某地区孕妇B族链球菌荧光PCR检测结果分析

刘强 刘小容 罗小平 唐晓雨 李会兰 詹成林 廖凌燕 税开毅

【摘要】目的：探討某地区孕妇B族链球菌（group B streptococcus，GBS）定植率及其对妊娠结果与新生儿健康的影响。方法：选取2022年1月—2022年6月某地区（四县一区）到医院产检的1596例孕妇作为研究对象，分别取肛门拭子和阴道拭子进行荧光PCR检测，统计分析GBS定植率，并比较GBS阳性组与GBS阴性组妊娠结果与新生儿健康情况的差异。结果：某地区产检孕妇GBS综合定植率为19.4%，阴道拭子与肛门拭子定植率分别为15.2%与16.2%；GBS阳性组与GBS阴性组孕妇的宫内感染的发生率分别为19.4%与4.4%，组间差异比较有统计学意义（P<0.05）；GBS阳性组与GBS阴性组新生儿感染发生率分别为37.7%与5.8%，组间差异比较有统计学意义（P<0.05）；GBS阳性组与GBS阴性组新生儿缺氧发生率分别为41.6%与4.0%，组间差异比较有统计学意义（P<0.05）。结论：该地区GBS定植率整体高于国内平均水平，GBS阳性孕妇的宫内感染发生概率更高，新生儿感染及新生儿缺氧发生率更高，提示产科医生对GBS阳性孕妇及其新生儿需格外关注。

【关键词】B族链球菌；聚合酶链式反应；定植率；妊娠结果；新生儿

基金项目：宜宾市科技局2021年度科技项目《基于核酸检测（PCR—荧光探针法）对宜宾地区围产期孕妇B族链球菌（GBS）感染状况的调查研究》（2021SF005）的阶段性成果

Analysis of fluorescent PCR detection results of group Bstreptococcus in pregnant women in some area

LIU Qiang1， LIU Xiaorong1， LUO Xiaoping1， TANG Xiaoyu1， LI Huilan1， ZHAN Chenglin1， LIAO Lingyan1， SHUI Kaiyi2 1.Changning County Peoples Hospital， Changning， Sichuan 644300， China； 2.Yibin Fifth Peoples Hospital， Nanxi， Sichuan 644100， China

【Abstract】Objective：To investigate the colonization rate of group B streptococcus （GBS） in pregnant women in a certain area and its impact on pregnancy outcomes and neonatal health.Methods：From January 2022 to June 2022，1596 pregnant women who went to a hospital for prenatal examination in a certain area （four counties and one district） were selected as the research subjects.Anal swabs and vaginal swabs were taken for fluorescent PCR detection，and the GBS colonization rate was statistically analyzed.The differences in pregnancy outcomes and newborn health status between the GBS positive group and the GBS negative group were compared.Results：The comprehensive colonization rate of GBS in pregnant women undergoing prenatal examination in a certain area was 19.4%，and the colonization rates of vaginal swabs and anal swabs were 15.2% and 16.2%，respectively；The incidence of intrauterine infections in pregnant women in the GBS positive group and the GBS negative group was 19.4% and 4.4%，respectively，with a statistically significant difference between the groups（P<0.05）；The incidence of neonatal infection in the GBS positive group and the GBS negative group was 37.7% and 5.8%，respectively，with a statistically significant difference between the groups（P<0.05）；The incidence of neonatal hypoxia in the GBS positive group and the GBS negative group was 41.6% and 4.0%，respectively，with a statistically significant difference between the groups（P<0.05）.Conclusion：The overall GBS colonization rate in this region is higher than that in the domestic average level.The incidence of intrauterine infection among GBS positive pregnant women is higher，and the incidence of neonatal infection and neonatal hypoxia is higher. This suggests that obstetricians should pay special attention to GBS positive pregnant women and their newborns.

【Key Words】GBS； PCR； Colonization rate； Pregnancy outcomes； Newborn

B族链球菌是健康女性肠道和阴道生理菌群的一部分，母体定植是GBS传播的主要途径。目前，已识别的血清型多达10个[1]，不会因怀孕而降低感染率，在新生儿感染后可能导致严重的后遗症，早发性GBS感染会导致更高概率的新生儿发病和死亡[2]。在新生儿中，大多数早发性GBS疾病是由于母亲通过上升感染或在阴道分娩过程中传播而发生的，部分出现新生儿早产、产后出血及严重的宫内感染等情况。近年来，我国GBS感染定植率呈现逐年上升趋势，国内不同地方孕妇GBS定植率存在较大差异，其受社会经济水平、种族、地区、检测方法等诸多因素的影响，其中检测方法的差异是导致最终定植率的差异的主要原因之一[3]。本研究采用荧光聚合酶链式反应（PCR）法調查某地区1596例孕妇GBS感染情况，旨在探讨某地区孕妇GBS定植率及其对妊娠结果与新生儿健康的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取某地区（四县一区）2022年1月—2022年6月到医院产检的1596例孕妇作为研究对象，孕妇近2周内未使用抗菌药物、无性生活，签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 采样方法：使用无菌盐水擦拭清洗外阴，在孕妇阴道下1/3处用无菌棉拭子轻轻旋转1圈取分泌物，放入无菌试管，即为阴道拭子。将另一根无菌棉拭子轻轻插入孕妇的肛门直肠2 ～ 3cm处轻轻旋转1圈，放入无菌试管，即为肛门拭子。取同一根拭子，按上述方法先进行阴道分泌物取样，再将该拭子进行肛门取样，即为阴道肛门混合拭子[4]。

