分光光度法测定二氢黄酮化合物对超氧阴离子自由基的清除作用

王 勇，庆伟霞，杨玉霞，赵东保*

(1. 河南大学 化学化工学院，河南 开封 475004; 2. 河南大学 特种功能材料教育部重点实验室，河南 开封 475004；3. 河南大学 医学院，河南 开封 475004)

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

7550紫外-可见分光光度计(上海分析仪器厂)；酸度计(上海大中分析仪器厂)；三羟甲基氨基甲烷(分析纯，惠兴生化试剂有限公司)；邻苯三酚、浓盐酸、乙醇等试剂均为分析纯；二氢黄酮纯品化合物的制备见文献[13-14]，其结构见图1. 二氢黄酮用无水乙醇配制成溶液，用时稀释至合适浓度. 所有溶液均用二次蒸馏水现用现配.

图1 二氢黄酮类化合物的结构式Fig.1 The structure of flavanones

1.2 实验方法

2 结果与讨2

2.1 酸度的选择

邻苯三酚在弱碱性条件下能迅速自氧化，但pH的变化对其自氧化速率有很大影响. 测试结果表明体系在pH=8.20时，反应初始速率适中且接近匀速，故选择pH=8.20的Tris-HCl缓冲溶液.

2.2 邻苯三酚浓度的选择

结果表明固定pH=8.20时，邻苯三酚终浓度为0.1 mmol·L-1时，自氧化速率为0.050 5 A/min，与文献报道的最佳测定范围(0.05～0.07)一致，效果较好.

2.3 测定时间的影响

a. 0～15 mim

b. 0～5 min图2 0.1 mmol·L-1邻苯三酚的自氧化速率图Fig.2 Self oxidation rate of 0.4 mol·L-1 pyrogallol

2.4 二氢黄酮化合物对·的清除作用

清除率是指在含有自由基的体系中加入适量自由基清除剂，反应达到平衡时，自由基被清除的百分率，反映的是静态的结果；而抑制率是指在产生自由基的体系中加入适量自由基清除剂，考察自由基清除剂对体系产生自由基速率的影响，反映的是动态的过程. 清除率越大，说明自由基清除剂对已产生自由基的清除效果越好；抑制率越大说明自由基清除剂阻碍自由基产生(即邻苯三酚自氧化)的效果越好.

表1 三氢黄酮对·的清除率及抑制率Table 1 Scavenging ratio and inhibition ratio of different flavonone for ·

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