究桃金娘油的必要性，说明桃金娘油具有国内潜在开发空间。赣南地区人民广泛食用桃金娘果实，同时也会将桃金娘果实泡酒食用，当成滋补型药酒进行食用，但临床发现村民食用过量桃金娘果实后可以会引起便秘、结石等症状。此种情形下，我们不仅要关注不同产地的桃金娘果实多酚类成分的抗氧化性能力对比上，同时要密切关注桃金娘果实潜在的不利于身体健康的化学成分，只有通过一系列实验筛查出可能导致便秘、结石的化学成分，在后期的提取等工艺中予以充分关注，设计分离去除的流程，才能使桃金娘果实开发成为可能。

参考文献：

[1]何燕玲.阿奇霉素联合标准桃金娘油治疗急性气管-支气管炎的效果分析[J].系统医学，2018，30（9）：P.71-73.

[2]张奕，周松.标准桃金娘油治疗分泌性中耳炎的系统评价[J].华西医学，2013，28（1）：56-58.

[3]刘立立，陈路佳，占美.等.标准桃金娘油治疗慢性支气管炎和慢性阻塞性肺疾病的系统价[J].中国药房，2012，23（16）：1496-1500.

[4]王文林，覃杰凤，韦持章，等.野生桃金娘果实营养成分分析与评价[J].中国南方果树，2011，40（2）：48-49.

[5]罗爽妍，王超，段翰英，等.野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力[J].食品科学，2015，36（17）：77-82.

[6]谷荣辉，黎平，王艺舟，等.HPLC-TOF-MS分析桃金娘不同部位的化学成分[J].中草药，2018，49（3）：554-560.

基金项目：江西省教育厅科学技术研究项目（181578）

通讯作者：龚小娇，赣南卫生健康职业学院药学系。