提高肉牛冻精人工授精受胎率的几项措施

王鸿周，施巧婷，王二耀，冯亚杰，陈付英，吴 姣，赵洪昌，徐照学＊

（1.河南省农业科学院 畜牧兽医研究所，河南 郑州 450008；2.河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州 450002）

国家“十二五”计划鼓励肉牛集中专业育肥，大力发展适度规模养殖，稳步推进标准化生产，提高肉牛生产效率。人工授精技术是肉牛规模化生产必备的技术，人工授精受胎率是反映人工授精技术高低的标准。为了响应国家的号召，笔者通过对影响人工授精技术受胎率的因素进行了总结分析，提出了提高肉牛人工授精受胎率的几项措施，以期为我国肉牛业的发展，尽一点绵薄之力。

1 加强对种牛的科学饲养管理

1.1 选择优良公、母牛做种牛

根据不同的肉牛品种、选择本品种母牛时，应注意挑选性成熟早、发情排卵情况正常、产犊间隔短，双胎率和配种指数高的母牛，特别对于肉牛来说，选择产犊间隔短、双胎率和配种指数高的留做种用更好［1］。选择公畜时，应参考其亲代的生产性能，并对肉牛个体的生殖系统发育情况、交配能力、性欲、射精量、精子形态、精子密度、和精子活力等进行检查，然后采集公牛精液进行试配，根据试配结果再选择是否留用。有研究表明，种公牛的精子形态与受胎率有一定关系，发现头部越长越窄的精子，受胎率越高。在人工授精过程中应注意对种公牛精子形态的选择。

1.2 加强对种公牛的饲养管理

种公牛是人工授精技术的精液来源，高品质的精液是保证人工授精受胎率的前提，应加强对种公牛的饲养管理，以保证精液的优良品质。

应根据所养肉牛品种生产情况及时检查和调整种公牛日粮，以保持稳定高产。种公牛饲料应包含对种公牛的繁殖性能有重要作用的矿物质、微量元素和维生素和蛋白质，保证全价营养。应选用适口性好、容易消化的饲料，精、粗饲料搭配比例适当。种公牛对缺乏蛋白质非常敏感，应注意添加补充蛋白质饲料。精饲料应以蛋白质含量高的优质豆科干草为主，搭配禾本科牧草，也可适当添加经过加工的优质玉米秸秆饲料，而不用酒糟、果渣及粉渣等粗料；青贮料喂量不能过多，应和干草或揉搓玉米秸秆搭配饲喂，并以干草为主。冬、春季节可以用胡萝卜补充维生素A。应注意适量饲喂多汁饲料和粗饲料，以免种公牛长成“草腹”，另外，能量饲料也不可饲喂过量，饲喂过多易造成种公牛过肥而降低其生殖机能；由于菜籽饼、棉籽饼含有降低精液品质的物质，不宜用作种公牛的饲料；豆饼虽富含蛋白质，但饲喂过多，易在种公牛体内产生大量对精子形成不利的有机酸，因此应控制喂量。一般在日粮中添加一定比例的动物性饲料来补充种公牛对蛋白质的需要，主要有鱼粉（进口的）、肉骨粉、蛋粉、蚕蛹粉，尤其在采精频繁季节补加营养的情况下更是如此。一般当粗饲料为豆科牧草时，种公牛的日粮精料中就不应再补充钙质，特别是对老年公牛，日粮中的钙不宜过多［2］。

针对公牛记忆力强、防御反射能力强和性反射能力强即“三强”的特点，必须指定专人饲养和管理.中途不要随便更换饲养员。尽量不要让饲养员、采精人员参加兽医治疗工作（如打针、灌药等），平时更不可以虐待公牛，以免公牛报复。为保证种公牛行动活泼、体质健康、性情温顺、生殖机能旺盛，必须让种公牛有合理的运动，坚持每天上下午各运动1次，每次运动1h左右。要坚持每天定时刷拭牛体，加强对种公牛外生殖器官的护理，定期对种公牛的外生殖器官进行按摩，每次5至10min。种公牛易患蹄病而影响采精配种，应经常对种公牛的蹄趾进行检查，平时注意清理牛蹄下附着的污物。发现蹄病要及时治疗，并在每年春、秋两季各进行一次修蹄并矫正蹄形。应保证种公牛有充足洁净的饮水，但在运动前和采精前后各30min内，不要饮水，以免影响公牛健康，冬季最好喂给牛温水。为防止牛脾气变坏，应定期进行采精。坚持防重于治的原则，做好消毒防疫与疾病防治工作。

1.3 加强对母牛的饲养管理

后备母牛最好在6月龄时与育成公牛分群饲养，避免母牛过早交配，另外，根据肉牛不同生长强度、发育情况进行转群，同时称重结合体尺测量，对生长发育不良的进行淘汰。后备母牛在不同年龄阶段其生理变化与营养需求不同，应按其各阶段特点进行饲养管理。周岁以上后备母牛其消化器官已接近成熟，又没有泌乳和妊娠任务，到初配之前的饲养可以粗放一些，若保证有充足的优质粗料，就可以满足其营养需要，若饲喂条件差，应加强母牛配前补饲，并注意补充维生素、矿物质等营养物质，确保母牛繁殖机能正常，母牛正常的繁殖机能是母牛进行人工授精配种受胎的前提。繁殖母牛在配种前也应具有中上等膘情，若饲料缺乏，母牛过于瘦弱，则会影响母牛的繁殖力，导致母牛不发情。在母牛前一个泌乳期间保证有足够的平衡日粮，并且进行合理管理，能够提高人工授精的受胎率［3］。

