胃蛋白酶原联合幽门螺旋杆菌IgG抗体对胃癌早期诊断的价值

谢 庆, 陈卫刚, 齐翠花, 刘 芳, 乔 琨

石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆 石河子832008

胃蛋白酶原联合幽门螺旋杆菌IgG抗体对胃癌早期诊断的价值

谢 庆, 陈卫刚, 齐翠花, 刘 芳, 乔 琨

石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆 石河子832008

目的 探讨胃蛋白酶原(Pepsinogens, PG)联合幽门螺旋杆菌(H.pylori)IgG抗体对胃癌早期诊断价值。方法 选取2015年1月-2015年12月于石河子大学医学院第一附属医院住院部及门诊就诊并行胃镜检查的患者资料，其中浅表性胃炎组40例、轻度萎缩性胃炎组40例、胃癌前病变组40例、胃癌组40例，经免疫印迹法测血清H.pyloriIgG抗体，免疫放射法测定各组PG浓度。结果 与浅表性胃炎组及轻度萎缩性胃炎组比较，胃癌前病变组及胃癌组中PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与浅表性胃炎组比较，胃癌前病变组及胃癌组中H.pyloriIgG抗体阳性率升高，差异有统计学意义(P<0.05)；H.pyloriIgG抗体阳性组PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值明显低于阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)。H.pyloriIgG抗体阳性组PGⅡ值明显高于阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)。PG与H.pyloriIgG抗体联合检测提高了胃癌诊断的灵敏度。结论 PG和H.pyloriIgG抗体与胃癌关系密切，两者联合检测对胃癌早期诊具有重要的临床意义。

胃蛋白酶原;幽门螺旋杆菌IgG抗体;胃癌;早期诊断

胃癌作为我国高发的恶性肿瘤，早期诊断及治疗是提高胃癌治愈率及生存期，降低病死率的关键。1962年日本胃癌研究会证实提出早期胃癌的概念，这是胃癌诊断和治疗的里程碑事件，使胃癌达到临床治愈、获得长期存活成为可能[1]，但早期胃癌缺乏一定的特异性症状和体征，早期诊断率低，虽然电子胃镜及病理检查是最可靠的诊断方法，但由于具有较差的依从性，不适用于大规模的普查，因此，我们迫切地需要发现一些生物指标来提高早期胃癌的诊断率。研究发现，血清胃蛋白酶原(Pepsinogens,PG)可反映胃黏膜的形态和功能，可作为胃癌和癌前病变高危人群的血清筛查指标，起到血清学活检的作用[2-3]。近年来一些欧洲国家和日本应用PG和幽门螺旋杆菌(H.pylori)IgG抗体筛查胃癌，已成为令人瞩目的新方法[4-5]。本文通过2015年1月-2015年12月于石河子大学医学院第一附属医院就诊并行电子胃镜检查的患者资料进行分析，进一步研究PG及H.pyloriIgG抗体与胃癌的关系，探讨二者联合对胃癌早期诊断的价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2015年1月-2015年12月于石河子大学医学院第一附属医院就诊并行电子胃镜检查的患者资料，确保入选患者1个月内无特殊用药史(如质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂、抗H.pylori药物等)，根据病理结果分为4组：浅表性胃炎组(包括正常者)40例、轻度慢性萎缩性胃炎组40例、胃癌前病变组(包括中-重度萎缩性胃炎伴肠化、低级别上皮内瘤变)40例、胃癌组(包括高级别上皮内瘤变)40例。其中浅表性胃炎组男18例、女22例，平均年龄(56.6±1.2)岁；轻度萎缩性胃炎组男22例、女18例，平均年龄(57.2±2.2)岁；癌前病变组男21例、女19例，平均年龄(62.2±1.8)岁；胃癌组男25例、女15例，平均年龄(62.9±1.3)岁。各组年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 清晨采用一次性静脉采血针于患者正中静脉抽取空腹静脉血4 ml，静置30 min后按转速1 000 r/min离心10 min分离出血清，将血清放入-80 ℃冰箱保存，严格按照试剂说明书进行检测。PG定量检测使用上海透景科技股份有限公司Luminex200；H.pylori抗体定性检测使用深圳市伯劳特生物制品有限公司的H.pylori抗体分型检测试剂盒(免疫印迹法)。分别测出PGⅠ、 PGⅡ值，再计算出两者比值。

