气相色谱法测定食品中甜蜜素方法的探究

都丽莉 易楠

甜蜜素是一种较为常见的水溶性人工甜味剂，其专业名称为“环已基氨基磺酸钠”。《GB2760- 2014食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中对甜蜜素的使用量有着严格规定，采取科学方法对食品中甜蜜素进行准确测定至关重要。

应用气相色谱法能够准确、快速对食品中的甜蜜素含量进行测定，甜蜜素含量在0.25-4.00mg之间呈较好线性关系。本文就高油脂含量食品中甜蜜素测定方法展开具体讨论。

试验原理

富含油脂食品通过石油醚有效去除油脂，溶于水对样品中环已基氨基磺酸钠进行获取；经过亚铁氰化钾、硫酸锌进行沉淀，处于硫酸介质中环已基氨基磺酸钠与亚硝酸产生虎穴发生，形成环乙醇亚硝酸酯、环乙醇；选择气相色谱氢火焰离子化验检测器完成分离。

试验材料与方法

试验仪器：Aglient7890A型气象色谱仪、旋涡混合器、冷冻离心机。试剂：环已基氨基环酸钠标准品，含量>98.0%石油醚，沸程30- 60℃亚硝酸钠溶液，50g/L硫酸溶液，100g/L亚铁氰化钾溶液，150g/L硫酸锌溶液，300g/L正己烷（色谱纯）氯化钠（分析纯）。试验前应保证试验条件满足气相色谱法应用基本环境及需要：色谱柱HP- 5，汽化室温度应保持200℃；程序升温条件为：50℃持续1min，20℃升温至100℃，40℃升温至200℃，并持续1min；检测器温度为230℃。

准确量取0.5612g环已基氨基磺酸钠，采用水溶解其达到100mL，调配完成5mg/mL的标准溶液。

样品处理 准确量取5.00g样品并进行剪碎处理，将其置于150mL三角瓶中，并加入25mL石油醚进行振荡，有效提取两次后除去石油醚。氮吹出去除剩余石油醚，加入水超声提取并将亚铁氰化钾溶液、硫酸锌溶液各2mL加入，振荡混合后过滤定容50mL备用。将20mL溶液置于比色管中（100mL比色管，带盖），并将其放置于冰浴中。其他样品操作过程与标准溶液制备处理过程相同。

标准曲线制备 准确吸取 0.25、0.50、1.00、2.00m L 和 4.00mL 标准溶液于 100m L 带塞比色管中，各加水20m L，置于冰浴中 5min 后，依次加入 5m L 100g/L 硫酸溶液和5m L 50g/L 亚硝酸钠溶液，混匀，并在冰浴中放置 30min（需经常摇动），然后加入 5m L 正己烷、5g 氯化钠，振荡提取，静置分层后，吸取正己烷层于 10m L 带塞离心管中离心分离，待进样分析。

結果与讨论

实验中采用毛细管柱为分析柱，其峰型良好，通过标准谱图可知在HP- 5色谱柱反应下有两个产物，分别为环乙醇亚硝酸酯和环已醇，出峰时间为4.930、5.123min。将环乙醇亚硝酸酯与环已醇两峰之间的面积和作为纵坐标，其横坐标为浓度，进行标准曲线绘制。

试验结果显示，食品中环已基氨基磺酸钠含量在0.25- 4.00mg/mL之间呈现良好线性关系，相关系数r为0.9987，回归方程为：y=416.0x- 12.5

准确量取五份平行样，进行上述实验，测得RSD%=1.6。对已知含量样品进行方法回收率试验，通过添加标准浓度水平溶液，测定其加标回收率为87.0%，其具体结果如下所示。

本次试验针对油脂含量较高食品中甜蜜素进行测定分析，采用HP- 5毛细管柱，对色谱条件进行了调整，前处理对样品进行除脂、沉淀，再通过振荡进行上清液衍生化反应，这些优化有效降低了衍生乳化反映，能够更准确、简单的对食品中的环已基氨基磺酸钠进行检测。试验中要保证试验冰浴温度，注意对提取液进行保存冷藏，试验结果可靠，是食品检测中对环已基氨基磺酸钠测定的较理想方法。