产后抑郁症与雌激素受体β基因的多态性

汪广剑，瞿发林，仲爱芳，卜 莹，闫同军

抑郁症是严重困扰人类的精神疾病，女性比男性更容易罹患抑郁症［1］。在产后与围绝经期这段时期里，卵巢功能减退导致各种激素的分泌减少，尤其是雌激素的减少，从而出现一系列诸如记忆减退、潮热、失眠、抑郁、焦虑等方面的症状。女性对低激素水平或者激素水平起伏的敏感性高于男性，导致女性发病率高于男性［2］。雌激素受体［3］(estrogen receptor，ER)，可分为两种亚型，即ERα和ERβ。人ERβ基因5号外显子的配体结合区(1082号核苷酸)可发生G→A点突变。8号外显子的3＇端非编码区(1730号核苷酸)可发生A→G点突变。当这两处点突变发生后则分别出现限制性内切酶Rsa-Ι和Alu-Ι的识别位点，因此酶切ERβ的酶切片段就能区分ERβ的不同基因型。ERβ的这种基因多态性可能会影响不同个体ERβ的表达水平和功能，进而影响体内雌激素生物学效应的发挥。本文以ERβ基因的两个多态性位点作为研究对象，以探讨我国汉族人群中ERβ基因多态性与女性产后抑郁症的关系。

1 对象与方法

1.1 对象 观察组:选取2000年1月－2010年12月在本院住院治疗的常州本地汉族女性抑郁症124例，年龄21～35岁，病程6周～6个月，均符合中国精神障碍分类与诊断标准中抑郁症诊断标准(产后抑郁症，产后6月内发生)。对照组:选取同期体检健康的文化水平、年龄相匹配的女性144例。

1.2 实验方法 DNA制备:抗凝管抽取静脉血3 ml，采用德国QIAGEN公司的基因组DNA试剂盒提取DNA。用军事医学科学院生产的PCR仪扩增DNA。引物由大连宝生物有限公司合成。用于扩增Alu-Ι基因的上游引物是5＇-TTTTTGTCCCCATAGTAACA-3＇，下游引物是 5＇-AATGAGGGACCACAGCA-3＇用于扩增 RSA-Ι基因的上游引物是 5＇-TCTTGCTTTCCCCAGGCTTT-3＇下游引物是 5 ＇-ACCTGTCCAGAACAAGATCT-3＇，PCR扩增及酶切 PCR试剂盒由宝生物(大连)有限公司生产。反应条件为:94℃变性30 s，55℃退火50 s，72℃延伸10 min，循环35次。分别取 PCR 扩增产物10 μl，用10 U Rsa-Ι、8 U Alu-Ι于37℃酶切3 h后电泳，用凝胶成像仪观察电泳结果。ERβ基因型判定参照相关文献［4］。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0统计软件分析，基因型和等位基因频率采用基因直接计数计算，应用拟合优度检验计算基因型分布是否符合Hardy-Weinberg(H-W)平衡;组间基因型及等位基因频率比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基因分析结果 使用Alu-Ι酶切可区分出3种基因型:aa型(307 bp)、Aa 型(307、240、67 bp)、AA型(240、67 bp);使用Rsa-Ι酶切可区分出3种基因型:rr型(156 bp)、Rr型(156、125、31 bp)、RR型(125、31 bp)。

2.2 多态性分析结果 两组Rsa-Ι多态性分析:观察组和对照组均符合H-W平衡定律(P＞0.05);两组基因型rr、Rr、RR分布的比较，差异无统计学意义(P＞0.05);两组等位基因r和R频率的比较，差异无统计学意义(P＞0.05，表1)。两组Alu-Ι多态性分析:产后抑郁症组和对照组均符合H-W平衡定律(P ＞0.05);两组基因型 aa、Aa、AA 分布的比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，两组等位基因a和A频率比较，差异有统计学意义(P＜0.05，表2)。

