甘南牦牛杂交改良中可视输精枪和排卵测定仪的应用效果

郭淑珍，包永清,*，马登录,*，马忠涛+，王文飙，拉毛杰布，杨润喜， 包扎西加措，才让闹日，徐 海

(1.甘南藏族自治州畜牧工作站，甘肃合作747000；2.夏河县畜牧工作站，甘肃夏河 747100)

甘南州是甘肃省乃至全国的主要牧区之一，地方优良畜种甘南牦牛是甘南州的主体畜种,牦牛肉、牦牛乳等纯天然无污染的绿色畜产品是甘南州的优势畜产品。牦牛产业涉及全州7县1市，涵盖全州69.5%的乡镇。据统计，2020年年末各类牲畜存栏351.23万头(只),其中全州存栏牦牛108.5万头(其中能繁母牛占58.02%)，全州牛肉产量5.39万t，奶产量9.94万t。多年来，为了提高牦牛个体生产性能及肉奶产量，我州先后引进野牦牛及大通牦牛冻精、娟姗牛、黑暗格斯牛等优良冻精利用人工授精技术进行牦牛提纯复壮和杂交改良工作，取得了一定的成效。但由于以往人工授精采用传统的直肠把握输精方法，发情鉴定也采用外部观察和直肠检查相结合的方法，这对人工授精技术人员的要求较高，需要技术人员有较高的技术含量，并且操作起来需要多人协作，整体耗时费力，如果操作不当还有可能造成感染，对牦牛的损害较大。此外，牦牛发情表现没有黄牛明显，发情鉴定比较困难，致使牦牛人工授精受胎率不高。2019年来，为了解决牦牛人工授精中所遇到的发情鉴定不准确、受胎率低、农牧民繁殖员对人工授精技术掌握不够等诸多难题，笔者在牦牛杂交改良中采用牛可视输精枪和排卵测定仪进行人工授精操作，提高了受胎率，取得了明显的杂交效果。

1 甘南牦牛杂交改良现状

牦牛是青藏高原特有畜种，主要分布在青海、西藏、四川、新疆、甘肃、云南等六省区的高原草地和高寒山区。对高海拔、寒冷、缺氧、缺草等恶劣气候条件有很强的适应能力，牦牛常年放牧、野性较大，很大程度上限制了冻精改良技术的开展，从而在高原牧区推广应用牦牛冻精改良技术的难度相对较大。甘南州牦牛人工授精工作起始于20世纪70年代，主要用野牦牛、半血野牦牛、海福特牛、西门塔尔牛、黑白花牛、黑安格斯牛冻精在碌曲、玛曲、夏河、卓尼等县开展牦牛提纯复壮和种间杂交试验，平均受胎率30%左右。由于牦牛混群放牧饲养，冬春饲草料缺乏，人工授精操作不娴熟，受胎率和繁殖成活率低，再加上当地母牦牛体格偏小，而杂种犏牛的胎儿大，母牦牛到怀孕后期往往缺乏营养，易造成母牛难产和死亡，影响了牧民群众的积极性[1]。为了大力发展高原奶牛产业，从2014年开始，我州用娟姗牛冻精人工授配甘南母牦牛繁育生产优质犏牛，犏母牛用作奶牛，犏公牛育肥出栏。所产的娟犏牛公牛犊平均初生重20.40 kg，体高62.16 cm，12月龄平均体重145.33 kg，体高100.40 cm，18月龄平均体重210.53 kg，体高111.93 cm；娟犏牛母牛犊平均初生重19.04 kg，体高59.63 cm，12月龄平均体重133.17 kg，体高99.22 cm,18月龄平均体重193.73 kg，体高108.67 cm。娟犏公母牛犊初生重比同期公母牦牛犊分别重7.05 kg，6.17 kg，分别提高了52.81%，47.94%；娟犏公母牛犊18月龄体重比同期公母牦牛犊分别重74.30 kg，65.95 kg，分别提高了54.54%，51.61%；杂交效果显著，很受群众欢迎，使甘南州犏牛繁育工作取得了实质性进展[2]。但由于农牧民文化水平低，科技宣传不够，科技投入欠缺，技术人员培训不够，基础设施薄弱，技术服务体系不完善，牦牛饲养管理条件差，科学养殖技术落后，配种员队伍不稳定，特别是牦牛发情鉴定、直肠检查和直肠把握输精法操作难度大，除专业技术人员外，农牧民群众很难掌握，人工配种成功率较低等因素制约着牦牛冻配改良技术的推广。为此，急需推广先进的配种设备及技术加大我州畜种改良力度，提高牦牛生产性能，促进产业发展。