2 结果

2.1 各组PG检测结果比较 与浅表性胃炎组、轻度萎缩性胃炎组比较，胃癌前病变组及胃癌组中PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)；其余各组间PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与浅表性胃炎相比，胃癌组PGⅡ值升高，差异有统计学意义(P<0.05)；其他三组间比较，PGⅡ值差异均无统计学意义(P>0.05)。

组别PGⅠ(μg/L)PGⅡ(μg/L)PGⅠ/PGⅡ浅表性胃炎组112．78±35．7720．58±15．006．86±1．71轻度萎缩性胃炎组97．70±28．3621．45±16．465．63±1．53癌前病变组78．79±25．87▲18．32±14．354．36±1．76▲胃癌组64．81±28．29▲26．72±16．78∗2．51±0．98▲

注：与浅表性胃炎组、轻度萎缩性胃炎组比较， ▲P<0.05；与浅表性胃炎组比较，*P<0.05。

2.2 各组H.pyloriIgG抗体检测结果比较 与浅表性胃炎组(47.50%，19/40)比较，癌前病变组(62.50%,25/40)及胃癌组(65.00%,26/40)中H.pyloriIgG抗体阳性率明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。轻度萎缩性胃炎组(55.00%,22/40)抗体阳性率较浅表性胃炎组高，差异无统计学意义(P>0.05)。其余各组间比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

2.3H.pyloriIgG抗体阳性组与H.pyloriIgG抗体阴性组比较 将所有病例作为一个整体分为H.pyloriIgG抗体阳性组与H.pyloriIgG抗体阴性组。H.pyloriIgG抗体阳性组PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值较阴性组降低，差异有统计学意义(P<0.05)。阳性组PGⅡ值较阴性组升高，差异有统计学意义(P<0.05,见表2)。

组别PGⅠ(μg/L)PGⅡ(μg/L)PGⅠ/PGⅡH．pyloriIgG抗体阴性组121．13±32．64▲19．44±10．31▲7．03±1．83▲H．pyloriIgG抗体阳性组99．76±23．4120．65±11．345．74±2．06

注：与H.pyloriIgG抗体阳性组比较， ▲P<0.05。

2.4 PG和H.pyloriIgG抗体联合检测在胃癌及胃癌前病变组诊断的效果评价 PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/ PGⅡ、H.pyloriIgG抗体在胃癌及胃癌前病变组检测的敏感性分别为68.4%、67.3%和57.4%，特异性分别为39.8%、41.0%和46.9%，PG和H.pyloriIgG抗体联合检测的敏感性和特异性分别为91.0%和43.1%。

3 讨论

胃癌起病隐匿，早期不易发现，目前胃癌的诊断仍需行电子胃镜及病理检查确诊，但大规模的电子胃镜检查进行胃癌筛查费用较高,患者依从性较低，因此，找出无创性胃癌筛查的血清学指标，开展高危人群筛查，鼓励亚健康人群主动进行电子胃镜检查，逐步提高胃癌检出率，成为我国胃癌防治的重点。目前，胃黏膜“血清学活检”在早期胃癌及胃癌前疾病筛查中的作用受到越来越多的关注和肯定，利用“血清学活检”进行胃癌人群筛查具有多种优势，如简便易行，结果客观；无创，受检者依从性好；快速高效、高通量检测等[6]。PG属于天冬氨酸水解蛋白酶，在胃酸等酸性环境下被激活，转化为具有消化功能的胃蛋白酶，主要有PGⅠ、 PGⅡ两种。PGⅠ存在于胃体、胃底腺的主细胞和颈黏液细胞，PGⅡ存在于胃体、胃窦、十二指肠近端和十二指肠腺(Brunner腺)。PG经细胞分泌后除了大部分直接进入人体消化道外，大约1%透过胃黏膜毛细血管进入血液系统,从而能够从血液系统中被检测出。因此，通过血清PG原检测可以判断胃黏膜是否发生病变[7-8]。H.pylori感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的相关致病因素，有资料显示，H.pylori感染时胃内亚硝胺等增多，导致DNA损伤修复失败，而出现肠上皮化生及异型增生，使具有恶性潜能细胞易于向恶性转化，诱发癌性病变[9]。且研究已经证实H.pylori分泌的细胞因子IL-1β可诱导Claudin-18表达量减少，从而促进炎症、生化及胃癌的形成[10]。

