HPLC—CDD法测定以碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量

程沫仁

摘 要：方法：采用羧酸基键合硅胶为填充剂色谱柱，1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）为流动相，非抑制型电导检测器，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。结论：本法简便、准确，可用于碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量测定。

关键词：头孢类产品；含量；测定

碳酸钠是一种易溶于水的白色粉末，溶液呈碱性（能使酚酞溶液变浅红），但分类属于盐，不属于碱。碳酸钠是一种重要的有机化工原料，主要用于医药、造纸、冶金、玻璃、纺织、染料等工业。国际贸易中又名苏打或碱灰，广泛用于生活洗涤、酸类中和以及食品加工等。由于部分头孢类原料难溶于水，需加碳酸钠做助溶剂或pH调节剂。目前测定碳酸钠的方法主要有离子选择电极、酸碱滴定法与电感耦合等离子体原子发射光谱法、原子吸收分光光度法[1-5]。本实验采用高效液相色谱法对碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中的碳酸钠的进行了含量测定。高效液相-电导法和高效液相-蒸发光散射测定结果基本一致。

1仪器与试药

1.1仪器：电子天平FA1004型（南京华欣分析仪器制造有限公司）；721可见光分光光度计（四川赛恩思仪器有限公司）；LU230四元低压梯度液相色谱分析系统（大连依利特分析仪器有限公司）；CO-Ⅳ色谱柱温箱（恒温柱箱）（天津琛航科苑科技发展有限公司）；MPC-K6s 加热制冷型恒温水浴油浴（北京赛美思仪器设备有限公司）；Genser大型旋转蒸发仪（北京赛美思仪器设备有限公司）；TH-UP实验室专用高纯水机（滕州市滕海分析仪器有限公司）；ILMVAC真空泵--德国伊尔姆抗化学腐蚀隔膜泵（上海泰坦科技股份有限公司）；BILON-1000C多用途恒温超声提取机（上海比朗仪器制造有限公司） ；JASCO V-7000系列紫外可见近红外分光光度计（沈阳佳士科商贸有限公司）；Waters VanGuard保护柱（沃特世科技（上海）有限公司）。

1.2色谱柱：羧酸基键合硅胶为填充剂色谱柱。

1.3对照品：碳酸钠购自中国药品生物制品检定所。

1.4试剂：甲醇（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、乙腈（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、冰醋酸（青岛雅各化学试剂销售有限公司）、磷酸二氢钠（杭州萧山创益化工仪器有限公司）、三乙胺（济南汇丰达化工有限公司）、氢氧化钾（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、磷酸（杭州萧山创益化工仪器有限公司）、硝酸（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、吡啶二羧酸（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）。

1.5试药：注射用盐酸头孢甲肟、注射用硫酸头孢匹罗、注射用头孢他啶、注射用盐酸头孢替安、注射用头孢匹胺。

2测定方法确定

2.1色谱条件

依據查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16），非抑制型电导检测器，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。

2.2对照品溶液的制备

精密称取氯化钠对照品适量，置容量瓶中，加流动相溶解稀释，即得。

2.3供试品溶液的制备

注射用盐酸头孢甲肟、注射用硫酸头孢匹罗、注射用头孢他啶、注射用盐酸头孢替安、注射用头孢匹胺适量，精密称取，加5毫升流动相，超声2分钟，过滤，滤液转移至10毫升容量瓶内，流动相定容，即得。

2.4专属性试验

分别盐酸头孢甲肟、硫酸头孢匹罗、头孢他啶、盐酸头孢替安、头孢匹胺原料制成阴性样品，依上述方法测定，结果在碳酸钠出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

2.5对照品的线性考察

精密称取氯化钠对照品，分别配置浓度为0.01微克/毫升、0.015微克/毫升、0.03微克/毫升、0.035微克/毫升0.04微克/毫升、0.045微克/毫升、0.05微克/毫升、0.055微克/毫升、0.06微克/毫升溶液。分别按照实验条件测定，记录色谱峰。以钠离子峰面积峰面积（Y）为纵坐标，钠离子浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，钠离子呈良好的线性关系。

2.6准确度试验

精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的碳酸钠对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.1%，RSD=0.93%。结果表明此方法的回收率良好。

2.7与高效液相-蒸发光散射检测法对比

以0.02mol·L-1醋酸铵溶液（用冰醋酸调节pH至4.8）-乙腈（70：30）为流动相，流速为1.5mL·min-1，蒸发光散射检测，检测器温度：40℃，雾化气体（空气）压力：0.35 MPa。

3结论

分别考察乙腈-0.1%冰醋酸（27：73），乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液 （pH 6.5）（36：64），磷酸盐缓冲液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），乙腈-0.2%（质量分数）磷酸（体积比25：75），甲醇-0.1%磷酸溶液（30：70）；甲醇-0.2%磷酸溶液（40：60），甲醇-异丙醇-乙腈（37∶61∶2）；0.05 mol.L-1磷酸盐缓冲液-乙腈（体积比为50∶50），0.2%三乙胺溶液（用磷酸调p H至5.3）-乙腈（65∶35），1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）不同比例的流动相，结果以1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）为流动相。本实验表明此方法可用于碳酸钠为助溶剂的头孢类产品中碳酸钠的含量测定。高效液相-电导法和高效液相-蒸发光散射测定结果基本一致。

参考文献：

[1]刘英，戴红，王巨才，胡昌勤.离子选择电极测定注射用头孢他啶中碳酸钠的含量[J].中国抗生素杂志.2001（05）

[2]姚小红，张涤，柳莉，汪新，张湘英.用电位滴定法测定工业用氢氧化钠中氢氧化钠和碳酸钠的含量[J].现代科学仪器. 2006（04）

[3]晏菊姣，付丽娟.离子色谱法测定注射用头孢他啶中碳酸钠的含量[J].药物分析杂志.2010（07）

[4段旭川.]酸碱滴定法与电感耦合等离子体原子发射光谱法联合测定混合碱中碳酸钠和碳酸氢钠[J].冶金分析.2009（09）

[5]张冬，赫晓军，苑华，付焱.原子吸收分光光度法测定注射用头孢他啶中助溶剂碳酸钠的含量[J].中国药房. 2011（05）