2 材料与方法

2.1 试验母牛及分组

试验组：在夏河县选取阿木去乎镇牙利吉赞格尔牦牛养殖合作社、兴辉奶牛养殖合作社、勒加秀毛牦牛养殖合作社等11个牦牛(奶牛)养殖专业合作社的年龄4～7岁、膘情中等、经产空怀的当年适配母牦牛985头，作为试验牛；以专业合作社为单位组成11个牦牛人工授精群，试验母牦牛在枯草期进行补饲，添加母牛营养补充饲料，满足母牛在各个时期的营养需求；试验母牦牛均不带犊、当年能发情配种。如果试验母牦牛在1个情期人工授精后有返情的可继续人工授精补配。

对照组：采用郭淑珍等发表的“高寒牧区娟姗牛与甘南牦牛杂交效果观察”一文中的数据[3]。

2.2 试验时间

2019年6月上旬对州县畜牧站及专业合作社繁殖技术人员进行可视输精枪及排卵测定仪使用的技术培训，6月下旬开始进点进行人工授精，试验时间为2019年6月下旬至9月上旬。

2.3 试验地点

项目在夏河县阿木去乎镇牙利吉办事处的兴辉奶牛养殖及赞格尔、勒加秀毛、阿纳扎西、彭次合、雪域更盼、格勒更盼、达曲牦牛养殖专业合作社和吉仓乡那娄才奶牛养殖专业合作社、木道奶牛养殖专业合作社、西合道杰犏雌牛养殖专业合作社实施。

2.4 试验器械及材料

牛用可视输精枪、排卵测定仪和精液解冻恒温杯从北京倍特双科技发展有限公司购买，娟姗牛常规冻精和性控冻精从大连金弘基种畜有限公司购买，氯前列烯醇钠(PG)、消毒液、输精枪套管、一次性长臂手套、一次性乳胶手套、喷洒壶、缺口剪等人工授精所用小器械及耗材均从市场购买。

2.5 试验方法

人工授精母牦牛于配种季节前1个月组群，与种公牛及其他牛群隔开，并在独立的牧场放牧，大多数母牦牛采用自然发情配种，个别母牦牛直至8月下旬仍不发情的采用激素(PG)处理后配种。

2.5.1 人工授精 人工授精时，母牦牛群体中按照1∶30左右投放结扎的试情公牛，放牧员跟群观察发情情况，主要观察母牦牛的外阴变化、生殖道变化以及发情时间等，发现有外观发情变化的母牦牛采用排卵测定仪进行数值测定，测子宫口分泌黏液的数值，数值在280～300 Ω范围时，用可视输精枪观察母牛阴道黏膜变化规律，当子宫粘膜充血潮红，子宫颈外口柔软开张，黏液逐渐变稠时，使用可视输精枪输精，间隔12 h重复输精1次，即早晨和上午发情的母牦牛，当天下午和次日上午输精。下午和晚间发情的母牛，次日早晨和下午输精。输精后做好配种记录，准确填写母牛号、发情配种时间、发情表现与冻精号等内容。做好妊娠检查，若最后一次输精后30～60 d内有返情的母牦牛，重新进行输精。并及时检查和填充液氮，以防液氮消耗后影响冻精质量。

2.5.2 妊娠检查 在激素药物处理前，必须对所有选择母牛进行妊娠检查，确定空怀和无生理缺陷的母牛才能进行药物处理。母牛配种后3个月内用直肠检查和兽用B超仪进行初检和复检，通过直肠检查和影像分析，确定母牛是否怀孕。

