紫癜性肾炎患者HP感染与Th17/Treg失衡临床分析

王文龙，郭漂漂，陈梦洁，陈 叠，程勇军

(温岭市第一人民医院 ,浙江 温岭 317500)

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染后机体免疫应答处于失衡状态[1]。近年来研究发现，Thl7及其效应因子IL-17在HP感染的免疫应答中主要发挥促炎作用，而调节性T细胞(Regulatory T cells，Treg)主要发挥免疫抑制作用，Thl7/Treg比例失衡可能是HP导致机体免疫应答失衡的重要原因[2]。过敏性紫癜性肾炎(henoch schonlein purpura nephritis，HSPN)患者HP感染率明显升高[3]，HP感染与HSPN的关系是近年来研究的热点。据报道，HSPN患者也存在Thl7/Treg比例失衡[4]，HP感染是否是HSPN患者Thl7/Treg比例失衡的原因，目前尚不清楚。本研究探讨HSPN患者HP感染与Th17/Treg失衡的关系，为进一步解释HP感染与HSPN的关系提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年2月至2017年12月在我院就诊经肾脏病理活检确诊的HSPN患者为研究对象。纳入标准：(1)经光镜、免疫荧光及电镜确诊为HSPN；(2)尚未经过治疗；(3)签署知情同意书并积极配合试验。排除标准：(1)合并消化性溃疡；(2)合并高血压、糖尿病、脏器功能不全、恶性肿瘤、自身免疫性疾病及感染性疾病；(3)已经药物治疗；(4)妊娠或哺乳妇女。

1.2 方法

1.2.1 标本采集及指标检测 清晨空腹采静脉血10mL，其中5mL3000r/min 离心15min，分离血清，置于-80℃冰箱保存，用于检测血白蛋白和血肌酐；3mL加入肝素钠抗凝试管A，采用流式细胞术的三色荧光标记法检测Thl7细胞、Treg细胞(试剂盒由美国BD公司提供)；2mL加入试管B，采用ELISA法检测IL-17、TGF-β1表达(试剂盒由上海博湖生物科技发展有限公司提供)。24h尿蛋白定量采用磺基水杨酸-硫酸钠比浊法检测。

1.2.2 13C-尿素呼气试验(13C-urea breath test，13C-UBT) (1)患者空腹10h以上留取第1次呼气样本；(2)饮入含有75mg 13C-尿素的溶液100mL，并开始计时；(3)至30 min漱口后留取第2次呼气样本；(4)患者在30 min间歇期内需左侧卧位平躺于检查床上；(5)2次呼气样本采集时体位均保持端坐位；(6)呼气样本及时置于同位素质谱仪进行检测分析。13C-UBT监测值≥分界值定义为HP感染，反之，定义为非HP感染。

1.2.3 分组 根据是否存在HP感染，分为HP感染组和非HP感染组。根据《紫癜性肾炎诊治循证指南》[5]，结合病理类型、理化检查等给予激素、免疫抑制剂等治疗，若血压耐受，均给予血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)辅助治疗，根据病情，给予利尿等对症治疗。HP感染组给予2周标准四联HP根治治疗(质子泵抑制剂+克拉霉素+阿莫西林+枸椽酸铋)。比较2组治疗前后1个月 Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1的变化。

1.3 统计学处理

采用SPSS 15.0 统计学软件，计量资料组间比较采用配对t检验；计数资料组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 紫癜性肾炎患者HP感染情况

65例HSPN患者中43例存在HP感染，感染率为66.15%。

2.2 HP感染组和非HP感染组一般情况比较

2组年龄、性别、病程、病理分期、24h尿蛋白定量、血白蛋白和血肌酐比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 HP感染组和非HP感染组一般情况比较

2.3 治疗前HP感染组和非HP感染组Th17/Treg及IL-17、TGFβ1比较

HP感染组Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1显著高于非HP感染组，差异有统计学意义(P<0.05)；HP感染组Treg显著低于非HP感染组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 治疗前HP感染组和非HP感染组Th17/Treg失衡及IL-17、TGFβ1比较

2.4 2组治疗前后Th17/Treg失衡及IL-17、TGFβ1比较

经配对t检验，HP感染组治疗后Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1显著低于同组治疗前，HP感染组治疗后Treg显著高于同组治疗前，差异均有统计学意义(P<0.05)；非HP感染组治疗前后Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1、Treg比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 2组治疗前后Th17/Treg失衡及IL-17、TGFβ1比较

nIL-17(ng/L)tPTGFβ1(μg/L)tPHP感染组治疗前治疗后434327.78±9.9423.42±8.142.2250.0312.11±0.762.52±0.88-2.3120.026非HP感染组治疗前治疗后222220.44±8.5719.56±8.240.3470.7322.68±0.962.58±0.890.3580.724

3 讨论

虽然目前研究提示HP感染可能参与了HSPN的发病，但具体机制尚不清楚。研究[6]发现，HP感染参与了机体免疫损伤。近年来研究发现，Thl7及其效应因子IL-17在HP感染的免疫应答中主要发挥促炎作用，而Treg主要发挥免疫抑制作用，Thl7/Treg比例失衡可能是HP导致机体免疫应答失衡的重要原因[2，6]。本研究发现，在HSPN患者中，HP感染组Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1显著高于非HP感染组，Treg显著高于非HP感染组，提示HP感染在HSPN患者中同样可以导致免疫紊乱，表现为Th17/Treg比例失衡。

HSPN发病机制尚不完全明确，免疫紊乱为其原因之一。文献报道Th17和Treg及其相关因子的免疫失衡与多种免疫性疾病及肾脏疾病有关[7]。张建江等[8]研究发现，儿童过敏性紫癜患者，尤其是儿童HSPN患者存在明显的Th17/Treg失衡，提示Th17/Treg失衡与HSPN具有显著相关性。既然HSPN患者存在Th17/Treg比例失衡，而HP感染可以导致Th17/Treg比例失衡，那么，HP感染是否通过诱发Th17/Treg比例失衡而导致HSPN呢？目前尚不清楚。本研究通过抗HP治疗，发现HP感染组治疗后Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1显著低于同组治疗前，HP感染组治疗后Treg显著高于同组治疗前，但非HP感染组Th17/Treg无显著变化，故本研究提示HP感染参与了Th17/Treg比例失衡，这可能为其导致HSPN的重要原因之一。

综上所述，HSPN患者具有较高的HP感染率，HP感染可能通过导致Th17/Treg失衡而成为引发HSPN的诱因之一。抗HP治疗有助于改善HSPN患者Th17/Treg失衡。然而，本研究为单中心研究，病例数不多，尚需进行多中心、大样本研究加以证实。