不同煎煮时间对大黄总蒽醌类含量的影响

成祥

【摘 要】目的：探讨不同煎煮时间对大黄总蒽醌类含量的影响。方法：选择醋酸镁染色紫外分光光度法测定大黄蒽醌类组分含量，分析大黄在临床使用中合理的煎煮时间，以最大限度提高大黄总蒽醌类含量。结果：游离蒽醌在煎煮60min时含量最高（1.479mg），在煎煮10min是含量最低（0.881mg）；结合蒽醌在煎煮15min～30min时含量最高（1.283mg～1.320mg），在煎煮120min时含量最低（0.710mg）；总蒽醌在煎煮30min时含量最高（2.520mg），在煎煮10min时含量最低（1.973mg）。结论：临床在煎煮大黄时若用于清热泻火则煎煮60min以最大限度提高游离蒽醌含量，用于泻下则煎煮30min即可以提高结合蒽醌含量，避免久煎以降低治疗效果。

【关键词】煎煮时间；大黄；蒽醌类含量

Effects of Different Decocting Time on the content of total anthraquinones in Rhubarb

CHENG Xiang

Huantai Hospital of traditional Chinese Medicine， Zibo， Shandong 256400， China

【Abstract】Objective： To investigate the effect of Different Decocting Time on the content of total anthraquinones in rhubarb. Methods： The content of anthraquinones in rhubarb was determined by magnesium acetate staining UV spectrophotometry， and the reasonable decocting time of Rhubarb in clinical use was analyzed to maximize the content of total anthraquinones in rhubarb. Results： The content of free anthraquinone was the highest （1.479mg） at 60min and the lowest （0.881mg） at 10min； the content of bound anthraquinone was the highest （1.283mg～1.320mg） at 15min～30min and the lowest （0.710mg） at 120min； the content of Total Anthraquinone was the highest （2.520mg） at 30min and the lowest（1.973mg） at 10min. Conclusions： When decocting Rhubarb in clinic， if it is used to clear away heat and fire， decoct it for 60min to maximize the content of free anthraquinone， and decoct it for 30min to reduce the therapeutic effect.

【Key？Words】Decocting time； chinese rhubarb； Anthraquinone content

大黄是临床上常见的一种中药材，性苦寒，归胃经、大肠经、肝经、脾经，具有活血化瘀、清热泻火、清泄湿热、泻下攻积、泻火解毒的作用，常被临床广泛应用于瘀血证、热结便秘、热毒疮疡、热结胸痞、湿热泻痢、淋病、小便不利、咽喉肿痛、胃热呕吐、症瘕积聚、烫伤等多种疾病的治疗[1]。蒽醌类是大黄的主要成分，极易在水中溶出，以游离蒽醌与结合蒽醌的形式存在，其中结合蒽醌通过水解或代谢可转化为游离蒽醌及糖类。游离蒽醌与清热泻火功效相对应，抗菌活性显著，结合蒽醌与泻下功效相对应[2]。有研究表明，大黄的煎煮时间与蒽醌的含量有一定关系[3]，为此本研究选择醋酸镁染色紫外分光光度法测定大黄蒽醌类组分含量，探討不同煎煮时间对大黄总蒽醌类含量的影响，现进行如下报道。

1.1 仪器设备

UV1780紫外/可见分光光度计、BP211D万分之一电子天平、R501旋转蒸发器、SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵、DL-360超声波清洗机、电热恒温鼓风干燥箱。

1.2 试剂试药

取大黄的干燥根及根茎，大黄素，甲醇、醋酸镁、冰醋酸、重蒸水、浓盐酸。

1.3 方法

精密称定12.5mg大黄素对照品，取适量甲醇溶解后置入50mL容量瓶内，加甲醇至刻度，配制标准品溶液。选择510nm为测定波长，精密量取0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2mL大黄素对照品溶液并置于蒸发皿中挥干，采用1%醋酸镁甲醇溶液洗脱，测定吸光度，绘制标准曲线，得回归方程：y=3.001x+0.0212，R=0.999，n=3。精密称取0.2g大黄粉末，加40mL蒸馏水至于水浴加热回流1h，滤纸滤出，滤出液用于测定游离蒽醌与结合蒽醌。（1）测定游离蒽醌：取10mL上述滤液，采用氯仿40mL分次萃取，之后再用5%NaOH～2%NH4OH混合液100mL分次萃取，洗涤后过滤，滤液加热4min后冷却至室温，用混合碱液调整至100mL，30min后于510nm处比色，计算游离蒽醌含量。（2）测定总蒽醌：取上述滤液0.2ml×3，分别放置在具有刻度的试管内（规格15mL），加入40%的FeCI3，加入水溶液0.5mL，经水浴加热20min后加入0.2mL的HCL，再次水浴加热30min，同时振摇。完成以上操作后使用流水冷却试液至室温，将其倒入分液漏斗内，加入2次乙醚，每次5.0mL，进行萃取处理，再用5%NaOH至2%NH4OH混合碱液进行2次萃取，分别为5.0mL与3.0mL，过滤后观察波长为535nm处的吸收度，算出百分含量。（3）测定结合蒽醌：取10mL上述滤液，加入10mL醋酸镁与20mL氯仿水浴继续回流2h，冷却后分出氯仿液再用30mL氯仿分次提取，之后再用5%NaOH～2%NH4OH混合液100mL分次萃取，合并提取液并过滤，冷却至室温，用混合碱液调整至100mL，30min后于510nm处比色，计算总蒽醌含量，结合蒽醌=总蒽醌-游离蒽醌。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

