酶联免疫反应加速仪在巨细胞病毒IgG 抗体检测中的应用

耿珍 刘铭

郑州大学公共卫生学院(郑州，450002)

目前，国内最常用的巨细胞病毒(CMV)IgG检测方法是酶联免疫吸附试验(ELISA)，该方法简单易操作，但检测时间往往需要3h，医生和患者等待时间过长。酶联免疫反应加速仪是一种加速抗原抗体反应，缩短工作时间的医学设备，为探讨其临床应用价值，本文将其用于CMV IgG检测中，并与传统酶联免疫方法(简称传统法)比较，观察其重复性、线性相关性、灵敏度、特异度等指标，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 酶联免疫反应试剂盒

使用加拿大亚特斯公司(ADALTIS)生产的TORCH检测试剂盒和标本专用稀释液。

1.2 标本

亚特斯公司提供CMV IgG抗体标准品(编码:BS/95.1814):0U/ml、0.6U/ml、1U/ml、2U/ml、4U/ml、8U/ml;门诊提供随机抽样血清642份。

1.3 仪器

高频免疫反应加速器(四川诺亚医疗科技公司)、96孔全自动酶标仪(PHOMO)、全自动洗板机(iWO-960)、37℃恒温水箱(光明仪器公司)、微量振荡器(姜堰市电子仪器厂)、加样器(荣泰生化工程有限公司)。

1.4 操作方法

［1］和试剂盒使用说明书进行。

1.4.1 线性相关性分析 随机抽取血清标本40份分别用加速法和传统法检测，进行线性相关性分析。

1.4.2 重复性试验 使用同一批号(产品批号:0405)TORCH检测试剂盒检测CMV IgG抗体标准品，用加速法和传统方法对样品进行检测，连续重复检测20d。巨细胞病毒IgG值以均数±标准差()表示，采用χ2检验，使用SPSS 12.0进行统计学分析。

2 结果

2.1 线性相关分析

统计显示加速法和传统法定量结果呈正相关关系，回归方程为:y=1.101x-0.721(血清CMV IgG浓度范围为0～7.8U/ml)，回归方程有统计学意义(P ＜0.05)，见图1。

图1 两种方法测定CMV IgG浓度线性相关分析

2.2 重复性试验

6种浓度的CMV IgG标准品采用加速法和传统法检测，定量结果差异无统计学意义(P＞0.05)，定性结果相同。ELISA试剂盒规定其批间变异系数在15%以内，而在本次试验中传统法的变异系数为10% ～2.7%，加速法变异系数为10% ～2.1%，均在规定范围内。见表1。

表1 6种浓度CMV IgG标准品两种方法检测结果

2.3 灵敏度和特异度

将经过参考方法(CMV-DNA方法)确定的642例临床样本分成观察组和对照组:观察组562例阳性样本(512例阳性、50例弱阳性)，对照组80例阴性样本(25例妊娠、10例丙肝抗体阳性、10例乙肝表面抗体阳性、5例类风湿因子阳性、5例抗核抗体阳性、5例抗心肌抗体阳性、10例溶血、10例冷冻样本)。采用加速法和常规法测定CMV IgG抗体(CUT-OFF=0.50U/ml)，结果见表2。

表2 642例临床样本两种方法检测结果

从表2可以看出两种方法对临床不同感染阶段和不同类型的标本均有很高的灵敏度和特异度，没有发现交叉反应及其他因素影响实验结果，符合试剂盒规定的性能指标。

3 讨论

CMV可引起生殖泌尿系统、中枢神经系统和肝脏感染，该病毒的感染在儿童和青少年中特别流行，妊娠妇女感染CMV后可通过胎盘感染胎儿，引起胎儿出生缺陷，严重者导致流产或死胎［1］，故应积极预防其发生。在缺乏典型临床症状的情况下，CMV IgG和CMV IgM检测对急性/首次CMV感染，以及潜伏CMV型再激活的诊断具有重要意义。

传统血清学酶联免疫反应检测方法简单、准确，但耗时长，加速仪的出现很好地弥补了这一缺陷。加速仪运用高频电磁波以微量震荡方式，促使抗原和抗体碰撞次数增多，紧密接触频率增高，从而提高抗原和抗体的反应效率。而且加速仪的高频电磁波有促使离子迁移和偶极子转动，从而引起免疫分子转动的作用。故缩短了抗原和抗体反应的时间，并可提高检测的灵敏度［2］。

将加速仪应用于CMV IgG检测，与传统法比较:线性相关性分析结果显示加速法和传统法定量结果呈正相关关系;重复性试验显示两种方法定性、定量结果无差异。与传统法相比，加速法具有大幅缩短检测时间、变异系数更小、灵敏度更高、特异度更强等优点，值得在临床中使用。

参考文献

1 叶应妩，王毓三，申子瑜，等.全国临床检验操作规程［M］.第3版.南京:东南大学出版社，2006:630-631.

2 瞿良，李云，滕仪，等.NY/MMJ型酶联免疫反应加速仪在高原地区的临床使用［J］.现代检验医学杂志，2007，(3):52-53.