义乌孕妇外周血未成熟粒细胞生物参考区间的建立

骆婷婷(通信作者) 方海俊 陈如昌 丁爱娟 张立晶

322000义乌市中心医院检验科1，浙江义乌

322000义乌市中心医院妇产科2，浙江义乌

综合应用电学和光(化)学原理进行检测的全自动血液分析仪，是临床检验最常用的筛检仪器之一。随着科技的进步，全自动血液分析仪不再局限于传统的白细胞三分类和五分类，部分型号的血液分析仪拥有更多的细胞计数和分类的扩展功能，能检测包括未成熟粒细胞(IG)在内的参数。孕妇因妊娠而导致一系列生理性变化，为了更好地了解IG 在健康孕妇外周血中的情况，建立孕妇外周血未成熟粒细胞生物参考区间，以便临床医生能更准确的诊断和治疗。

资料与方法

选取2020年8月-2021年4月在义乌市中心医院门诊常规孕检的孕妇，按照《妇产科学》第7版孕期分类标准，分为早孕(≤12周)、中孕(13～27周)和晚孕(≥28周)3组。同时随机选取同期体检中心健康育龄期女性作为健康女性对照组。选取健康对照组120 例，年龄18～45 岁，平均(28±7)岁；早孕组120 例，年龄18～38 岁，平均(28±5)岁；中孕组120 例，年龄18～41岁，平均(27±5)岁；晚孕组211例，年龄20～45 岁，平均(29±4)岁。各组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批。

纳入标准：①单胎妊娠；②生命体征平稳；③1个月内无感染性疾病；④采集标本前未剧烈运动、未处于兴奋状态。

排除标准：①多胎妊娠者；②尿常规沉渣定量检测细菌＞4000 个/μL；③存在严重肝、肾疾病者；④存在免疫性疾病者；⑤存在恶性肿瘤疾病。

方法：采集静脉血3 mL 于乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝的试管中，使用深圳Mindary 6900 全自动血细胞分析仪及配套试剂进行检测，山东卓越生物技术股份有限公司的两水平血细胞分析用质控物，当日结果均在控。整个检测过程1 h 内完成，记录IG＃(绝对值)和IG%(百分比)。

观察指标：①比较健康对照组和不同孕周组外周血IG＃中位数M(P25-P75)；②比较健康对照组和不同孕周组外周血IG%中位数M(P25-P75)。

统计学处理：采用SPSS 23.0 软件进行统计学分析。首先采用Kolmogorov-Smirnov 检验对IG 检测结果进行正态性检验，IG 数据为偏态分布资料，以中位数及百分位数〔M(P25-P75)〕表示。在临床应用中，IG 结果以过高为异常，本研究制定其单侧参考区间，计算第95 百分位数值(P95)。不同孕期组之间IG 的比较采用Kruskal-Wallis 秩和检验(H 检验)，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

结果

健康对照组和不同孕周组外周血IG＃中位数M(P25-P75)比较：健康对照组、早孕组、中孕组和晚孕组外周血IG＃总体分布比较，差异有统计学意义(H=287.27，P＜0.05)，除中孕组和晚孕组IG＃总体分布比较差异无统计学意义(P＞0.05)外，其余各两组间比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。女性健康对照组外周血IG＃生物参考区间：0×109/L～0.01×109/L；早孕组外周血IG＃生物参考区间：0×109/L～0.03×109/L；中晚孕组外周血IG＃生物参考区间：0×109/L～0.24×109/L。见表1。

表1 健康对照组和不同孕周组外周血IG＃中位数M(P25-P75)5比较(×109/L)

健康对照组和不同孕周组外周血IG%中位数M(P25-P75)比较：健康对照组、早孕组、中孕组和晚孕组外周血IG%总体分布比较，差异有统计学意义(H=289.69，P＜0.05)，除中孕组和晚孕组IG%总体分布比较，差异无统计学意义(P＞0.05)外，其余各两组间比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。女性健康对照组外周血IG%生物参考区间：0～0.2%；早孕组外周血IG%生物参考区间：0～0.3%；中晚孕组外周血IG%生物参考区间：0～2.6%。见表2。

表2 健康对照组和不同孕周组外周血IG%中位数(P25-P75)比较(%)