表1 两组ERβ Rsa-Ι基因型和等位基因频率的分析［n(%)］

表2 两组ERβ Alu-Ι基因型和等位基因频率的分析［n(%)］

3 讨论

抑郁症是指育龄妇女在产后6周～6个月内出现抑郁症状，其发生率高于非妊娠期妇女，产后6～12周发生率为10% ～16%，产后6个月内发生率为22%。有研究表明雌二醇对中枢调节情绪和认知功能有多重影响，雌二醇可增强单胺类物质活性和突触后5羟色胺能效应，增加5羟色胺能受体数量和神经递质的转运和吸收。妊娠后体内雌激素水平过快下降，使脑内多巴胺D2受体的超敏和多巴胺转运蛋白的表达增加亦引起相应的抑郁情绪和行为改变。雌激素的最终效应不仅取决于雌激素本身的分泌与代谢，还与ER的表达及功能密切相关。研究ER的基因多态性与疾病间的关系有助于从基因水平阐明这些疾病的发病机制。

ERβ基因参与雌激素相关的基因效应近年来成为研究热点。Bekku等［5］采用双侧卵巢切除的雌性大鼠，以其在强迫游泳实验中出现抑郁样行为(长时间的悬浮不动-绝望行为)作为绝经后抑郁的动物模型。并在此抑郁模型的基础之上，对抑郁的大鼠分别给予15～30 mg/(kg·d)的雌二醇、丙咪嗪等药物，发现雌二醇、丙咪嗪、米那普伦和氟西汀都能够明显减少大鼠悬浮的时间，而东莨菪碱和地西泮无此作用。证明雌激素的撤退理论是产后，绝经期抑郁的一个重要病因假说［4］。有文献［6］报道ERβ存在基因多态性，其中 D14S1026、rs1256031、rs1256112、rs3020444和rs1152588与无卵症和贪食症存在关联。说明ERβ基因参与了雌激素撤退引发的一系列基因效应，但对雌激素减少或撤退引发的抑郁症状的研究甚少。Takeo等［4］则发现D14S1026与更年期综合征的抑郁症存在关联，51例更年期综合征D14S1026存在14～25个高度重复CA序列，并可分成EL、SS、SL和LL4种基因型，其中SS型患者血管运动症状、精神症状和经前期症状与其他几型相比风险系数明显增高，达7～13倍。Yu等［7］则发现ERβ Rsa-Ι多态性与围绝经期女性抑郁症无相关性。

基因多态性存在种族、民族和地域的差异，本研究选取常州本地汉族妇女，发现ERβ Alu-Ι多态性可能与常州地区汉族女性产后抑郁症的易感性相关，含等位基因A的基因型可能增加患抑郁症的风险，但未发现含R等位基因的基因型与患产后抑郁症的关系。不排除因科研设计不完善导致结果有所偏差，应全面考虑、进一步验证ERβ基因与产后抑郁症的关系。

［1］ 翟书涛.妇女精神卫生［M］.北京:人民卫生出版社，1999:192.

［2］ 张淞文.产后抑郁症发病因素与治疗进展［J］.中国妇幼保健，2002，17(8):764.

［3］ 黄海玲，韦叶生，解继胜，等.雌激素受体β基因多态性与子宫内膜异位症的相关研究［J］.中华妇产科杂志，2005，40(9):644-645.

［4］ Takeo C，Nnegishi E，Nakajima A，et al.Association of cytosine adenine repeat polymorphism of the estrogen receptor-beta gene with menopausal symptoms［J］.Gend Med，2005，2(2):96-105.

［5］ Bekku N，Yoshimttra H.Animal model of menpausal depressivelike state in female mice:Prolongation of immobility time in the forced swimming test following ovariectomy［J］.Psychopharmacology，2005，183(3):300-307.

［6］ Ichikawal S，Koller DL，Peacockl M，et al.Polymorphisms in the estrogen receptor beta(ESR2)gene are associated with bone mineral density in Caucasian men and women［J］.J Clin Endocrinal Metab，2001，86(1):135-139.

［7］ Yu XW，Ren YH，Li F，et al.Association between estrogen receptor beta gene Rsal polymorphism and depressive disorder in perimenopausal and menopausal women［J］.J Med Coll PLA，2005，20(2):102-105.