禽痘病毒的诊断与防控

宋玉红/内蒙古赤峰市巴林右旗动物疫病预防控制中心 025150

1 流行病学

在禽痘暴发期间，金丝雀和其他雀鸟的死亡率可达80%至100%。这与鸡和火鸡的死亡率普遍较低形成鲜明对比。病毒的传播可通过皮肤损伤发生，吸血性昆虫如蚊子和螨虫传播。受感染的鸟类产生的气溶胶，或摄入受污染的食物或水，也被认为是传播的来源。这种疾病最常见的特征是皮肤增生性病变，包括表皮上皮增生，导致增生，疣状突起。上述症状主要局限于身体中没有羽毛的部位，如腿、脚、眼睑和喙基部。在恢复和愈合后疤痕通常可见。野生鸟类的死亡率通常很低，这取决于增殖性病变的数量和大小。然而，如果感染发生在皮肤无羽毛区，继发性细菌感染，死亡率可能很高。另一种较不常见的APV 感染形式是白喉型，在消化道和上呼吸道粘膜中以纤维坏死和增殖性病变的形式出现，其死亡率一般高于皮肤症状。尽管宿主和病毒株种类繁多，但受感染的家禽的相关病理仍然相同，临床症状因病毒的毒力、宿主的易感性、病变的分布和类型而异。APV与禽逆转录病毒、网状内皮增生症病毒之间存在一定的关系。由前病毒整合到APV 基因组中同时引起的网状内皮增生症可能在疾病暴发时APV 感染中起着重要的作用。众所周知，网状内皮增生症病毒感染会导致免疫抑制。在受影响的鸟类中。在APV 感染导致网状内皮增生症病毒可能会加剧疾病的发展。尽管一些哺乳动物细胞系似乎能够支持APV 的复制，但没有证据表明APV 在人类身上引起了临床疾病。

2 临床诊断

感染临床特征显示多种皮肤病变，从丘疹到结节不等。在剖检过程中，皮肤和喉的病变通常怀疑为APV 感染。

2.1 实验室诊断

2.1.1 组织病理学和电镜对于疑似APV 感染，可以用剖检来检测，尤其是口腔出现白喉形态。此外，用经典的Wright’s Giemsa 染色对组织切片进行组织学检查，可以发现典型的大、实或环状嗜酸性胞浆内包涵体，称为Bollinger 小体。透射电镜（TEM）也确认出APV 感染，有包涵体内典型的APV 颗粒。用2%磷钨酸（Pta）对感染细胞进行负染电镜也可鉴定APV。这些方法通常用来实验室鉴定APV。

2.1.2 病毒分离将典型APV 的临床标本的匀浆接种到鸡胚上，是诊断APV 的标准方法，尽管有些APV 株在鸡胚上不容易生长。鸡胚首先用70%的酒精擦拭消毒，然后在气室上的打一个小孔，在鸡胚的另一侧打另一个孔，形成一个假气囊，然后用橡胶球负压降低气压。用无菌一次性1mL 注射器对感染样本进行接种，接种量约为0.1～0.2mL。鸡胚在37℃下孵育5d，每天用检查胚胎死亡情况。接种后3～5d，在膜上可观察到大小为0.5至1.5mm 的斑点状病变。另一种分离APV 的方法需要对临床样本进行切除和匀浆，并将匀浆上清液接种到细胞上培养，如CEF 细胞。细胞病变通常在接种后4～6d 内形成，这取决于病毒分离物和感染的多重性。

2.1.3 分子生物学检测针对特定基因的PCR、限制性片段长度多态性（RFLP）、Southernblot 杂交等方法正在越来越多地用于检测和鉴定APV。PCR技术对病毒核酸检测是敏感和特异，可以提高对许多病毒病原体的诊断敏感性。

2.1.4 血清学分析传统的琼脂凝胶免疫扩散的血清学检测技术在全球范围内广泛用于家禽APV 的监测和疾病控制工作。这种检测在对大量的血清进行检测时，与其他检测方法如酶联免疫吸附试验（ELISA）相比，灵敏度似乎较低。ELSIA 是一种快速、简便的检测抗APV 抗体的方法，特别是当大量的血清检测时，比中和试验更灵敏。

3 防治

控制家禽APV，需要在保持治疗效果的同时保持低成本的策略。预防可以通过疫苗接种来实现。已研制出重组和活的改良疫苗，用于预防鸡、鸽子、火鸡和鹌鹑感染。现有疫苗是非常有效的，这无疑对预防家禽养殖中的疾病作出了巨大贡献。由于不同的APV是从鸟类物种中分离出来的，而且由于只有少数几个分离物已被鉴定，因此开发针对所有物种的分类群特异性疫苗一直是困难的。因此，现有的疫苗往往是在试验的基础上使用的，需要对这些病毒的分子生物学、病理学和流行病学有更多的了解，才能研制出能够有效保护各种鸟类的疫苗。与大多数病毒感染一样，没有针对禽类痘病毒感染的专门治疗方法。可用的治疗方法包括使用碘甘油在皮肤增生的皮肤损伤处使用，以帮助愈合，控制继发性细菌感染的抗生素以及使用维生素A 帮助皮肤愈合。

鸡痘被认为是一种痘病，容易传播。鸡痘疫苗是最早引进的家禽疫苗之一。鸡痘疫苗往往分为两种类型：鸡胚起源型（CEO）和组织培养型（TCO）。一般来说，TCO 比CEO 更弱，这可能是由于更广泛的传代。因此，虽然TCO 疫苗可以用于雏鸡，但CEO 疫苗的残留致病性较高，该疫苗在雏鸟出生几周后才能使用。然而，TCO 疫苗的更弱的免疫反应意味着不会提供持久的保护，因此蛋鸡和育种者需要在6周时使用CEO 疫苗。TCO 应用于日龄雏鸡更实用，特别是在使用半自动注射器的情况下。

商用重组鸡痘病毒载体疫苗现已上市，例如针对禽类脑脊髓炎，禽流感，传染性喉气管炎，支原体和新城疫。许多其他重组疫苗正在开发中。但使用适当减毒的疫苗载体是很重要的，特别是在接种疫苗后避免出现并发症。

4 结语

APV 是一种对家禽产业和野生鸟类具有经济重要性的疾病。因此，需要预防措施，例如疫苗接种。许多重组APV 结构已获准用于兽医领域，目前正在测试一系列候选疫苗，以用于预防动物和人类多种传染病的疫苗。因此，重组APV 载体疫苗在不久的将来也有可能被用于治疗人类疾病。使用APV 而不是痘病毒或其他哺乳动物病毒作为载体的主要安全理由是，APV不是人畜共患病，不能在哺乳动物中进行完整的复制周期。然而，最近的研究表明，鸡痘病毒能够在一些已建立的哺乳动物细胞系中复制和产生后代病毒。新的分子工具使限制病毒进入某些宿主的因素和机制得到了更好的解决，例如艾滋病毒和非典病毒。宿主机制、致病性、宿主免疫和病毒免疫策略对于APV 作为载体在多种属靶向疫苗中的应用具有重要意义。