2.5.3 受胎母牛的饲养管理 受配母牦牛由专人管理，白天跟群放牧，随时观察母牦牛的吃草饮水情况，进入枯草期后白天放牧，晚上进行补饲，提高怀孕母牦牛的营养水平，保证能量和蛋白质的供给，特别是补充蛋白质饲料，促进胎儿生长发育。

2.5.4 犊牛饲养管理 犊牛出生后，要放在5～10 ℃的环境温度下，地面应干燥柔软，并及时让犊牛吃上初 乳，以增加抗病力，当母牛的奶水不足时，用牛奶进行人工喂养。

3 结果与分析

对2019年采用娟姗牛冻精用排卵测定仪和可视输精枪进行人工授精的985头母牦牛的繁殖情况进行统计。结果表明，用可视输精枪输精法冻配的母牦牛受胎率、产仔成活率、繁殖成活率等指标均比2018年前用直肠把握输精法冻配(对照组)[1]的高。其中，受胎率为73.78%，比直肠把握输精法(受胎率57.48%)提高16.30%，流产率为6.17%，比直肠把握输精法(流产率7.22%)降低1.05%，产仔成活率为96.52%，比直肠把握输精法(产仔成活率92.80%)提高3.72%，繁殖成活率为62.03%，比直肠把握输精法(繁殖成活率49.49%)提高12.54%。详见表1。

表1 不同输精方法在牦牛人工授精中的繁殖情况

4 结论与讨论

(1)近年来，为了减少草畜矛盾，发展草原生态畜牧业，提高畜种质量和数量，甘南州采用牦牛冻配改良技术，用野血牦牛冻精提纯复壮甘南牦牛，用娟姗牛冻精杂交改良牦牛繁育犏牛，用黑安格斯肉牛冻精进行牦牛三元杂交，取得了一定的效果。但传统的直肠检查和用直肠把握输精法进行牦牛人工授精，技术难度较大，养殖户很难掌握，受胎率较低。而可视输精枪改变了传统输精方式，无需直肠把控，避免人工直肠操作，能很直观的观察母牦牛阴道及子宫颈，把本看不到的输精细节通过高清显示器展现在操作者面前，同时，也可以看到母牦牛生殖系统病变，有效预防人畜共患疾病的发生，并且会让母牦牛在舒适、安全感的状态下接受输精。可视输精枪采用一次性输精套管及操作袋，无需重复清洗、消毒，干净卫生，避免交又感染。配合排卵测定仪，通过测定仪的电阻数值可以准确判定母牦牛发情状况[4]。采用可视输精枪输精，无需专业人员,操作简单，通过简单培训，养殖户可以直接为自己的母牦牛进行输精，降低了养殖成本。

(2)应用可视输精枪在深入子宫授精时清晰度较高，容易掌握授精位置，可以轻松通过子宫颈，直接输精到准确位置，真正实现子宫内输精，大大提高了人工授精受胎率及繁殖成活率。从2019年开始，可视输精枪、排卵测定仪在甘南州牦牛人工授精过程中广泛应用，通过课堂讲解和现场操作技术培训，使牦牛(犏牛)养殖专业合作社的养殖人员都能熟练操作，人工授精母牦牛的受胎率保持在60%以上。从上述试验结果可见，与采用直肠把握输精法人工授精的母牦牛受胎率(57.48%)、繁殖成活率(49.49%)相比，采用可视输精枪人工授精的母牦牛受胎率(73.78%)、繁殖成活率(62.03%)更高，分别提高16.30%，12.54%，推广应用前景广阔，特别适用于专业合作社及养殖场。

(3)可视输精枪图像清晰可见，不局限使用环境，携带方便，可拍照、录像、输出、打印。适用范围广，可以在母牛空怀期应用，通过空怀期母牛的产道观察，早期发现母牛生殖系统疾病，如阴道炎，子宫内膜炎，子宫发育不良等；在母牛发情时，通过可视输精枪检查母牛阴道颜色和子宫黏膜的变化，可以掌握母牛的排卵时间，做到适时配种[5]。