从浅表性胃炎、萎缩性胃炎、癌前病变再到胃癌的量变到质变是一个多阶段渐进性过程，而这些变化过程均与血清PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ值变化相关[11]，从表1可以看出，伴随着胃癌的演变过程PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ数值也呈下降趋势，这与有关文献报道一致[12]，与浅表性胃炎组及轻度萎缩性胃炎组比较，癌前病变组及胃癌组中PGⅠ、PGⅠ/ PGⅡ值降低，差异有统计学意义，这与胃黏膜萎缩肠化导致的主细胞分泌PGⅠ减少有关。但在本研究中与浅表性胃炎比较，胃癌组PGⅡ值升高，差异有统计学意义，说明结合PGⅡ对于胃癌的诊断也具有一定意义，这与Cao等[13]研究相符，报道认为PGⅡ与胃癌风险独立相关，可能是诊断胃癌更好的标志物。基因多态性与胃癌易感性的关系研究[14]显示，PGⅡ基因的插入/缺失多态性与胃癌易感性高度相关。在以往的研究中可能忽视了PGⅡ的血清学活检作用，以往认为PGⅡ值在胃癌中无明显变化甚至数值升高是因为分泌PGⅡ的腺体广泛，胃底腺黏膜出现萎缩所致的胃底腺减少对PGⅡ影响不大。与H.pyloriIgG抗体阴性组相比较，阳性组PGⅡ值较阴性组升高，差异有统计学意义，分析原因可能为PGⅡ水平受H.pylori感染等因素影响[15]，而PGⅡ值在胃癌前病变组与其他各组比较无明显差异，考虑与各组间H.pylori感染率不同及此次研究样本量较小相关。因此PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平的下降与PGⅡ水平的升高均是胃癌的重要血清学检测指标。血清PGⅡ作为胃黏膜分化成熟的标志，其表达水平有望成为胃疾病筛查及早期诊断的一个重要检测指标，尤其是对H.pylori感染相关胃疾病具有较好的提示作用[15]，但目前对PGⅡ的研究较少，目前缺乏大规模的研究来制定胃癌的敏感数值水平。

由中华医学会消化病学分会H.pylori组进行的一个涉及全国20个省市、40个中心自然人群的H.pylori感染流行病学调查显示：我国H.pylori感染率为40%～90%，平均感染率为59%；现症感染率为42%～64%，平均感染率为55%；人群总感染率高于发达国家50%[16]。国外研究报道约80%的中-重度萎缩性胃炎患者可检测到H.pylori抗体[16]，目前H.pylori感染的诊断方法有多种，Kokkola等[17]分别以组织学方法、13C-尿素呼气试验及血清学试验检测患者的H.pylori感染情况，结果显示3种方法的感染阳性率分别为30%、28%和82%，表明前两种方法只能检测出H.pylori的现症感染，低估了H.pylori感染在轻度萎缩性胃炎及胃癌发生中起到的作用。本研究采用免疫印迹法测定H.pyloriIgG抗体，浅表性胃炎、轻度萎缩性胃炎、癌前病变及胃癌的感染率逐渐升高，与浅表性胃炎组相比较，癌前病变组及胃癌组中H.pyloriIgG抗体阳性率明显升高，差异有统计学意义，因此H.pyloriIgG抗体可作为胃癌早期筛查的指标，但与轻度萎缩性胃炎组比较，胃癌前病变组及胃癌组中H.pyloriIgG抗体阳性率之间无明显差异，H.pyloriIgG抗体预测胃癌的特异性较PG明显下降，因此H.pyloriIgG抗体单独作为诊断胃癌的血清学指标效果欠佳。

本研究显示，H.pyloriIgG抗体阳性组与阴性组的PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ值，发现H.pylori感染与PG具有密切关系，H.pylori感染的患者血清中PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ值较未感染H.pylori的患者水平低，差异有统计学意义。分析原因为H.pylori能降低黏膜屏障功能，影响胃肠黏膜细胞分泌，导致PG大量进入血循环，从而改变血清PG水平[18]。H.pylori长期感染，发展至胃癌前病变或胃癌时，胃蛋白酶基因发生突变，从而失去分泌PGⅠ的能力，所以导致PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ值降低[19]。血清中PG指标及H.pylori感染均与胃癌具有相关性，可作为胃癌的筛查指标，而H.pylori感染与PG两者又具有密切关系，因此建议两者联合检测，本文对于两者的检测效果进行评价，可见单个指标对胃癌的诊断灵敏度不高，而联合检测的灵敏度明显提高，对胃癌的早发现、早诊断、早治疗有重要意义，但联合检测的特异性并没有明显提高，分析原因可能与本次研究样本量较小有关，另由于目前没有对PGⅡ的大规模研究制定敏感界值，本研究并没有联合检测灵敏度及特异度。

