超声引导下甲状腺细针穿刺液基细胞学与传统细胞涂片在甲状腺结节诊断中的意义

陈良

昆山市中医医院超声科，江苏昆山 215300

甲状腺结节属于常见头颈部肿瘤及内分泌系统疾病的一种，有良性与恶性之分，其中5%～10%为恶性结节，即甲状腺癌[1]。多数为良性结节，恶性结节具有较大危害性，人体滤泡上皮细胞为主要来源，临床表现为吞咽障碍、声音嘶哑、呼吸困难等，严重影响患者生命健康及生活质量。甲状腺结节主要表现为甲状腺腺体内异常肿块，通常无特异性症状，无法肉眼发现，临床早期对甲状腺结节良恶性鉴别及诊断，对疾病治疗及预后具有积极的意义[2]。甲状腺细针穿刺（US fineneedle aspiration，US-FNA）技术是临床诊断甲状腺结节的常用方法，具有准确定位、操作便捷、准确率高、微创、多角度取样、高敏感度等特点，目前在临床得到广泛应用[3]。为评估US-FNA检查中传统细胞涂片、液基细胞学检测的临床价值，选择2019年1月—2021年11月昆山市中医医院内接受US-FNA检查的90例甲状腺结节患者为研究对象，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院内接受US-FNA检查的90例甲状腺结节患者为研究对象。本研究经医院医学伦理委员会核准，患者知情同意并签署文件。患者中男40例、女50例；年龄20～60岁，平均年龄（40.56±5.33）岁。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①术后有明确病理确诊；②均接受USFNA传统细胞涂片、液基细胞学检测；③有细胞学病理结果；④病历资料真实可靠、完整。

排除标准：①入组前接受射频消融治疗、药物治疗、甲状腺硬化注射等者；②心肝肾功能障碍者；③凝血机制不正常者；④存在认知缺陷、严重精神障碍者；⑤头颈部放疗史者；⑥并发其他肿瘤疾病者；⑦穿刺部位局部皮肤感染者；⑧吞咽困难、咳嗽，对治疗无法配合者。

1.3 方法

纳入患者穿刺前完善血常规、凝血功能、甲状腺功能、心电图检查，实施US-FNA检查，应用彩色多普勒超声（仪器型号：PHILIPS IU Elite，高频探头5～12 MHz）。穿刺指征参考TI-RADS分级法。

指导患者取平卧位，使用小枕头垫在颈部，头部向后仰，术前利用超声再次检查甲状腺，纵切面、横切面全面扫查明确可疑恶性结节大小、位置、规划安全穿刺路径。穿刺部位清洁消毒，超声医师固定探头，术者在超声引导下以斜形角度穿刺，同时对进针方向、深度进行调整，穿刺至结节，进行多点快速抽吸，每个结节抽吸次数＞3次，多次切割病变组织，结合结节超声声像图信息，明确抽吸负压大小，将抽吸物置于载玻片上，涂抹均匀，应用95%酒精予以固定，制作3～4张涂片，剩余样本保存于液基细胞保存液中，术后穿刺部位敷上纱布进行按压1～2 h。采集涂片标本，置入容器后制片，利用显微镜观察，选择满意标本，观察细胞形态学。满意标本标准：涂片上滤泡细胞团≥6个，且每个滤泡细胞团上皮细胞≥10个。

传统细胞学涂片：将针管中抽吸物置于载玻片上（两张中间），加一定压力，反向拉开，每一个拉开2～4张，使用95%乙醇进行固定操作，控制时间30 min，最后利用HE染色。

液基细胞学技术：将针管中抽吸物置于保存液中（含有液基细胞），针管反复抽吸多次，保证无残留物，利用离心机开展离心操作（转速1 250 r/min，时间5 min），去除上层清液，利用旋涡混合器进行振荡30 s，置入液基细胞保存液5 mL，混合均匀后转移标本至离心管中再次进行离心处理，转速与时间同上，去除上层清液，再次振荡30 s，根据沉淀情况加入缓冲液后振荡，利用LBP液基细胞沉降式自动制片系统对混悬液进行制片，每张200 μL混悬液，利用HE染色后观察。

1.4 观察指标

根据甲状腺细胞病理学Bethseda报告系统对穿刺细胞学结果进行诊断分类：①标本无法判定，细胞成分不足，不满意或无法诊断；②良性滤泡性结节；③无明确意义的滤泡性病变或非典型病变；④可疑滤泡性肿瘤或滤泡性肿瘤；⑤可疑恶性肿瘤；⑥恶性肿瘤，表现为恶性病变。

1.5 统计方法

采用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析，计数资料用频数和百分比（%）表示，进行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 手术病理诊断结果

90例患者经手术病理诊断结果：恶性结节49例、良性结节41例；所有恶性结节患者均接受免疫组化检查，检查结果：甲状腺乳头状癌47例、髓样癌2例。

2.2 传统细胞涂片、液基细胞学检查与联合检查的诊断结果

以手术病理诊断结果为金标准，传统细胞涂片检查：真阳性42例、假阳性2例、真阴性39例、假阴性7例；液基细胞学检查：真阳性40例、假阳性3例、真阴性38例、假阴性9例；联合检查：真阳性48例、假阳性1例、真阴性40例、假阴性1例。见表1。

