梅毒血清试验对梅毒诊断及疗效的临床价值

时间：2024-09-03

熊文翠，马雅英，刘士君

(平湖市第一人民医院，浙江平湖 314200)

·基础与临床研究·

梅毒血清试验对梅毒诊断及疗效的临床价值

熊文翠，马雅英，刘士君

(平湖市第一人民医院，浙江平湖 314200)

目的：探讨3种梅毒血清学试验对梅毒诊断及疗效的临床价值。方法对10711例血清标本用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)进行梅毒筛查，阳性标本进一步用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)滴度检测。结果10711例血清标本进行TP-ELISA筛查，检出阳性441例，经TPPA法确诊阳性422例，阳性符合率为95.69%。441例TP-ELISA阳性标本进行TRUST法检出阳性240例，阳性符合率为54.42%，符合率明显低于TP-ELISA，差异有统计学意义(χ2=402.83,P<0.05)。结论TP-ELISA法敏感性较高，操作方便，可作为梅毒的常规筛查，但存在假阳性问题，尤其以60岁以上的老年人居多。TPPA法敏感性和特异性最高，作为确诊试验，但操作繁琐，不适合常规筛查。TRUST法敏感性和特异性均低于TP-ELISA法和TPPA法，仅可作为疗效观察和随访有无复发或再感染的指标。

梅毒；梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验；梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验；甲苯胺红不加热血清试验

Abstract: [Objective] To explore the clinical value of three kinds of syphilis serology test for syphilis diagnosis and curative effect.[Method]All of 10711 clinical specimens underwent routine TP antibody screening with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method; positive samples were further tested by treponema pallidum particle agglutination (TPPA) and toluidine red unheated serunm test (TRUST) . [Result]10711 serum samples were screened.there were 441 positive samples tested by TP-ELISA. Among them, the number of the same result tested by TPPA was 422 and the positive coincidence rate was 95.69%. Among the 441 positive samples, 240 were positive results by TRUST, the positive coincidence rate was 54.42%. Positive rate was significantly lower than TP-ELISA. There was significant difference (χ2=402.83,P<0.05). [Conclusion]TP-ELISA shows better sensibility, easy automation, as routine screening method, but it exists false positive, especially for old people of (≥60 years old). The sensitivity and specificity of TPPA are highest, as confirmed diagnose test. However, the complicated operation TPPA is not suitable as a routine screening method. The sensitivity and specificity of TRUST are the lowest, only be as a curative effect observation and follow-up whether relapse re-infection indicators.

Keywords: syphilis ; TP-ELISA ; TPPA ; TRUST

梅毒是由苍白螺旋体(Treponema Pallidum ,TP)引起的一种性传播疾病，病程呈慢性病变，可以侵犯皮肤粘膜及神经、心血管、骨骼等组织器官，该病临床表现复杂，危害大。因此，选择敏感性、特异性均高的血清学实验方法无论是对梅毒的诊断、治疗、预防，还是对血液制品的梅毒筛查都是十分重要的。目前主要是通过检测血清中的非特异性反应素和特异性抗体诊断梅毒。近年来我院采取TP-ELISA作为梅毒筛查试验，阳性结果经TPPA确证，并以TRUST滴度为疗效观察，现针对这一检测体系做一个回顾性分析。

1 资料与方法

1.1 标本来源

本院2012年1～6月住院和门诊检测梅毒抗体的患者共10711人，年龄0～90岁,中位数M=41岁。

1.2 试剂和仪器

TP-ELISA试剂和TRUST试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供，TPPA由日本富士瑞必欧株式会社生产。仪器为安图斯Anthos2010酶标仪、新波SYM-B10全自动酶标洗板机、XK96-8型梅毒旋转振荡器。

1.3 方法

用TP-ELISA法对临床标本进行筛查，大于临界(cut-off)值为阳性，并对阳性标本进一步做TPPA确证和TRUST滴度检测。所有试验均按试剂说明严格操作。

1.4 统计学处理

采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 3种血清血清学方法对TP抗体检测的结果比较

采用TP-ELISA法对10711例标本进行筛查，筛查出阳性441例，阳性检出率为4.12%。其中经TPPA确诊阳性422例，阴性19例，2种试验阳性符合率为95.69%。441例TP-ELISA阳性标本进行TRUST法检出阳性240例，经TPPA确诊240例，阳性符合率为54.42%。而201例TRUST阴性中，TPPA确诊182例，阴性19例。3种方法比较结果，差异有统计学意义(χ2=402.83,P<0.05)。结果见表1。

表1 TP-ELISA、TPPA与TRUST3种方法检测结果比较

2．2 TP-ELISA法的假阳性分析

TP-ELISA阳性的441例标本中有19例(4.3%)TPPA阴性，且以老年人居多，≥60岁的9例(47.37%)。针对这一特殊现象，本文对这19例患者进行调查，结果见表2。

