气相色谱—质谱联用测定婴幼儿湿巾中苯扎氯铵的含量

黄博能

摘要

建立了采用GC-MSD快速测定婴幼儿湿巾中3种苯扎氯铵的分析方法。与目前常用的HPLC法相比，GC-MSD法的测定结果更加准确可靠，测定低限也远远低于液相色谱法的100mg/kg，可达10mg/kg。同时，避免了HPLC法易产生假阳性结果的缺陷。3种苯扎氯铵在0.5mg/L～10mg/L范围内，线性相关系数均大于0.99，加标回收率在85%～105%之间，相对标准偏差小于10%。结果表明：该方法简便快速，能准确测定婴幼儿湿巾中苯扎氯铵的含量。

关键词：苯扎氯铵；气质联用；婴幼儿湿巾

随着人们生活水平的提高，婴儿湿巾已成为大多数育婴家庭的必备用品之一。婴儿湿巾主要是由非织造布和水构成，可能含有甘油、有益的织物提取物和维生素等，而含有水和营养成分的条件下，容易滋生细菌，因此会加入杀菌剂，如苯扎氯铵，以保证产品的质量[1]。

苯扎氯铵，又名洁儿灭，是一种具有广谱、高效杀菌能力的季铵盐类阳离子型表面活性剂。苯扎氯铵主要由3种同系物：十二烷基二甲基苄基氯化铵（C12-BAC）、十四烷基二甲基苄基氯化铵（C14-BAC）和十六烷基二甲基苄基氯化铵（C16-BAC）组成。苯扎氯铵可引起变态反应性结膜炎、视力减退、接触性皮炎等。过量的苯扎氯铵引起心动过速、心悸等症状。婴儿的皮肤非常娇嫩，很容易过敏，因此，婴儿湿巾中过量的苯扎氯铵可能会对婴儿产生不良影响[2-3]。

目前，苯扎氯铵含量的测试方法主要采用高效液相色谱法[4-6]，并需要选用特异性较强的阳离子色谱柱才能有效分离，而实验室通常采用的C18柱分离特异性较差，易造成假阳性[2，5，7]。本文建立了采用气相色谱-质谱联用仪（GC-MSD）对婴幼儿湿巾中的3种苯扎氯铵含量进行测定的方法，方法选择性强，对仪器要求简单，能够快速准确地定性和定量。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

气相色谱-质谱联用仪（Agilent 6490， GC-MSD），配制HP-5MS，30m×0.25mm×0.25μm色谱柱，超声波清洗仪（上海之信仪器有限公司），恒温烘箱（德国Memmert公司），AB204-S型电子天平（瑞士 METTLER TOLEDO 公司）。

甲醇（色谱纯），C12-BAC、C14-BAC和C16-BAC（纯度>98%，TCI）。

1.2 标准储备液和标准工作溶液的配制

准确称取C12-BAC、C14-BAC和C16-BAC标准品各0.1g，精确至0.0001g，用甲醇溶解并稀释定容至100mL，配制成1000mg/L的标准储备液。移液管移取1mL标准储备液，稀释定容至100mL，配制成10mg/L的标准工作溶液。

1.3 标准工作曲线

分别移取标准工作溶液0.5mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL至10mL容量瓶，稀释定容。

1.4 试验方法

1.4.1 样品前处理

取代表性的试样，置于玻璃表面皿，置于50℃恒温烘箱中2h，冷却至室温。将样品剪碎至5mm×5mm以下，混匀后准确称取0.50g，精确至0.0001g，置于25 mL样品瓶中，加入10mL甲醇，置于超声波清洗仪中超声20min，提取液经0.45μm滤膜过滤，采用GC-MSD测试。

1.4.2 仪器条件

载气He的流量为1.0mL/min，纯度≥99.999%，进样口温度：250℃；传输线温度：280℃；升温程序：初始温度70℃，保持1min，升温速率20℃/min，升温至280℃，保持4min；离子源：EI源，电离能量70eV；进样量：1μL，进样方式：不分流进样；扫描方式：SCAN+SIM，溶剂延迟：3min。

2 结果与讨论

2.1 方法的优化

根据实际测试的婴幼儿湿巾含有水分，且不同的样品含水量也不同，直接称取样品容易因含水量不同导致测试的重复性变差，同时采用GC-MSD测试的样液不能含有水分，含有水分的样液会损坏色谱柱，导致测试结果出现偏差。此外，考虑到目标测试物质没有挥发性，故采用恒温烘箱去除样品中的水分，既保证测试结果的重复性和准确性，又避免了后续繁琐的样品前处理过程，即需要除去样液中的水分而带来目标物质的损失。C12-BAC、C14-BAC和C16-BAC为阳离子型表面活性剂，采用甲醇为萃取剂，通用性强，毒性相对较低，并且能有效地萃取目标物。