1.2.2 检测方法：采用荧光PCR法检测样本中的GBS：在阴道拭子和肛拭子样本中加入1mL缓冲液后离心，并将沉淀物重悬，加入核酸提取剂反应15min后离心10min，取上清液进行荧光PCR检测。荧光定量PCR试剂盒由博尔诚（北京）科技有限公司提供，具体反应程序为：95℃/3min预变性，95℃/5s变性，60℃/30s退火，72℃/30s延伸，共计40个循环。专业人员利用荧光PCR仪及其软件进行自动分析检测，反应CT值≤38.0为阳性，CT值>38且<40的样本重新上机检测，重测结果CT值<40为阳性，其余结果为阴性。

1.3 统计学分析

采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行x2检验，计量资料采用（x±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同标本类型GBS检出情况与影响因素

1596例孕妇中检测出GBS阳性310例，定植率为19.4%。肛门拭子单独检出阳性数为258例，定植率16.2%；阴道拭子单独检出阳性数为242例，定植率15.2%；阴道肛门混合拭子检出阳性190例，定植率为11.9%。其他如孕妇年龄、孕周及妊娠次数等因素对定植率也会产生一定的影响。见表1。

2.2 GBS阳性组与GBS阴性组妊娠情况比较

GBS阳性组孕妇的宫内感染发生率明显高于GBS阴性组（P<0.05）。GBS阴性组与GBS阳性组孕妇在产后出血及剖宫产发生率方面比较无统计学差异（P>0.05）。见表2。

2.3 GBS阳性组与GBS阴性组新生儿健康情况比较

GBS阳性组新生儿死亡率为0.0%，新生儿感染发生率为37.7%，新生儿缺氧发生率为41.6%，早产率为1.3%；GBS阴性组新生儿死亡率为0.0%，新生儿感染发生率为5.8%，新生儿缺氧发生率为4.0%，早产率为3.2%。GBS阳性组新生儿感染率与新生儿缺氧率更高，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

GBS是造成新生儿以及孕妇严重感染的重要原因之一，GBS定植在胃肠道和生殖泌尿系统，导致孕产妇发病率显著升高，分娩期间由母体通过上升途径传播，造成新生儿出现严重的侵袭性疾病。通过产前GBS的筛查极大程度降低新生儿GBS感染的风险[5]。国内不同地区孕妇的GBS带菌存在不同，各地需结合当地具体情况具体分析，制定措施。

GBS定植率侧面反应地区医疗水平高低，全球孕妇GBS定植率在10%～35%之间，总体定植率为18%，发达地区普遍较低[6]。但也有部分地区，如加勒比地区和非洲孕妇的定植率偏高，在20%～35%之间，而南亚和东亚孕妇GBS的感染率较低，分别为12.5%和11%，其中国内孕妇GBS的定植率约为11%[7]，而本文研究的该地区GBS定植率明显高于国内平均水平，进一步说明该地区GBS定植率水平仍有较大的治理空间。

采用阴道拭子和肛门拭子分别对同一孕妇进行检测，阴道拭子或肛门拭子任意一项检查为阳性即认定为GBS阳性，从而更好地避免GBS漏检。GBS定植可导致产妇及新生儿出现各种不同类型及程度的感染，如造成孕妇的早产、膀胱炎、膜腔感染、菌血症等，新生儿窒息死亡、各种炎症及后遗症。本研究中，产妇出现的不良结局包括产后出血、宫内感染、剖宫产、产褥感染等。

根据国内外筛查报道，不同地区GBS携带率差异非常大，而筛查方法是造成这种差异的主要因素之一。虽然培养法为美国疾控中心推荐的检测GBS的“金标准”，但是相关文献研究结果表明，PCR已被证明可以与培养法相媲美，建议孕妇在分娩开始时对GBS感染进行PCR检测。虽然通过PCR检测普遍获得GBS筛查将导致医疗机构的额外费用，但它将识别出真正需要在分娩时进行抗生素预防的女性，通过减少对妇女的不必要治疗、减少抗药性、避免不必要的新生儿监测和干预以及在关键的结合期将婴儿与母亲不必要地分开，可以进一步证明增加的支出是科学合理的。另有研究表明，PCR检测的灵敏度为86.28%～100%，特异度为91.26%～99.70%，对所有足月胎膜长期破裂的临产妇女和妊娠35～36周的临产妇女进行PCR检测取得满意效果[8]。本文研究表明，PCR检测准确率达到94.2%，与相关文献数据基本吻合。

综上所述，该地区GBS定植率整体高于国内平均水平，GBS阳性孕妇的宫内感染发生概率更高，新生儿感染及新生儿缺氧发生率更高，提示产科医生对GBS阳性孕妇及其新生儿需格外关注。

参考文献

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