总之，本研究结果表明，血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ值降低是胃腺体萎缩的标志，PGⅡ水平升高是胃癌的独立危险因素，H.pylori感染也是胃癌的致病因素，而H.pylori感染又与PG水平的变化具有相关性，两者共同检测可提高诊断的灵敏度。血清学检测具有简便、创伤性小、经济等临床优势，对于人群进行PG与H.pylori抗体联合检测进行筛查，筛选出胃癌高危人群，对高危人群再辅以电子胃镜及病理检查，对高危人群而病理阴性者可进行随访，从而提高早期胃癌的诊断率。

[1]所剑, 王大广, 刘泽峰. 早期胃癌诊断和治疗[J]. 中国实用外科杂志, 2011, 31(8): 717-719. Suo J, Wang DG, Liu ZF. Early diagnosis and treatment of gastric cancer [J]. Chinese Journal of Surgery, 2011, 31(8): 717-719.

[2]Samloff IM. Pepsinogens Ⅰ and Ⅱ:purification from gastric mucosa and radioimmunoassay in serum [J]. Gastroenterology, 1982, 82(1): 26-33.

[3]Mukoubayashi C, Yanaoka K, Ohala H, et al. Serum pepsinogen and gastric cancer screening [J]. Intern Med, 2007, 46(6): 261-266.

[4]Siipponen P, Härkönen M, Alanko A, et al. Diagnosis of atrophic gastritis from a serum sample [J]. Clin Lab, 2002, 48(9-10): 505-515.

[5]Miki K, Morita M, Sasajima M, et al. Usefulness of gastric cancer screening using the serum pepsinogen test method [J]. Am J Gastroenterol, 2003, 98(4): 735-739.

[6]袁媛. 胃黏膜“血清学活检”临床应用现状与展望[J].胃肠病学和肝病学杂志, 2015, 24(2): 121-124. Yuan Y. Clinical application of serological gastric biopsy [J]. Chin J Gastroenterol Hepatol, 2015, 24(2): 121-124.

[7]Pomytkina TE. The serum content of gastrin-17 an dpepsinogen-1 in patients with duodenal ulcerative disease in occupational contact with nitrogenous compounds [J]. Klin Lab Diagn, 2009, (11): 16-19.

[8]Pimanov SI, Makarenko EV, Voropaeva AV, et al. Helicobacter pylori eradication improves gastric histology and decreases serum gastrin, pepsinogen Ⅰ and pepsinogen Ⅱ levels in patients with duodenal ulcer [J]. J Gastrnterol Hepatol, 2008, 23(11): 1666-1671.

[9]张卓然. 临床微生物学和微生物检验[M].北京:人民卫生出版社, 2004: 271. Zhang ZR. Clinical microbiology and microbiological examination [M]. Beijing: People’s Medical Publishing House, 2004: 271.

[10]黄雪芳, 徐三平. 幽门螺杆菌研究的新进展[J]. 临床消化杂志, 2012, 24(6): 370-371. Huang XF, Xue SP. New advances in the study of Helicobacter pylori [J]. Chinese Journal of Clinical Gastroenterology, 2012, 24(6): 370-371.

[11]王北宁, 杨剑, 徐冬. 胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ的免疫分析 [J]. 标记免疫与临床, 2006, 13(3): 162-163. Wang BN, Yang J, Xu D. Immune analysis of pepsinogen Ⅰ and Ⅱ [J]. Labeled Immunoassays and Clinical Medicine, 2006, 13(3): 162-163.

[12]Zhang X, Xue L, Xing L, et al. Low serum pepsinogen I and pepsinogen Ⅰ/Ⅱratio and Helicobacter pylori infection are associated with increased risk of gastric cancer: 14-year follow up result in a rural Chinese community [J]. Int J Cancer, 2012, 130(7): 1614-1619.

[13]Cao XY, Jia ZF, Jin MS, et al. Serum pepsinogen II is a better diagnostic marker in gastric cancer [J]. World J Gastroenterol, 2012, 18(48): 7357-7361.

