不同浓度异噁唑草酮悬浮剂高效液相色谱分析

李继友，高丽梅

（1.天津渤海职业技术学院，天津300402，2.天津市华宇农药有限公司，天津300384）

异噁唑草酮属高效低毒除草剂，是一种有机杂环类选择性内吸型异噁唑类除草剂，主要用于玉米、甘蔗等旱作物苗前土壤处理。异噁唑草酮主要经由敏感杂草幼根吸收传导，抑制对羟基苯丙酮双氧酶(HPPD)的产生进而阻止形成叶绿素，抑制光合作用，导致杂草失绿枯萎死亡。每亩地有效成分用量仅为6g，当在土壤中施用异噁唑草酮后，因土壤墒情不好有效成分滞留于表层土壤中，不能及时防除杂草，但较长时间不被分解，等到降雨或灌溉时，仍能防除杂草，甚至能杀伤和抑制长到4～5叶的敏感杂草。异噁唑草酮原药2014年才在我国正式登记，登记的制剂品种也只有拜耳公司的一个水分散粒剂品种，20%异噁唑草酮水悬浮剂的开发，能够为我国提供一个新的对环境友好的玉米田土壤处理的优秀除草剂，成为取代莠去津、乙草胺、甲草胺、以及异丙甲草胺等的重要除草剂之一[1～3]，对实现我国玉米田杂草的可持续控制有重要意义。目前用高效液相色谱法分析异噁唑草酮水悬浮剂溶液有效成分含量国内未见报道。因此，本文使用迪马C18（3.5um，100x4.6mm）柱对不同浓度异噁唑草酮水悬浮剂试样中有效成分进行定量分析研究，并对检测波长进行优化，优化后为420nm，最大限度的提高检测精度避免干扰，该方法线性相关系数好，精密度能满足分析要求，适合于异噁唑草酮水悬浮剂溶液质量的检测控制。

1 实验部分

1.1 试剂

异噁唑草酮原药（98%，江苏中旗作物保护股份有限公司）；乙腈(色谱纯，迪马科技有限公司)；氯化钠(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；纯净水(娃哈哈纯净水)。

1.2 仪器

仪器：Agilent1260液相色谱仪-紫外检测器：电子天平：MS304S；Vortex-genie2快速混匀器；移液枪，移液管，容量瓶，分液漏斗，滤膜，注射器等。

1.3 色谱操作条件

流动相：V（乙腈）∶V（水）=65∶35

流速：1mL/min

进样量：20μL

柱温：35℃

检测波长（紫外）：220 nm

保留时间：异噁唑草酮约2.289min,异噁唑草酮的高效液相色谱图见图1。

图1 异噁唑草酮液相色谱图

2 结果分析与讨论

2.1 流动相的选择

实验过程中分别使用了 V(甲醇)∶V（水）＝80∶20、V（乙腈）∶V（水）=65∶35等流动相配比进行试验研究，结果发现乙腈—水(体积比65∶35)为实验的流动相时，对异噁唑草酮的分离效果最好，峰形尖锐，保留时间适中，最后确定实验的流动相为乙腈—水(体积比 65∶35)。

2.2 检测波长的选择

利用紫外可见分光光度计对异噁唑草酮试样的紫外可见吸收进行扫描，发现异噁唑草酮试样在220nm波长下具有较强吸收。利用高效液相色谱对不同浓度的异噁唑草酮试样在220nm波长下进行测定，试验结果显示试样的吸收峰强且杂质的响应值小，在3min内能达到基线分离。因此，确定用220nm为检测波长。

2.3 标准曲线的测定

称量22.1mg标准品异噁唑草酮（含量97.5%），用乙腈溶液定容到25mL容量瓶中，摇匀后得到浓度为861.9mg a.i./L的异噁唑草酮标准母液，待用。

设定5个梯度浓度，配制5种不同浓度(质量分数)的标样溶液。稀释上述标准母液，用乙腈定容，摇匀后得到浓度分别为 0.400、1.00、2.00、4.00、6.00mg a.i./L标准曲线系列浓度溶液（异噁唑草酮标准溶液配制见表1），将配制的标准曲线溶液按照仪器条件依次进样，以进样浓度(质量分数)为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标样线性关系曲线，结果如图2所示。可以得到异噁唑草酮的线性回归方程和相关系数:y=21.7886x-0.1534,R2=0.9998。实验结果表明异噁唑草酮在测定的质量分数范围内具有良好的线性关系。

标准曲线测定结果如表2所示，异噁唑草酮标准曲线图见图2。

图2 异噁唑草酮标准曲线图

表1 异噁唑草酮标准溶液配制表

表2 异噁唑草酮标准曲线测定结果

2.4 添加回收率的测定

通过对试样回收率的试验可以考察该分析方法的准确度。设定两个添加浓度，添加浓度分别为8.00、250μga.i./L。添加溶液配制见表3，每个添加浓度重复测定5次。异噁唑草酮水中添加回收试验结果见表4。在相同的色谱操作条件下进行测定。可以测得，添加8.00μga.i./L.的平均回收率为88.4%，RSD为6.78%；添加250μga.i./L.的平均回收率为98.0%，RSD为4.11%。

表3 添加溶液配制表

3 结论

采用高效液相色谱法测定异噁唑草酮含量，以乙腈-水为流动相，迪马 C18（3.5μm，100x4.6mm）柱对不同浓度异噁唑草酮水悬浮剂试样中有效成分进行了定量分析，检测波长为420nm，8.00μga.i./L、250μga.i./L异噁唑草酮悬浮剂的相对标准偏差RSD分别为6.78%、4.11%；平均回收率分别为88.4%、98.0%。质量浓度0.40～6.00mg/L之间线性相关系数为R2=0.9998。通过实验表明，该方法具有分离效果好、精密度和准确度高、操作简便、分析时间短等特点，符合定量分析要求，是进行异噁唑草酮含量较为理想的分析方法。

表4 异噁唑草酮水中添加回收试验结果

参考文献:

［1］邓秀成.30%硝磺·烟嘧·莠去津油悬浮剂防除玉米田间杂草试验[J].现代化农业,2013,412(11):68-69.

［2］胡玫,过欣雨.24%硝磺·烟嘧·莠可分散油悬浮剂高效液相色谱分析[J].河南化工,2017,34(2):54-56.

［3］朱雅林,董卫东,孙士武,等.21%烟嘧·莠去津油悬浮剂的高效液相色谱定量分析[J].天津农林科技,2012(5):4-6.