游离蒽醌在煎煮60min时含量最高（1.479mg），在煎煮10min是含量最低（0.881mg）；结合蒽醌在煎煮15min～30min时含量最高（1.283mg～1.320mg），在煎煮120min时含量最低（0.710mg）；总蒽醌在煎煮30min时含量最高（2.520mg），在煎煮10min时含量最低（1.973mg），见表1。

大黄是常用的一种中药材，其治疗作用包括凉血解毒、清热泻火、利湿退黄和泻下攻积等，多通过不同炮制品方式进行疾病治疗。现代药理证实，大黄的抗菌、保肝、止血与利胆作用较佳，且能有效对抗肿瘤，可作为肿瘤患者的基础藥物[4]。大黄具有生殖毒性与肝肾毒性，且生大黄的毒性最强，需要合理确定其煎煮时间，发挥减毒增效等效用。蒽醌类成分在大黄中的含量比较高，是其最主要的成分，可以用作大黄药材质量的评价指标，也是大黄发挥药理作用的化学物质之一。为此，在大黄煎煮过程中需要分析蒽醌类的含量变化，总结不同煎煮时间下，蒽醌类含量的具体变化特点，确定大黄蒽醌类含量最高时的煎煮时间，筛选最佳的煎煮时间，进而合理指导大黄的临床使用，确保其能够充分发挥其药效[5]。

大黄以汤剂入药，其煎煮时间的长短常会影响有效成分含量，在本研究中结合蒽醌在煎煮30min时含量最高（1.320mg），在之后60min内大幅下降之后趋于平稳，30min后随着煎煮时间的延长游离蒽醌含量增加，在煎煮60min时含量最高（1.479mg），结合蒽醌水解为游离蒽醌速度加快，从大黄水煎液结合蒽醌的含量变化趋势可得出要发挥泻下作用煎煮时间应控制在30min内，要发挥清热泻火功效可适当延长煎煮时间，以1h为宜[6]。大黄水煎过程中蒽醌类成分水解过程早期随着煎煮时间的改变主要经历溶出期（主要为结合蒽醌），30min后随着煎煮时间的改变主要经历水解代谢期（主要为游离蒽醌），该溶出与分解平衡常受水环境、煎煮时间、温度等因素的影响，因此除了加强煎煮时间对药物的影响外，还需控制其他物理因素，最大限度保证药物功效[7]。

综上所述，在煎煮大黄时若用于清热泻火则煎煮60min以最大限度提高游离蒽醌含量，用于泻下则煎煮30min即可以提高结合蒽醌含量，避免久煎以降低治疗效果。

参考文献

[1] 房庆伟，王海彬，苟家保，等.经典烘干工艺对大黄中总蒽醌含量的影响[J].上海中医药大学学报，2018，32（3）：92-96.

[2] 卞理，窦志华，王丹丹，等.《中华人民共和国药典》大黄总蒽醌含量测定方法的改进[J].国际中医中药杂志，2021，43（2）：156-160.

[3] 魏江存，陈勇，谢臻，等.紫外-可见分光光度法测定生大黄和醋大黄的总蒽醌含量[J].井冈山大学学报（自然科学版），2017，38（6）：88-92.

[4] 大黄不同炮制品煎煮时间对5种蒽醌类化合物含量影响[J].时珍国医国药，2020，31（4）：867-870.

[5] 刘刚彦，叶强，余葱葱，等.煎煮时间对大黄蒽醌类成分的影响研究[J].陕西中医学院学报，2016，34（2）：79-81.

[6] 武印奇，杨大宇，郭玉岩，等.大黄不同煎煮时间对大柴胡汤中蒽醌类成分和鞣质含量的影响[J].时珍国医国药，2020，31（10）：2375-2378.

[7] 王永超，厉梦华，尹晓华.比较大黄浸渍和煎煮两种不同提取方法过程中蒽醌类成分的含量变化[J].内蒙古医学杂志，2017，49（11）：1283-1285.