妊娠小鼠甲状腺功能减退症对子代糖代谢的影响

王秀丽 李爱伟 方建红

山东第一医科大学附属青岛医院(266000)

孕早期母体及胎儿发育对于甲状腺功能有显著依赖性[1]。甲状腺功能减退症(甲减)是造成不良妊娠结局的重要原因[2]。研究显示[3]，甲状腺激素T4与胎儿大脑神经元细胞的发育相关，甲状腺激素T4可通过孕妇胎盘及血脑屏障。但甲减时胎盘不能从母体获得足够的甲状腺激素T4满足大脑发育需求，造成胎儿神经系统发育障碍[4]。既往研究[5]指出，妊娠期较低甲状腺激素T4水平可造成患者6岁发生自闭症的风险升高4倍以上，而产后出血、早产以及胎盘早剥发生风险也显著升高。甲状腺激素T3与机体甲状腺激素受体相互结合，而此类受体主要在8～9周胎儿大脑皮层中表达[6]，孕10～18周呈升高趋势；所以在甲状腺疾病进展中，通过分析患者甲状腺功能变化，对机体糖类代谢以及疾病进展有重要参考意义[7]。本研究分析妊娠小鼠甲状腺功能减退症对子代糖代谢的影响，为临床机理研究提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂

本研究仪器主要采取酶标仪(DNM-9602，北京普朗新技术有限公司)、冷冻离心机(TGL20M，JTLIANGYOU)和恒温水浴箱(HH-W420/W600)进行试验。甲状腺激素分析采用酶标仪进行，血糖水平采用化学发光法检测。试剂均来自上海罗氏。

1.2 实验动物

采用中科院提供的雌性SPF级新生小鼠80只(合格证号20170516)，体重(29.3±3.1)g(28～32g)；饲养条件室温21±2℃，湿度30%～70%，光照每昼夜12h。

1.3 模型构建与干预

①模型组：采用40只小鼠适用性饲养，饮用水用0.02%的丙硫氧嘧啶饲养，饲养0、3、7、14、21 d后对小鼠进行眶后采血，小鼠促甲状腺激素(TSH)高于正常水平、甲状腺激素T4低于正常水平为甲减造模成功。所有小鼠按照1:1雄雌比例分笼喂养，当小鼠出现阴栓后立即单独喂养[8]。②对照组：小鼠使用正常饮用水饲养，所有小鼠按照1:1雄雌比例分笼喂养，当小鼠出现阴栓后立即单独喂养。

1.4 标本处理与观察项目

1.4.1激素测定分别测定两组入组前(D0)、干预3d(D3)、7d(D7)、14d(D14)以及产后1d(P1)甲状腺激素T4、TSH水平。

1.4.2围产期指标记录两组妊娠周期、妊娠期体重增长、产子数目、子代出生体重、随机血糖水平。

1.4.3子代糖代谢水平分别对两组(产后4周)子代进行口服葡萄糖耐量试验，比较空腹及15min、30min、60min以及120min时血糖水平。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 甲状腺激素T4水平

甲状腺激素T4水平，D0、D3时两组无差异(P>0.05)，D7、D14、P1时模型组高于对照组(P<0.05)；TSH水平，D0时两组无差异(P>0.05)，D3、D7、D14、P1时模型组均高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组不同时间激素水平比较

2.2 围产期指标

两组妊娠周期、产子数目比较无差异(P>0.05)，模型组妊娠期体重增长、子代出生体重小于对照组，随机血糖水平高于对照组(均P<0.05)。见表2。

表2 两组围产期指标比较

2.3 子代糖代谢水平

两组子代空腹、15min、30min时血糖水平无差异(P>0.05)，60min、120min时血糖水平模型组子代高于对照组子代(均P<0.05)。见表3。

表3 两组子代不同糖耐量试验血糖水平比较

3 讨论

甲减是临床较为常见的内分泌疾病，胎儿发育除了与遗传因素密切相关外[9]，同时与机体内分泌、母体营养状况以及代谢情况密切相关。胎儿甲状腺发育过程中，母体甲状腺激素是胎儿甲状腺激素获取的唯一来源，对于胎儿器官形成以及生长发育具有重要价值[10]。临床治疗发现，新由于生儿使用抗甲状腺激素生成药物，可造成胎儿甲状腺激素水平显著抑制[11]。现代医学认为[12]，胎儿甲状腺是在孕10～12周开始发育，直到16～20周时则可以自主产生甲状腺激素，所以在妊娠16周前胎儿对母体甲状腺激素有显著依赖性[13]。该阶段母体甲状腺激素消耗量显著升高，甲状腺结合蛋白水平也显著升高，尿液中尿碘含量显著增加，进一步加剧了母体甲状腺激素消耗[14]。孕早期随着母体绒毛膜促性腺激素水平升高，进一步代偿性造成甲状腺激素T4水平升高，TSH水平呈下降趋势[15]。在正常机体代谢过程中，甲状腺激素可显著提升机体代谢水平，近年来研究认为糖尿病、肥胖患者甲状腺激素水平呈现异常[16]，也使研究者的目光重新回到对甲状腺激素的研究中。

正常人体血液中甲状腺激素多以蛋白结合方式存在，少数以游离状态存在，而只有游离甲状腺激素T3、T4有生物学意义。在甲状腺细胞内，T4主要5’-脱碘酶向T3进行转变，而脱碘酶D3对于甲状腺激素T3以及T4均具有显著的终止活性作用[17]。本研究模型组小鼠T4水平下降、TSH水平上升，与以往研究一致。而围产期指标，模型组与对照组妊娠期体重增长以及出生体重均存在差异，一定程度上验证了激素异常带来的结果。在子代糖代谢水平分析中，服糖后60min、120min的糖耐量模型组血糖水平均高于对照组。大量研究证实，甲状腺激素对机体胰岛β细胞功能具有调控作用，甲状腺激素对于胰岛β细胞的增殖以及胰岛素分泌均具有重要作用；研究已证实，母体甲状腺激素可与胎盘组织的甲状腺激素转运体结合蛋白结合，进入机体胚胎影响子代糖类代谢。多项动物实验[18]已经证实，宫内甲减状态可以导致胚胎时期子代胰岛功能丧失，导致糖类代谢异常。

综上所述，妊娠甲状腺功能减退症小鼠其子代血糖水平异常。