妊娠母牛饲养直接影响养牛者的经济效益，妊娠母牛的饲养决定生产和能出售的牛数。犊牛是肉牛场生产的后备力量，尤其是对杂交犊牛的早期培育直接影响其以后的生产性能。应根据妊娠母牛、犊牛各阶段的营养需要，供给均衡的蛋白质、能量、矿物质、维生素、微量元素等营养。禁止饲喂霉烂变质、酸度过大、冰冻和有毒的饲料。严格禁止惊吓、踢打孕牛，注意孕牛不可以用剧泻药或注射引起子宫强烈收缩的药物，每天保持适量的运动，防止过役或重役，减少流产。做好牛的免疫预防工作。为促进母牛产后发情，应做好犊牛早期断奶工作，一般母牛在产后60～80d母牛发情已正常，可以进行输精配种，减少空怀，尤其原始种群若在产后营养缺乏以及环境恶化会明显地抑制发情，这种情况在放牧饲养的母牛群中也很明显。应及时把握空怀母牛的发情时间适时输精牛，若产后情期增加，则情期受胎率会降低［4］。另外，做好犊牛初生护理工作，犊牛出生后应立即用干抹布将口鼻黏液擦干净，用手把口鼻中的黏液抠出来，躯体上的黏液可以让母牛舔干净，犊牛脐带剪掉后用5%的碘酒消毒以防感染。保证犊牛及时吃上初乳，时间越早越好，最好能在出生后半小时到2h内喂给，促进胎粪的排出和增强机体免疫能力，提高产犊成活率。应尽早开始补饲，训练犊牛采食干草和饲料，补料量应随日龄的增加而逐渐增加，以促进犊牛消化系统的发育，增强利用犊牛粗饲料的能力，应保证供给犊牛充足的营养，提高其生长速度，以提高养牛经济效益［5］。

2 人工授精技术

2.1 使用优良冻精

目前，人工授精主要使用冷冻精液进行输精，因此需要优良的冷冻精液，品质优良的精液是获得高受胎率的基础，解冻后冻精质量须达到中华人民共和国颁布的《牛冷冻精液》GB4143—84国家标准。凡细菌菌落数超标的冻精坚决不用。因此，为了增加对优秀种公畜的利用率，常将精液进行处理延长精子在体外的存活时间和受精力，以便于保存和运输。人们一直对对冷冻技术、精子生理特性研究的不断深入，稀释液的成分和加工工艺不断完善，国内外已经出现专业化和商业化的冻精生产，然而稀释液对精子冷冻效果有重要的影响。国内外所用的冻精稀释液有所不同，陆汉希［6］运用 WLJY－9000伟力彩色精子质量检测系统系统地检测了用国内外稀释液处理的精子质量特征，发现国产自制的稀释液可和国外进口的稀释液相媲美，但在生产中应注意搅拌的程度，使其达到充分的混匀，但清洁度不如国外的好。张茂华等人［7］研究发现进口稀释液和国内稀释液对奶牛和肉牛冷冻精液的活率和畸形率影响不大，但是使用国内稀释液稀释的奶牛和肉牛精液的顶体完整率显著高于使用进口稀释液稀释的奶牛和肉牛精液的顶体完整率，受胎率较好。考虑到稀释液中添加卵黄会对精子的产生不利的影响，MOUSSAA 等［8］、胡建宏等［9］发现利用抗低温打击能力强的低密度脂蛋白（LDL）可以代替卵黄在牛精子冷冻过程中的作用，其冷冻精液效果比商业用的稀释液要好。OLLERO等［10］研究发现，维生素E是机体中重要的抗氧化剂，能提高精子顶体完整率和降低精子畸形率，且能提高冻精解冻后的精子活力。赵宪林等［11］研究发现在我国秦川牛精子稀释液中添加维生素E显著提高了冷冻精液解冻后的精子活力，精液品质明显得到改善。并且，在我国秦川牛精子稀释液中维生素E的适宜添加量为每毫升添加为0.04mg～0.08mg。目前市场上有细管冻精和颗粒冻精两种，孙建忠等人［12］对循化县使用细管冻精和颗粒冻精的使用效果进行了研究，发现与颗粒冷冻精液相比，细管冻精的受胎率高，并且具有省时、省力、操作简便，所用设施投入少等特点。目前，我国大型的种公牛站的冻精生产存在管理效率低，产品质量难以控制的现象，邓福金等人［13］运用计算机技术，建立种公牛冷冻精液生产管理系统，运用强大的数据库，预防冻精生产过程中可能出现的各种差错，通过计算机编程，优化生产工艺流程，减少精液浪费，提高冻精生产能力。实现从鲜精采集到冻精储存完整的可追溯性生产链，从而为优良冻精生产提供合适的环境保障。