文献研究的苯扎氯铵含量的测定均采用液相色谱法[2]，而采用常规的反相C18柱分离效果较差，易产生假阳性的结果，需采用选择性强的阳离子色谱柱，并且需要采用合适的流动相才能将3种苯扎氯铵同系物有效地分离。同时，采用液相色谱法的检测限较高，通常大于100mg/kg[2]，当产品中含有的苯扎氯铵物质低于100mg/kg时，采用液相色谱法无法检出。气相色谱-质谱联用仪（GC-MSD）具有灵敏度高、通用性强、操作简单快捷，可以快速准确地定性和定量苯扎氯铵。气质联用仪采用SCAN+SIM的扫描方式，全离子扫描快速定性苯扎氯铵，选择离子扫描对苯扎氯铵进行准确的定量分析（见表1）。综上所述，采用GC-MSD检测样品中的3种苯扎氯铵，在15min内可以完全分离目标物质，峰形较好，分离效果良好（见图1）。

2.2 检测限和线性范围

进行样品添加试验，加标制备0.5mg/L（10mg/kg）的样品溶液，按规定条件进行测试（见1.4），经过测定6个平行样品中3种苯扎氯铵同系物的信噪比（S/N）均远大于10，平均回收率均大于90%，相对标准偏差（RSD）低于5%，因此按照10倍信噪比定量的原则，故检测低限为10mg/kg。

按照1.3中配制的一系列浓度分别为0.5mg/L、1.0mg/L、2.5mg/L、5.0mg/L和10.0mg/L的混合标准溶液，在相同的仪器条件下进行测试，以质量浓度（mg/L）为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，在0.5mg/L～10mg/L范围内得到3种苯扎氯铵的线性关系，如图2所示，结果表明，线性相关系数R2>0.99，线性相关性良好。

2.3 精密度和准确度

通过重复测试和加标回收试验来验证方法的精密度和准确度。

2.3.1 精密度

对空白样品加标，制备8个约10mg/kg的平行样，上机浓度C=0.5mg/L，按照1.4中的方法进行测试。计算3种苯扎氯铵的相对标准偏差RSD分别为3.78%、3.86%、4.07%（如表2所示），其RSD值均小于10%，结果表明方法重复性良好，具有很好的重现性，无显著性差异。

2.3.2 加标回收率

将不同浓度的3种苯扎氯铵混标添加到空白样品中，按照本试验方法进行回收率测定，每个水平单独测试8次。结果表明，在10mg/kg、20mg/kg、200mg/kg3个添加水平下，3种苯扎氯铵的回收率均在85%～105%范围内，RSD值均小于10%（如表3所示），满足分析检测要求，表明该方法准确可靠。

3 小结

本文建立了采用GC-MSD法快速测定婴幼儿湿巾中3种苯扎氯铵的测试方法。与目前常用的HPLC法相比，采用GC-MSD方法分离效果好，不会造成假阳性结果，检测低限远远低于液相色谱法，并能快速对样品进行准确的定性定量检测。同时，方法的线性关系、回收率及其精密度等各项参数表明，方法的灵敏度、分离度和准确度均能满足样品检测的需要。

参考文献：

[1] 夏源，吴义香. HPLC法测定氟康唑滴眼液中苯扎氯铵的含量[J]. 安徽医药，2010，（5）：539-540.

[2] 刘艳琴，王浩，杨红梅，等. 高效液相色谱法同时测定化妆品中的3种苯扎氯铵同系物[J]. 色谱，2011，29（5）：458-461.

[3] 叶妙华. 苯扎氯铵两种HPLC方法的比较与选择[J]. 亚太传统医药，2010，6（6）：23-25.

[4] GB/T 30931—2014 化妆品中苯扎氯铵含量的测定高效液相色谱法[S].

[5] 黄银波，李兴根，乔勇升，等. 高效液相色谱法测定消毒湿巾中苯扎氯铵的含量[J]. 理化检验，2012，48：4-5.

[6] 丁晓静，车宜平，赵海燕，等. 反相高效液相色谱法测定复方化学消毒剂中苯扎氯铵[J]. 分析测试学报，2006，25（6）：63-66.

[7] 赵文英，张青，武智强，等. 苯扎溴铵、苯扎氯铵的液相色谱分析[J]. 分析实验室，2015，34（4）：471-474.

（作者单位：广州市纤维产品检测研究院）