头孢拉定的结晶工艺过程及影响结晶的因素探析

程忠宇

摘 要：头孢拉定为第一代半合成头孢菌素，抗菌作用与头孢氨苄相似。头孢拉定耐酸可以口服，吸收好，血药浓度较高。头孢拉定适用于敏感菌所致的急性咽炎、扁桃体炎、中耳炎、支气管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮肤软组织感染等。本文对头孢拉定的结晶工艺过程及影响结晶的因素进行分析。

关键词：头孢拉定；结晶；工艺

头孢拉定（Cephradine， Velosef）别名：头孢握定、头孢雷定、己环胺菌素、先锋瑞丁、头孢拉丁、头孢环己烯等。头孢拉定为第一代半合成头孢菌素，抗菌作用与头孢氨苄相似。头孢拉定耐酸可以口服，吸收好，血药浓度较高。头孢拉定适用于敏感菌所致的急性咽炎、扁桃体炎、中耳炎、支气管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮肤软组织感染等[1-2]。结晶方法一般为两种，一种是蒸发结晶，一种是降温结晶。降温结晶的原理是温度降低，物质的溶解度减小，溶液达到饱和了，多余的即不能溶解的溶质就会析出[3-4]。头孢拉定的结晶过程属于降温结晶。本文对头孢拉定的结晶工艺过程及影响结晶的因素进行分析。

1 仪器与试药

STI-501Plus梯度高效液相色谱仪（赛智科技（杭州）有限公司）；CC-304Bvpc单加热型高温不锈钢槽（北京赛美思仪器设备有限公司）；日本岛津AUW220电子天平、分析天平（福州精科仪器仪表有限公司）；RT2加热制冷循环器 （惟沃技术（中国）有限公司）；屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；必能信超声波清洗器-CPX2800-C（必能信超声（上海）有限公司）；HQ-50高端试剂级超纯水机（郑州华新电气公司）。头孢拉定对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（上海杰星生物科技有限公司）、三乙胺（邹平县天鹿化工有限公司）、甲醇（上海杰星生物科技有限公司）、醋酸钠（上海业坦化工科技有限公司）、盐酸（邹平县天鹿化工有限公司）、氨水（邹平县天鹿化工有限公司）、醋酸（邹平县天鹿化工有限公司）、氢氧化钠（邹平县天鹿化工有限公司）、硝酸（邹平县天鹿化工有限公司）、硫酸（邹平县天鹿化工有限公司）。

2 实验

2.1 结晶体系的选择

分别选择盐酸-氨水、盐酸-三乙胺、盐酸-氢氧化钠、硝酸-三乙胺、硫酸-三乙胺为结晶体系。结果表明采用盐酸-三乙胺结晶体系时头孢拉定收率最高。

2.2 结晶初始温度的选择

分别选择32摄氏度、30摄氏度、28摄氏度、26摄氏度、24摄氏度、22摄氏度为结晶初始温度。结果表明选择28摄氏度头孢拉定收率最高。

2.3 结晶结束温度的选择

分别选择12摄氏度、10摄氏度、8摄氏度、6摄氏度、4摄氏度、2摄氏度为结晶结束温度。结果表明选择6摄氏度头孢拉定收率最高。

2.4 最佳结晶条件

最佳结晶条件为：采用盐酸-三乙胺结晶体系，结晶初始温度为28摄氏度，结晶结束温度为6摄氏度。

3 含量测定方法

3.1 色谱条件：分别考察水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6），水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（1500：400：40：1），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至2.0）（30：70），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（40：60）不同比例的流动相，结果以水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6）为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按头孢拉定峰计算应不得低于2000。

3.2 供试品溶液的制备

取样品，精密称取，加20毫升流动相超声处理10分钟，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用流动相分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加流动相溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.3 对照品溶液的制备

精密称取头孢拉定对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含100μg的溶液，作为对照溶液。

3.4 准曲线的制备

制备浓度为50、100、150、200、250、300、350、400、450、500μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）為横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，头孢拉定对照品在50～500μg·mL-1范围内线性关系良好。

3.5 精密度试验

依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取头孢拉定对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.71%。结果表明，本实验精密度良好。

3.6 回收率试验

采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的头孢拉定对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.1%，RSD为0.96%。

4 讨论

在化学里面，热的饱和溶液冷却后，溶质以晶体的形式析出，这一过程叫结晶。实验过程发现温度高于30摄氏度时溶液颜色会变深，可能是因为温度升高产生副反应造成的。说明温度高于30摄氏度以后溶液的杂质会增加。实验过程温度要控制在30摄氏度一下。最佳结晶条件为：采用盐酸-三乙胺结晶体系，结晶初始温度为28摄氏度，结晶结束温度为6摄氏度。

参考文献

[1]孙惠娟，裴保香，郭代红.2003-2007年医院头孢菌素类药物应用分析[J].中华医院感染学杂志，2008（12）.

[2]吕塔星，陈峰涛，裘志梅.头孢拉定的药理及临床应用[J].黑龙江医药，2000（03）.

[3]杨芗钰，钱刚，张相洋，段学志，周兴贵.溶剂和杂质对三水乳酸锌晶体生长形貌的影响（英文）[J].Chinese Journal of Chemical Engineering，2014（02）.

[4]赵茜，高大维，陈永泉，李秉滔.红霉素溶析结晶过程中原溶剂对其晶习及纯度的影响研究[J].中国抗生素杂志，1999（06）.

[5]付丽娟，江江.柱前衍生HPLC法同时测定注射用头孢拉定原料中的3种成分[J].药物分析杂志，2001（02）.