2.2 适时输精

做好母牛的发情鉴定，适时输精配种，可提高肉牛的受胎率和牛场的经济效益［14］。不同品种和同一品种不同个体肉牛的发情情况不同，就算是同一个体但在不同季节，母牛的发情情况也不一样。牛的发情时间短、情况复杂，应根据母牛生理特点正确掌握母牛性周期的规律，根据发情各阶段的特点，及时发现发情母牛，摸清排卵规律，识别异常发情，准确判定母牛发情所处时期从而掌握配种时间，适时输精，防止误配漏配，是提高牛人工授精受胎率的关键。牛的发情时间短、情况复杂，通过观察发情行为、性兴奋和外阴变化症状来判定发情与阶段。然后进行直肠检查；手伸进牛直肠，触摸子宫角判断其长短、粗细、质地。触摸卵巢，检查卵泡大小、质地、发育程度来确定牛发情及阶段。

母牛适宜输精时间在发情旺期的5～18h期间。母牛实行两次输精，受胎率较高。一般情况下，母牛的发情持续期为18h，母牛在发情结束后平均10～15h排卵，卵子存活时间为18～20h，精子进入受精部位约2～13h，精子在生殖道内保持受精能力约24～50h，精子获能时间需3～4h。首次输精应在发情旺期的5～8h，即当母牛出现爬跨，阴户肿胀并分泌透明黏液，哞叫时可以输精，当阴户湿润、潮红、轻度肿胀，黏液开始较稀不透明时为最佳输精时间。第二次输精应在间隔8～12h后进行。大多数母牛常在夜间排卵，因此生产中应夜间输精或清晨输精。尤其在夏季应避免气温高时输精，以提高受胎率。对老弱母牛，发情持续期短，输精配种时间应适当提前［4］。做到老配早、小配晚、不老不小配中间。

2.3 输精方法

人工授精的输精方法有两种包括阴道开张器输精法和直肠把握输精法。生产中阴道开张器输精法存在输精部位潜，受胎率低的缺点，一般用于新鲜精液的输精，不适于冷冻精液的输精。

生产中一般用直肠把握法进行人工输精，其具体操作为：将发情母牛保定在配种架内，熟练时可不保定，将牛拴系于牛舍内或树桩上。输精员左手戴一次性塑料长臂手套，外面淋润滑剂，如肥皂、石蜡油等，侧身站立于牛体后面，先用手抚摸肛门，五指并拢成锥状，以缓慢旋转的动作伸入直肠内，排除积粪。助手用清水洗净外阴部并擦干，也可用一次性吸水巾擦干；或用75%酒精消毒并擦干：然后助手站牛体侧面用双手拇指和食指各捏一半阴唇向上提拉，使输精员清楚看到阴道口，待输精员将输精器插入后，用手抓住牛尾向一边拉，以免影响输精员输精操作。输精员用右手持输精器以30°角度（与水平面）通过阴唇插入阴道，当输精器碰到阴道上壁时，再以水平角度向前轻而缓慢地插入，避开尿道口，然后将左手伸入直肠内，沿前下方轻轻触摸，找到子宫颈并捏住子宫颈阴道端（注意不要把握过前，造成子宫口游离下垂，使输精器不易插入），这时开始两手配合，右手把输精器前端送到左手所捏部位，然后左右手配合摇动，避免输精器停留在阴道穹隆，使输精器前端进入子宫颈口，有时阴道壁可阻止输精器插入，通过后移输精器或把子宫颈前移再插入。左手前移继续改变子宫颈方向，使输精器越过褶壁轮，插入子宫颈深部5～8cm深的部位。让助手或自己用右手将输精器内精液缓慢推出，随即慢慢抽出输精器。若精液推出受阻，可以将输精器稍向后退，并将精液注入。输精器撤出后，左手最好在直肠内停留几秒，对子宫颈进行按摩，可防止精液逆流。

肉牛场实际输精操作时，牛只较多，应将配种架固定于牛舍一端或中间，在固定牛时牛屁股下面的绳子应低些，防止在授精操作时牛蹄踢伤人。在驱赶牛群时，可以拿根棍子，但不可抽打牛只，以防造成应激使受胎率下降，可以将发情牛集中起来，一次对一批牛进行输精，并由配种员做好配种记录，在牛身上可以用油漆在牛身上打好标记，以区别于未配母牛，然后将输过精的牛赶到运动场，再进行下一批牛的输精。在冻精解冻时要做到“三快”：快取、快投、快融解。解冻的温度应均匀稳定。应注意输精器械卫生，每输一头牛，应按规程对输精器材消毒。为防止污染，已消毒好的器材，不得与未消毒的手套、抹布等接触。在生产过程中若遇到子宫颈较细，尤其是处女牛，往往不容易将输精器插入，应有耐心，要防止粗暴，不可用力过大，以免损伤阴道壁和子宫颈。若子宫颈难以插入，可以用消过毒的扩宫棒进行扩张。实在难以插入就应放弃，不可对一只牛操作时间过长。在生产中应确保将精液输在正确的输精部位。

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