新生儿血液白细胞参考区间的建立与验证

618000德阳市第二人民医院，四川 德阳

通过血液白细胞检测来辅助诊断临床患者的疾病状况，是临床最常用的诊治技术手段之一。在新生儿这个特殊年龄段，白细胞水平变化巨大，需建立详细参考区间。我们按照国际化学委员会提出的实验室生物参考区间的建立方法和要求[1]，组织实施了新生儿白细胞正常参考值的调查和验证分析，通过2011年-2017年收集的大量正常新生儿静脉血样白细胞(WBC)数据，建立新生儿本地区-各日龄段的WBC参考区间，并验证评价其诊断效率。

资料与方法

检测硬件体系：检测设备包含SYSMEX XN-B1、 SYSMEX XN-1000、SYSMEX XN-350、SYSMEX 1800全自动血细胞分析仪。

质量保证体系：采用设备生产商配套检测试剂组成完整的检测体系，Bio-Rad三水平质控物进行日常质量控制[2]，并用EP9-A2规范进行设备间的检测一致性控制。

数据来源：①正常新生儿血样本的选取：2011年10月-2017年10月收治出生时Apgar评分[3]的新生儿、28 d内自愿参调新生儿，均无感染、无过敏、无血液系统相关疾病等显著影响血细胞成分与形态的其他疾病，动员其监护人同意并签署血样采集知情告知书；在其监护人的允许下采集其静脉血样或末梢血样，立即免费送检且60 min内完成检测。②正常新生儿白细胞数据选取：对上述样本的检测结果，经数据质量审核符合后，向医生和参与者发送检测报告，并按静脉血和末梢血分类汇总整理。

验证数据：2017年10月-2018年1月收治就诊的新生儿血液白细胞数据。参照WS/T405-2012行业标准完成参考区间的效能验证。

结 果

将有效静脉血样数据4 106例绘制成直方图，按正态分布数据的参考区间估计方案，得到新生儿白细胞参考值区间(4.57～17.8)×109/L。

整理后的数据导入SPSS 19.0软件做Kolmogorov-Smirnov统计分析，其渐进显著性sig.=0.00(P＜0.01)，提示该数据不符合正态分布，上述正态分布数据法评估的参考区间结果应被质疑，须采用百分位数法估计其参考区间[3]。利用SPSS 19.0的百分位数法分析功能，得到P5=6.28和P95=17.4，即0～28 d新生儿白细胞参考值区间为(6.28～17.4)×109/L，见表1。

诊断效率验证：①参考区间确定方法的符合性：随访30位儿科医生对百分位数法所得的白细胞参考区间的接受率为96.7%，初步确认百分位数法评估的新生儿WBC参考区间具有合理性。即上述分析结果(6.28～17.4)×109/L可作为0～28 d新生儿白细胞正常参考值。②参考区间的诊断效率：随机选择临床病例，将其临床诊断结论与依据该参考区间的判定结果进行统计分析，结果该新生儿WBC参考区间的诊断敏感度85.1%，诊断特异性85.4%，临床诊断符合率可达到85.2%，满足临床检验辅助诊断指标工作效率要求。

数据价值的再利用：①数据的分组分析：将收集到的数据按照新生儿日龄做多层分组统计，以找到比0～28 d新生儿组更有诊断效率的WBC参考区间。其分组信息和统计分析结果汇总，见表2。

由表2可见：0～28 d新生儿WBC数据应细分为(0，3)d和(3，21)d等数据组进行进一步分析，分别计算其参考区间。同时加入性别因素对参考区间的影响，见表3。

分组参考区间的诊断效率验证：随机选择新生儿WBC检测值并参照临床诊断结论，对上述WBC的参考区间进行验证分析。结果显示：相较0～28 d数据组，各分组参考区间的诊断效率均有一定程度的提高，见表4。

表2 0～28 d新生儿WBC数据分组统计分析汇总表

表3 新生儿0～28 d白细胞数据的分组参考区间统计

表4 分组新生儿白细胞参考值区间的诊断效能统计表

讨 论

通过对正常新生儿白细胞数值的调查分析，和对分组正常参考区间的临床诊断效率验证，得到(0，28)d新生儿组白细胞正常参考值(6.28～17.4)×109/L。其中，(0，3)d新生儿组白细胞正常参考值(6.67～19.0)×109/L；(3，21)d男性新生儿组白细胞正常参考值(5.59～12.4)×109/L，(3，21)d女性新生儿组白细胞正常参考值(6.47，16.7)×109/L。各参考区间的临床诊断效率均＞85%。

对新生儿这个特殊年龄段的白细胞参考值进行研究，以更多地为临床医生和患者提供有效的辅助诊断依据。本研究将0～28 d日龄的无感染疾病和无血液疾病的新生儿作为调查对象。并通过数据的分组分析，得到新生儿(0，3)、(3，21)和(21，28)d WBC数据差异有统计学意义。出生≤6 h组和出生≤24 h组的新生儿白细胞数据差异未检出显著性。(21，28)d新生儿白细胞数据较其他日龄组有显著性降低，是否该年龄段的新生儿白细胞水平已接近幼儿年龄段，或是因为地域性差异所致，需进一步扩充数据探究。该调查所选择的检测体系和量值溯源体系，保证了异常血细胞能被正确识别和白细胞计数偏差能得到有效纠正[3]。