2.3 传统细胞涂片、液基细胞学检查与联合检查的诊断效能比较

联合检查诊断灵敏度、准确度明显高于单一传统细胞涂片、液基细胞学，差异有统计学意义（P＜0.05）；传统细胞涂片、液基细胞学单一诊断特异度与联合检查特异度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 传统细胞涂片、液基细胞学检查与联合检查的诊断效能比较(%)Table 2 Comparison of diagnostic efficacy of traditional cell smear,liquid-based cytology and combined examination(%)

3 讨论

甲状腺结节属于内分泌系统疾病的一种常见类型，其发生与放射性接触、遗传、过量碘摄入等因素有关[4]。在任何年龄阶段都可能发生，通常多见于中老年群体，且女性患病率明显高于男性，甲状腺结节良性结节占绝大多数，主要采取药物治疗及定期随访，恶性结节通常需要进行手术治疗[5-6]。甲状腺结节临床诊断以往多采取超声检查、免疫学检查、触诊、病史等，但特异度相对低，在鉴别甲状腺结节良恶性存在一定的局限性。US-FNA是甲状腺结节临床诊断的常用手段，可以准确定位，精确把握穿刺方向及深度，避免重要器官及血管损伤，取材方便，成功率高，临床应用价值高[7]。

本次研究结果：90例患者经手术病理诊断结果：恶性结节49例、良性结节41例；检查结果：甲状腺乳头状癌47例、髓样癌2例。高分辨率彩超评估甲状腺结节的恶性风险，对其中满足指征患者实施US-FNA检查鉴别结节的良恶性，恶性结节患者开展病理形态学检查与免疫组化确诊疾病，因此，甲状腺结节良恶性鉴别诊断中US-FNA检查发挥重要作用。US-FNA检查中可有传统细胞涂片、液基细胞学技术两种。传统细胞涂片制片方法简单，操作便捷，可以直接涂片酒精固定及巴氏染色，可以将近似组织结构形态保留下来，且价格低廉，故在临床得到广泛应用[8-9]。但传统细胞涂片存在一定的不足：①穿刺时受到过大负压的影响导致标本中存在较大红细胞，会掩盖异常细胞，故存在一定的漏诊及误诊风险。②取材器上细胞并未充分用于载玻片，部分细胞被丢弃。③涂片质量受到操作人员技术水平的影响，部分涂片不均匀、过厚，且细胞过度干燥也会对结果造成影响[10]。液基细胞学技术是将抽吸样本置入冰醋酸的保存液中，可有效清除标本中红细胞，降低红细胞对检验结果的影响，从而提高诊断准确率，同时利用液基细胞保存液反复冲洗取材器，避免红细胞随着取材器被丢弃，取材器上细胞得到充分利用[11]。但有研究发现，液基细胞学相较传统细胞涂片对近似组织结构形态保留效果不足。在US-FNA下实施液基细胞学与传统细胞涂片检测，可以有效弥补两者的不足，优势结合，进一步提高诊断准确率，为临床治疗方案的制定提供可靠参考。

本次研究结果：以手术病理诊断结果为金标准，联合检查诊断灵敏度97.96%、准确度97.78%明显高于单一传统细胞涂片（85.71%、90.00%）、液基细胞学（81.63%、86.67%）（P＜0.05）；传统细胞涂片、液基细胞学单一诊断特异度95.12%、92.68%与联合检查特异度97.56%比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。与刘友清[12]研究结果，联合检查灵敏度98.00%、准确度96.60%明显高于细胞涂片检查82.00%、87.50%及液基细胞学检查80.00%、85.20%（P＜0.05）；联合检查特异度94.70%与细胞涂片检查94.70%、液基细胞学检查92.10%比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有一致性，充分证实本次研究结果的真实可靠。可见，液基细胞学联合传统细胞涂片检查在甲状腺结节诊断中具有显著优势，原因是两种检测方式结合能够避免单一检测的缺陷，检测优势结合。联合应用不仅弥补了传统细胞涂片在异常细胞遮盖、图片质量不佳、细胞丢弃等方面的缺陷，同时补充了液基细胞学在保留近似组织结构形态方面的不足[13]。甲状腺结节不同病理类型治疗方法存在差异性，恶性结节往往需要手术切除并配合辅助放化疗，良性结节无需特殊治疗[14]。因此，开展超声引导下US-FNA液基细胞学与传统细胞涂片检查，有效准确鉴别甲状腺结节良恶性具有重要的临床意义。此外，在本次研究中传统细胞涂片诊断准确率90.00%高于液基细胞学86.67%，原因是在制作标本的过程中，先实施传统细胞涂片，然后再将剩余组织标本实施液基细胞学检测，致使液基细胞学检测阳性率偏低[15]。

综上所述，对甲状腺结节患者实施超声引导下USFNA液基细胞学与传统细胞涂片检查，具有显著的临床应用价值，联合应用可提高疾病诊断准确率，为结节良恶性鉴别提供依据，有利于后续治疗的开展，从而有效提高患者预后。