[14]Sun LP, Guo XL, Zhang Y, et al. Impact of pepsinogen C, polymorphism on individual susceptibility to gastric cancer and its precancerous conditions in a Northeast Chinese population [J]. J Cancer Res Clin Oncol, 2009, 135(8): 1033-1039.

[15]刘言厚, 吕芳, 杨树林, 等. 血清PGII水平与胃疾病及幽门螺杆菌感染关系研究[J].胃肠病学和肝病学杂志, 2015, 24(2): 168-169. Liu YH, Lv F, Yang SL, et al. Study on the relationship between serum PGII levels and gastric disease and Helicobacter pylori infection [J]. Chin J Gastroenterol Hepatol, 2015, 24(2): 168-169.

[16]中华医学会消化病学分会. 对幽门螺杆菌若干问题的共识意见(2003.中国)[J].中华全科医师杂志, 2005, 4(1): 33-35. Digestive Disease Branch of Chinese Medical Association. Consensus on several issues of Helicobacter pylori (2003 China) [J]. Chin J Gen Pract, 2005, 4(1): 33-35.

[17]Kokkola A, Rautelin H, Puolakkainen P, et al. Diagnosis of Helicobacter pylori infection in patients with atrophic gastritis: comparison of histology,13C-urea breath test, and serology [J]. Scand J Gastroenterol, 2000, 35(2): 138-141.

[18]Kim HJ, Hwang SW, Kim N, et al. Helicobacter pylori and molecular markers as prognostic indicators for gastric cancer in korea [J]. J Cancer Prev, 2014, 19(1): 56-57.

[19] 曹勤, 冉志华, 萧树东, 等. 血清胃蛋白酶原、胃泌素-17和幽门螺杆菌IgG抗体筛查萎缩性胃炎和胃癌 [J].胃肠病学, 2006, 11(7): 388-394. Cao Q, Ran ZH, Xiao SD, et al. Serum pepsinogen-17, gastrin and Helicobacter pylori IgG antibody screening of atrophic gastritis and gastric cancer [J]. Chin J Gastroenterol, 2006, 11(7): 388-394.

(责任编辑：马 军)

Value of serum Pepsinogen and anti-H.pyloriIgG in early diagnosis of gastric cancer

XIE Qing, CHEN Weigang, QI Cuihua, LIU Fang, QIAO Kun

Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Medical College of Shihezi University, Shihezi 832008, China

Objective To investigate the value of serum Pepsinogens (PG) combined with anti-H.pyloriIgG in early diagnosis of gastric cancer.Methods The patients who underwent electronic gastroscopy from Jan. 2015 to Dec. 2015 in the First Affiliated Hospital of Medical College of Shihezi University were chosen, including superficial gastritis group (40 cases), mild atrophy gastritis group (40 cases), gastric precancerous state group (40 cases) and gastric cancer group (40 cases). SerumH.pyloriIgG antibody was detected by Western blotting, pepsinogen concentration in each group was detected by Immuno Assay.Results Compared with superficial gastritis group and mild atrophy gastritis group, serum PGⅠand PGⅠ/ PGⅡvalues in both gastric precancerous state group and gastric cancer group were decreased significantly (P<0.05). Compared with superficial gastritis group, the positive rate of anti-H.pyloriIgG in both gastric precancerous state group and gastric cancer group was increased (P<0.05); PGⅠ, PGⅠ/ PGⅡvalues in anti-H.pyloriIgG positive group were significantly lower than those in the negative group (P<0.05). The PGⅡ in anti-H.pyloriIgG positive group was significantly higher than that in the negative group (P<0.05). Pepsinogen and combined detection ofH.pyloriIgG antibody enhanced the sensitivity of diagnosis of gastric cancer.Conclusion Pepsinogen and anti-H.pyloriIgG are closely related with gastric cancer, the combined detection for early diagnosis of gastric cancer has important clinical significance.

Pepsinogen; Anti-H.pyloriIgG; Gastric cancer; Early diagnosis

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.11.010

国家级基金:新疆哈萨克族食管鳞癌差异基因的筛选及初步鉴定 (81260362); 地级市基金:内镜下消化道肿瘤早期诊断与治疗的应用研究 (gxjs2012-zdgg01)

谢庆，2013级研究生,研究方向：消化系统疾病。E-mail:280160645@qq.com

陈卫刚，主任医师，研究方向：消化系统疾病。E-mail:13579456959@126.com

R735.2

A

1006-5709(2016)11-1244-04

2015-11-01