讨论

目前，被批准用于临床的血液分析仪检测参数，如白细胞计数和分类、红细胞计数、血红蛋白测定、血小板计数、网织红细胞计数等，其临床意义已经明确。随着血液分析仪检测原理和技术的发展，新近开发的多种检测参数，经受临床实践的验证，未成熟粒细胞就是新研究参数的一种。迈瑞血液分析仪采用核酸荧光染色和导体激光流式细胞分析相结合的方法，根据细胞内核酸含量的高低来检测未成熟粒细胞。IG主要包括杆状核粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞和晚幼粒细胞，但不包括原始细胞，有助于筛检和监测炎症、类白血病反应、组织坏死、肿瘤、骨髓异常增生性疾病等，有较多的临床应用价值。

“健康人群”的解剖、生理、生化等各种数据不仅因人而异，而且同一个人还会因为身体内外环境的改变而改变，因而要确定波动区间，即参考区间。参考区间是表示两个参考限之间的距离，即参考范围。参考范围用途广泛，主要在流行病学调查中用于研究与性别、年龄、职业、习惯、遗传、种族、地理位置等因素有关疾病的病因学和发病机制；鉴定商品新仪器与成套试剂，将其测定值与已制定的参考区间比较；用于室内质控和室间质评，在确定医学决定水平时进行参考。在确定参考区间时通常需要考虑地区、民族、性别、年龄、劳动条件、遗传、时间(季节与昼夜)、月经、妊娠、饮食、药物和生活习惯等因素带来的差异。已有较多的学者对健康儿童和健康成人外周血IG 进行了研究。Wiland EL 等[1]研究得出美国俄亥俄州新生儿出生后前48 h IG%的参考区间为0～8.4%；Roehrl MH 等[2]研究得出美国马萨诸塞州波士顿人群中外周血IG 与年龄有关，但与性别无关，并建议门诊IG%的参考区间上限为0.30(≤10 岁)和0.90(＞10 岁)。马科等[3]研究得出河北省健康成人外周血IG#的参考区间为0.00×109/L～0.06×109/L，IG%的参考区间为0.0～0.8%，与性别和年龄无关。各地区健康人群外周血中IG 的参考区间略有不同。IG 的生物参考区间因年龄、性别、地域而有所差异。

由于胚胎、胎儿生长发育的需要，在胎盘产生的激素参与、神经内分泌的影响下，孕妇体内各系统发生一系列适应性的解剖和生理变化，部分参数的生物参考区间区别于非妊娠人群[4-6]。柳国洪[7]等研究显示正常妊娠组各孕周红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积均明显低于非孕对照组，正常妊娠组血小板水平在整个孕期中为缓慢下降，平均血小板体积逐渐上升。彭传梅[8]等研究显示云南昆明地区不同孕周健康孕妇D-二聚体生物参考区间高于健康非妊娠女性。Fernandez Suarez A 等[9]研究说明当在IMI(幼稚细胞)通道上发现报警时，82%孕妇处于妊娠晚期。马芬等[10]学者研究显示，孕妇IG 检出率明显高于其他正常人群，孕妇在整个孕期外周血IG 检出率升高，尤其是在怀孕中、后期。综上所述，了解孕妇外周血中IG情况，有助于做好孕期保健工作，有利于优生优育。

本次研究采用了公认的孕期分组方法，对入选人群进行了合理的纳入和排除，每组样本量符合CLSI(临床实验室标准化协会)C28-A3文件中的要求。从研究的结果中可以得出健康孕妇外周血IG 高于未妊娠健康女性，健康对照组＜早孕组＜中晚孕组。女性健康对照组外周血IG＃生物参考区间：(0～0.01)×109/L，IG%生物参考区间：0～0.2%，与马科等[3]研究的成人外周血IG＃的正常参考值为(0～0.06)×109/L，IG%的正常参考值为0～0.8%有较大差异，可能是与笔者研究中使用的血液分析仪厂家和试剂厂家、研究样本量的大小、研究人群所处的区域、饮食结构等有关。本次研究早孕组IG＃参考区间：(0～0.03)×109/L，IG%参考区间：0～0.3%；中晚孕组IG＃参考区间：(0～0.24)×109/L，IG%参考区间：0～2.6%，得出生物参考区间的研究结果和结论与王彦平等[11]学者研究的早中晚孕不同孕期IG 计数和百分比的生物参考区间结果相近。

本次研究建立了本地区孕妇外周血IG 计数和IG 百分比的生物参考区间，可为临床医生对孕妇的诊断和治疗提供参考依据，帮助临床区分健康妊娠或合并感染性疾病或合并血液系统疾病，减少漏诊和误诊。