先天性耳聋患儿76例耳聋基因突变筛查结果研究

易天华 贺建桥

doi：10.3 969/j .issn.1007-614x.2018.5.71

摘要 目的：分析先天性耳聋患儿76例耳聋基因携带情况。方法：收治先天性耳聋患儿76例，对其采用基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱技术检测SLC26A4、GJB2、GJB3、线粒体12SrRNA 4个常见遗传性耳聋基因（共20个位点）的突变情况。结果：经飞行质谱检测，耳聋相关基因突变18例，检出率23.68%。其中GJB2基因突变9例（11 84%），SLC26A4基因突变6例（7 89%），SLC26A4、GJB2、GJB3复合突变3例（3.94%）。结论：先天性耳聋基因突变检出率较高，GJB2基因纯合率最高，SLC26A4基因突变次之。先天性耳聋基因的突变检测为减少出生缺陷患儿提供了依据，应重视先天性耳聋基因的基因学检测。

关键词 先天性耳聋；基因突变；SLC26A4；GJB2

作为最常见出生缺陷之一的先天性耳聋，是一种非综合性耳聋，特征是以听力丧失为唯一症状，60%与遗传因素有关，占遗传性耳聋的70%，其他综合性耳聋30%[1]。至今已克隆和鉴定出常染色体隐性遗传耳聋基因40个，常染色体显性遗传耳聋基因27个，线粒体耳聋基因7个和X连锁耳聋基因3个[2]。目前报道的耳聋相关突变基因有SLC26A4、GJB2、GJB3、线粒体12SrRNA，并且已作为临床耳聋基因的常规检查。不同的基因在不同的民族和地区有不同的突变率和发病率[3]。本研究对本市先天性耳聋患儿76例进行4个基因20个突变位点的耳聋基因普遍筛查，这4个基因分别是（GJB2/GJB3/SLC26A4/线粒体12SrRNA），从而进一步对我市听力障碍儿童耳聋基因携带情况进行分析和了解，明晰当地先天性耳聋基因的流行病学情况。

资料与方法

2013年9月-2014年9月收治已行人工耳蜗植入进行术后康复的先天性耳聋患儿76例，男41例，女35例，平均年龄5 .12岁；患儿携带耳聋突变基因18例。

听力诊断与评估：有关听力学的诊断和随访的临床资料，包括患儿一般信息、耳毒性药物使用史、母亲孕期疾病史、新生儿出生后病史、耳聋家族遗传史、体格检查、出生时的听力筛查及随访资料等。采用耳声发射和电生理检查对听力学进行检查测验，具体如下：①采用美国GSI-33型中耳分析仪进行声导抗测试，对耳声发射进行检测。②利用美国GSI Audera听觉脑干诱发电位测试仪进行电生理检查测试。

基因检测方法：所有患儿均对足跟血进行采集，使用滤纸采集卡，待卡自然晾干后将其装回密封袋中，等待送检。对耳聋基因利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术进行检测，对4个常见耳聋基因GJB2、SLC26A4、MT-RNR1和GJB3进行20个突变位点的检测。

统计学方法：建立Excel数据库，采用SPSS 13.0软件进行统计分析，对耳聋基因检出率进行描述性分析。

结果

基因检测结果，见表1。

听力筛查及随访情况：双侧耳聋组18例中患儿出生时听力通过2例，其余的经检测均没有通过。通过的这2例基因检测，结果是SLC26A4基因复合杂合突变者，患儿1岁左右时对声音的反应差。对患儿进行ABR检测，结果表明2例均是双耳重度聋，随后对其进行颞骨CT检查，结果显示2例均提示大前庭导水管扩张。左侧耳聋患儿1例，表现为左侧耳廓畸形、耳道闭锁，听力学在6个月时的诊断是左耳重度耳聋，MRI检查结果表明右耳未见明显异常，1岁时外伤后出现极度下降的右耳听力，ABR再次检测结果提示重度耳聋，双耳，而颞骨CT检查结果表明大前庭导水管扩张出现于左耳，而基因检测表示未见阳性突变。

讨论

最先被克隆定位的遗传性耳聋基因是GJB2，其对缝隙连接蛋白Cx26进行编码。在人类耳蜗毛细胞中Cx26表达较高，该基因的突变与耳聋发生相关性较大，是突变率最高的耳聋基因[4]。本研究中GJB2突变9例（11.84%），其中235del C纯合突变率最高，其次为35del G和235del C杂合突变，进一步证明了突变高频率耳聋基因是GJB2[5]。GJB2突变一般会引起常染色体隐性遗传，对GJB2基因突变携带者的婚育方面，本研究结果可起到一定的指导作用。

编码缝隙连接蛋白的另一个基因则是GJB3，其可引起常染色体显性或隐性遗传性耳聋[6]。在本研究中GJB3混合突变3例（3.94%），均通过听力筛查且随访无异常。但有报道提示，该基因杂合突变多表现为迟发型高频听力下降[7]。临床上应提醒基因突变携带者进行定期的听力测试，当出现听力下降时应及时就医。

SLC26A4属于离子转运体家族，其突变导致常染色体隐性遗传[8]，在本研究中，SLC26A4突变率仅次于GJB2（7.89%，且突变类型有杂合突变和纯合突变，因此进行SLC26A4基因突变筛查，早期检测筛查并进行有效的预防，可使患者的听力下降得到阻止或延缓。另外，本研究中对线粒体DNA12SrRNA基因致聋突变没能检出，这主要和本研究例数少有一定的關系。

本研究通过对本市先天性耳聋患儿76例行常规耳聋基因检测，发现GJB2和SLC26A4是当地遗传性耳聋的主要致病基因。其中235delC纯合突变是GJB2基因检出频率最高的突变位点。SLC26A4基因检出频率最高的突变位点为IVS7-2A>G杂合突变。遗传因素在先天性耳聋患儿中占较高比例，对于患儿及突变基因携带者的听力随访意义重大，尤其是迟发性耳聋发生。耳聋基因的较早检出，对做到早发现、早诊断、早干预、早预防并减少耳聋患者的出现，有针对性地对耳聋基因携带者进行婚前、孕前及产前的遗传咨询指导，避免耳聋患儿出生有积极意义。

参考文献

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