NY/T 761-2008农残检测样品前处理方法的优化

时间：2024-08-31

陈云虹刘慧符锦锋

（海南省天然橡胶质量检验站，海南海口 570206）

蔬菜和水果是人们日常生活必不可少的食物，能够为人体提供各种营养成分（如维生素C、胡萝卜素等），满足人体生长发育的需要，经常食用蔬菜水果能够预防多种疾病的发生。蔬菜和水果在种植过程中容易受到各种病虫害的侵害，喷洒农药是防治蔬菜水果病虫害的主要方法之一，我国每年使用农药130-300万吨。目前，常用的农药有杀虫剂（如毒死蜱、对硫磷、氯氰菊酯等）、杀菌剂（如百菌清、嘧菌酯、苯醚甲环唑等）、除草剂（如百草枯、敌草腈等）及植物生长调节剂（如多效唑、乙烯利等）。但由于农药具有水溶性、难以降解等化学性质，且农户不合理使用（乱用、滥用），或者蔬菜水果没有过安全采摘期，常引起农产品农药残留，严重危害人体健康。福建茶叶农残超标、海南“毒豇豆”、山东青岛“毒韭菜”，蔬菜水果农药残留超标事件频频发生。同时，喷洒的农药通过进入土壤、水体，不仅污染环境，还会通过食物链进入人体，进一步影响人体健康。因此，准确、及时、高效地对农产品农药残留进行分析测定是保障人民安全的重要措施之一。

目前，农药多残留检测中常用的方法是NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》、GB 23200.8-2016《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》及GB 23200.113-2018《食品安全国家标准植物源性食品中208种农药农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法》。但气相色谱-质谱联用仪价格昂贵且对人员专业技术能力要求相对较高，在多数农产品质量安全检验检测实验室并未普及。而NY/T 761-2008虽然与之前的方法相比，该标准前处理步骤明显减少，但是仍然存在复杂繁琐、时间长、有机溶剂用量大、回收率较低等问题。现阶段对单一基质农残检测前处理的优化和单一种类农残（有机磷类或有机氯类）检测前处理的优化研究比较多，对多种基质多农药残留前处理的优化研究较少。本研究在NY/T 761-2008的基础上，将前处理步骤进行优化，选取4种基质（黄瓜、豇豆、小白菜、百香果）作为试验样品，5种常规农药（毒死蜱、三唑磷、三唑酮、甲氰菊酯、联苯菊酯）作为测试农药，分别计算优化后方法的回收率、相对标准偏差、最低检出限等，以期为蔬菜水果农药多残留检测提供一种操作简单、经济高效、准确可靠的前处理方法。

1.材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 仪器

7890 A气相色谱仪（美国Agilent公司）：配有FPD检测器；Clarus 580气相色谱仪（美国PerkinElmer公司）：配有ECD检测器；DL-5C大容量离心机（上海安亭科学仪器厂）；Vortex3涡旋振荡器（德国IKA公司）；RE-2000B旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；玻璃器皿（国药集团化学试剂有限公司）

1.1.2 实验试剂

乙腈、正己烷、丙酮等有机溶剂（美国Tedia公司）：色谱纯；毒死蜱、三唑磷、三唑酮、甲氰菊酯、联苯菊酯标准物质（天津农业农村部环境科研监测所）：浓度为100ug/mL；弗罗里矽柱（德国Simon Aldrich公司）：体积6 mL，填充物1000mg；氯化钠（广州化学试剂厂）：分析纯。

1.1.3 试验样品

黄瓜、豇豆、小白菜、百香果样品来源于海南省例行监测样品，经检测不含上述测试农药。

1.2 实验方法

1.2.1 标准溶液配制

标准储备溶液（10 μg/mL）：将购买的100μg/mL各标准物质母液分别选用与母液相同的溶剂稀释为10 μg/mL，作为标准储备溶液，于-18℃冰箱保存待用。

纯溶剂标准溶液配制：用移液管分别移取一定体积的10 μg/mL的标准储备溶液至10mL容量瓶中，毒死蜱、三唑磷一组，用丙酮定容；三唑酮、甲氰菊酯、联苯菊酯一组，用正己烷定容，配制浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.50、1.00μg/mL的标准工作溶液。

1.2.2 样品前处理

（1）样品制备

将待测样品切碎，置于料理机打碎混匀，于-18℃冰箱保存待用。

（2）提取

称取15g试样（精确至0.01g）于100mL离心管中，加入30mL乙腈，随后加入含有5～7g氯化钠，盖上离心管盖，涡旋混匀震荡2～3min后4200r/min离心5min。

（3）净化

吸取5.00mL上清液至100mL平底烧瓶，将烧瓶放在旋转蒸发器上，40℃～45℃水浴蒸至近干，加入2.00mL丙酮复溶，过0.2μm微孔滤膜，7890A-FPD上机检测。