表2 441例TP-ELISA法阳性标本中TPPA阴性和TPPA阳性病人基本资料比较

2．3 3种血清学方法检测梅毒抗体的临床意义

根据实验室检测结果与实际临床分析，再结合有关文献报道[1]，总结其临床意义。结果见表3。

表3 3种血清学方法联合检测梅毒抗体的临床意义

3 讨论

TP-ELISA法是近年来随着梅毒螺旋体基因工程研制成功而发展起来的一种血清学检测方法，具有较高的敏感性和特异性。有文献报道，TP-ELISA可以比TPPA更早地检测出TP特异性抗体[2]。TP-ELISA实际操作技术简便，试剂价格较便宜，适合血站献血者筛查、医院大批量标本的检测。其主要缺点是存在假阳性率偏高的问题[3]。本文结果显示，TP-ELISA阳性的441例患者中有19例TPPA确证阴性，且临床上找不到梅毒感染的其他依据，假阳性率4.31%。这19例患者以老年人居多，≥60者9例(47.37%),包括11例有多年糖尿病、心脑血管疾病、高血压等病史，4例有乙肝病毒、丙肝病毒或结核杆菌感染等传染病史，2例输血史。武建国[4]报道老年患者梅毒血清学试验假阳性的原因可能是：老年患者所患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂质抗体和/或抗梅毒抗体的交叉抗原；另外，TP-ELISA法因抗原可能不纯，而且使用了人血清白蛋白，使假阳性抗原位点的可能性增加[5]。所以TP-ELISA阳性的患者还需进一步做TPPA，以免误诊。

TPPA是将特异性的梅毒螺旋体抗原包被在明胶颗粒上进行血清抗体检测，不受生物素影响，有很高的敏感性和特异性，是梅毒抗体的确诊方法[6]。但TPPA试剂价格昂贵，试验时间较长，且操作繁琐，不适合大批量标本的检测。

TRUST采用重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成，在白色卡片上进行实验，以检测血清或血浆中的反应素。由于TP感染后，抗心磷脂抗体出现晚于特异性螺旋体抗体，而且梅毒晚期又可能转阴，故TRUST法不适宜一期梅毒、三期梅毒的诊断，对潜伏期和神经梅毒也不敏感[7]。但此法操作较为简单，其滴度变化可作为梅毒治疗疗效观察的指标。TRUST试验滴度与病程有关，当感染者接受治疗后或疾病处于非活动期时，TRUST滴度下降或消失，复发或感染时又会转阳，故其滴度变化有助于判断梅毒复发及再感染。

这3种血清学方法联合应用对梅毒的筛查、确诊、疗效观察可谓相辅相成，其结果解释如表3。TP-ELISA敏感性较高，对于初次检测TP-ELISA阳性而TPPA阴性的检测者，建议2周后随访复查TPPA，以排除窗口期因特异性抗体效价低而出现的TPPA假阴性。徐树良等[8]随访调查26例梅毒抗体TP-ELISA阳性而TPPA阴性献血者，发现有9例TPPA先后转阳性。但是TP-ELISA由于存在“钩状效应”而造成的假阴性问题不容忽视，当TP-ELISA阴性而TPPA阳性、TRUST滴度阳性的矛盾结果时应考虑到这种情况，应将标本稀释后复检；或TP-ELISA初筛阴性而临床高度怀疑为梅毒时，应建议进一步检测TPPA。

综上所述，3种方法在临床上的意义不同，TP-ELISA法是梅毒筛查的理想方法，对于阳性标本应做TPPA确证，TRUST可作为疗效观察和随访有无复发或再感染的指标。值得重视的是没有任何一种梅毒螺旋体血清学检测方法其敏感性和特异性可以达到100%，为了避免生物学假阳性干扰，应结合患者的病史，临床表现等进行综合分析，才能作出正确的判断。

[1]彭红,刘熔,赵素元.梅毒血清学检测流程的临床流行病学评价[J]. 中国卫生检验杂志, 2010,20 (2):329-331.

[2]徐树良,赵源源,王宁武,等. 26例梅毒抗体ELISA阳性TPPA阴性献血者随访调查[J]. 中国输血杂志, 2002,15(4) :265-266.

[3]季德成,李晓平,董春雷,等. ELISA法检测老年人梅毒抗体易产生假阳性分析[J]. 放射免疫学杂志, 2005,18 (3): 239-240.

[4]武建国. 老年人抗梅毒螺旋体抗体测定的假阳性率偏高[J]. 临床检验杂志, 2006, 24(4): 241-243.

[5]彭明喜. 酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析[J]. 现代实用医学，2006, 18 (2) :127-128.

[6]马聪,王芳,徐武夷. 梅毒螺旋体实验室检测技术的研究进展[J]. 中华医院感染学杂志, 2002, 12(12): 959.

[7]黄永梅. ELISA﹑TPPA和TRUST﹑RPR梅毒检测方法的比较[J]. 国际医药卫生导报, 2006, 12(8): 88-89.

[8]徐树良,赵源源,王宁武,等. 26例梅毒抗体ELISA阳性TPPA阴性献血者随访调查[J]. 中国输血杂志, 2002,15(4) :265-266.

Clinicalvalueofsyphilisserologytestforsyphilisdiagnosisandcurativeeffect

XIONGWencui，MAYaying,LIUShijun

(The First People′s Hospital of Pinghu , Zhejiang 314200,China)

熊文翠(1978-)，女，浙江平湖人，本科，主管技师。研究方向：免疫检验