另取5.00 mL上清液至100mL平底烧瓶，将烧瓶放在旋转蒸发器上，40℃～45℃水浴蒸至近干，加入2.00mL正己烷复溶，盖上铝箔，待净化。将弗罗里矽柱依次用5.00mL丙酮+正己烷（10+90）、正己烷预淋洗，条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用100mL平底烧瓶接收洗脱液，用5.00mL丙酮+正己烷（10+90）冲洗烧杯后淋洗弗罗里矽柱，并重复一次。将盛有淋洗液的圆底烧瓶置于旋转蒸发器上，40℃～45℃水浴蒸至近干，用2.00mL正己烷复溶，过0.2μm微孔滤膜，Clarus 580-ECD上机检测。

1.2.3 上机检测

（1）7890A-FPD气相条件

色谱柱：DB-17（30m×0.25mm，0.25μm）；进样口温度：220℃；检测器温度：250℃；燃气及流量：氢气，75 mL/min；助燃气及流量：空气，100mL/min；升温程序：150℃；进样模式：不分流进样；进样量：1.00μL；载气及流量：高纯氮（99.999%），3.00 mL/min。

（2）Clarus 580-ECD气相条件

色谱柱：DB-5（30m×0.25mm，0.25μm）；进样口温度：200℃；检测器温度：320℃；升温程序：；进样模式：分流进样，分流比10：1；进样量：1.00μL；载气及流量：高纯氮（99.999%），1.00 mL/min。

1.2.4 试验设置

在已称好的待测样品中分别加入5种农药(毒死蜱、三唑磷、三唑酮、甲氰菊酯、联苯菊酯)标样，制成浓度为0.05、0.40、0.80mg/Kg的模拟加标样品，按1.2.2方法进行前处理，按1.2.3方法上机测定。分别在0.05、0.20、0.40mg/Kg浓度水平下设置6次重复和1次扣除样品背景的重复。定量时每次重复分别扣除样品空白背景值。

2.结果与分析

2.1 方法的相关系数与检出限

经计算，5种农药的线性范围为0.05～1.00μg/mL，r在0.9973～0.9999，以3倍信噪比（S/N）所对应的农药浓度为检出限，结果建见表1。

表1 5种农药检测方法的相关系数与检出限

由表1可知，5种农药的检出限在0.001～0.02mg/Kg，能够满足测定蔬菜和水果农药残留卫生标准的要求。

2.2 回收率与精密度

4种空白样品（黄瓜、豇豆、小白菜、百香果）中分别加入5种农药混合标准溶液，制成浓度为0.05、0.40、0.80mg/Kg的模拟加标样品，各重复6次，测定各组分的回收率和精密度（精密度用相对标准偏差表示），结果见表2。

由表2可知，4种基质中，加标浓度为0.05mg/Kg时，5种农药的平均回收率为84.2%～110.8%，相对标准偏差为2.0%～6.7%；加标浓度为0.40mg/Kg时，5种农药的平均回收率为84.5%～104.8%，相对标准偏差为1.7%～6.8%；加标浓度为0.80mg/Kg时，加标浓度为85.5%～107.8%，相对标准偏差为1.6%～7.8%。各基质中五种农药三个加标浓度的回收率都符合GB/T 27404-2008实验室质量控制规范食品理化检测检验要求（80%～120%）。

表2 四种基质中5种农药的平均回收率和精密度

豇豆毒死蜱 110.8 3.1 96.7 1.7 107.8 3.7三唑磷 93.5 5.2 88.3 4.6 90.7 5.2三唑酮 85.1 4.8 84.5 6.1 88.2 7.0联苯菊酯 90.7 4.0 103.1 1.9 100.6 3.3甲氰菊酯 107.4 3.9 90.6 3.2 89.5 4.8小白菜毒死蜱 100.8 2.2 102.2 2.7 99.6 4.1三唑磷 87.8 3.5 90.6 5.1 85.7 5.7三唑酮 84.2 3.9 93.7 6.8 97.2 7.5联苯菊酯 94.2 4.7 102.1 3.7 101.8 2.4甲氰菊酯 96.3 2.9 97.6 4.2 103.7 3.9百香果毒死蜱 105.3 2.0 98.8 2.6 106.6 4.0三唑磷 100.4 4.3 90.6 4.9 96.1 5.0三唑酮 90.6 6.7 91.2 5.0 87.2 7.8联苯菊酯 95.5 3.2 101.1 3.6 92.4 1.6甲氰菊酯 87.6 4.8 92.9 3.8 85.5 5.6

3.结论

本研究在NY/T 761-2008基础上，改变了前处理方法，以4500r/min离心5min代替过滤和静置30min2个步骤，以40～45℃水浴旋转蒸发代替氮吹，对线性相关系数、检测线、回收率、精密度进行考察。结果表明，该方法能够满足蔬菜水果中有机磷、有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留检验检测需求。且运用该方法具有回收率高、重复性好、耗时短、有机溶剂和玻璃器皿使用少等优点，适用于批量样品的前处理要求，可以应用于气相色谱法测定蔬菜和水果农药残留实验中。