血清NPY水平与子宫内膜异位症患者疼痛及焦虑、抑郁的相关性

章永平

[摘要] 目的 分析、探討血清神经肽Y（NPY）表达水平与子宫内膜异位症（EMS）患者疼痛、焦虑和抑郁症状的相关性。方法 采集2018年1月至2020年12月江西省人民医院病理诊断为子宫内膜异位症患者108例的血清标本和健康对照者102例的血清标本，通过酶联免疫吸附试验（Elisa法）检测血清NPY在研究组和对照组以及研究组不同疼痛程度组间的表达，同时探讨血清NPY与EMS患者焦虑、抑郁的关系。结果 血清NPY在对照组中表达水平为（95.13±11.04）pg/ml，在研究组中表达水平为（147.80±21.83）pg/ml，差异有统计学意义（P<0.05）;EMS患者疼痛程度越强，血清NPY水平越高，疼痛亚组间两两比较，差异均有统计学意义（P<0.05）;EMS疼痛伴焦虑、抑郁者与对照组相比，血清NPY表达低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 血清NPY在EMS患者中高表达，其水平与EMS患者疼痛程度正相关，与EMS疼痛患者焦虑、抑郁程度负相关，表明NPY可能参与EMS的发病机制，其表达与EMS机体的情感障碍、应激状态密切相关。

[关键词] 神经肽Y;子宫内膜异位症;疼痛;焦虑;抑郁

[中图分类号] R711.71          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2022）07-0051-04

Correlation between serum NPY level and pain， anxiety and depression in patients with endometriosis

ZHANG Yongping

Department of Gynecology， Jiangxi Provincial People′s Hospital， the First Affiliated Hospital of Nanchang Medical College，Nanchang  330006， China

[Abstract] Objective To analyze the association between serum neuropeptide Y （NPY） expression and pain， anxiety， and depression in patients with endometriosis （EMS）. Methods Serum samples were collected from 108 patients with pathologically diagnosed endometriosis and 102 healthy subjects in Jiangxi Provincial People’s Hospital from January 2018 to December 2020. The enzyme linked immunosorbent assay （Elisa） method was used to detect the expression of serum NPY in the study group， the control group and the groups with different pain levels in the study group， and the relationship between serum NPY and anxiety and depression of patients in the study group was analyzed. Results The expression level of serum NPY was [95.13±11.04]pg/ml in the control group and [147.80±21.83]pg/ml in the study group， with a statistically significant difference （P<0.05）. The more severe the pain was in EMS patients， the higher the serum NPY level was， and statistically significant differences were observed between the pain subgroups （P<0.05）. The expression of serum NPY in patients with EMS pain accompanied by anxiety and depression was lower， with a statistically significant difference （P<0.05）. Conclusion Serum NPY is highly expressed in EMS patients， and its level is positively correlated with the degree of pain in EMS patients， but negatively correlated with anxiety and depression in EMS patients， suggesting that NPY may be involved in the occurrence and development of endometriosis， and its expression is closely related to the stress state of the body with endometriosis.

[Key words]Neuropeptide Y （NPY）; Endometriosis （EMS）; Pain; Anxiety; Depression

子宫内膜异位症（endometriosis，EMS）是妇科常见病，多见于生育期女性，但其发生、发展机制仍不为世人所熟知。疼痛症状是折磨患者的头号慢性杀手，因此EMS相关疼痛成为临床研究亟待解决的问题。众所周知，慢性疼痛疾病患者往往伴随着心理障碍，因此，EMS患者经历漫长的疼痛过程常伴有不同程度的心理障碍，临床亦急需在解决子宫内膜异位症疼痛的同时，治疗其心理障碍。

肽类神经递质中神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）分布广泛，可存在于机体各大系统的器官交感神经中，机体一旦发生应激反应，如亢奋、紧张等情绪波动，交感神经兴奋将导致去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）释放，NE刺激交感神经立即高效合成NPY并释放入血，NPY调控其相关受体完成机体指令发出的相应生理功能，最终参与机体应激器官的保护功能[1]。NPY在充血性心力衰竭、冠心病、糖尿病、原发性高血压、神经、精神等多系统疾病的发生、发展过程中起到极其重要的作用。本文研究NPY在EMS患者的血清表达水平，以求证实其与EMS疼痛、焦虑、抑郁的相关性，进一步探讨NPY可能参与EMS的疼痛机制与应激机制，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究对象为2018年1月至2020年12月江西省人民医院108例EMS疼痛患者（研究组）及102名健康查体女性（对照组），问卷回收率100%，问卷调查前与患者及健康查体人员详细解释并征得对方自愿同意后签署知情同意书。

问卷调查均在规定时间、场所内完成，由研究组成员协助完成一般情况调查表、简化视觉模拟评分（visual analogue scale，VAS）（Cronbach′s ɑ=0.85）、自评焦虑量表（self-rating anxiety scale，SAS）（Cronbach′s ɑ=0.897）、自评抑郁量表（self-rating depression scale，SDS）（Cronbach′s ɑ=0.788）。根据一般情况调查表，研究组患者与对照组人员在年龄、文化程度（高中以上）、既往有无重大疾病史、心理疾病史比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。

VAS 0分为无痛组、1～3分为轻微痛组、4～6分为中等痛组、≥7分为重度疼痛组;SAS标准阈值设定为40分，40分以上为焦虑[2];SDS标准阈值设定为50分，50分以上为抑郁[3]。

问卷内容、目的及程序均经医院医学伦理委员会审批同意。问卷时长20～30 min，问卷全部真实、有效，结束后立即采集210人肘静脉血5 ml，静置15 min后取血清，放置离心机内2500 r/min离心15 min，移液枪吸取上清液后用eppendorf管封管，标记，冻存于-80℃冰箱中待用。

1.2 方法

NPY Elisa试剂盒由Cloud Clone Corp. USA公司生产（货号CEA879Hu，批号L181012416），实验耗材和仪器分别由江西省人民医院病理实验室、中心实验室和PCR实验室提供。

①碳酸盐缓冲液加入抗体中逐渐稀释，直至蛋白质含量为5 μg/ml左右，聚苯乙烯酶标板（Elisa Plate）96孔每个小孔中均加入100 μl，在恒温冰箱中4℃过夜，第2天吸去孔内溶液，缓冲液冲洗3次。②每孔再加入200 μl封闭液，于37℃恒温箱中孵育2 h后放入洗板机，洗涤3遍。经过生理盐水稀释的100 μl血清上清液样品加至已经过处理的反应孔中，均以标准品孔和空白孔进行比对，然后再以阴性和阳性对照孔比对质控。③封板后再次放入恒溫箱中孵育2 h，洗涤3遍后加入抗体，并在每个孔中加入100 μl抗体稀释液。⑥再次封板后又放入恒温箱中孵育1 h，再次洗涤3遍后，在每个孔中加入100 μl酶反应稀释液。⑦再次封板后放入恒温箱避光孵育30 min，再次洗涤3遍后，恒温箱内避光，在每个孔中加入100 μl TMB底物溶液，标准品孔经底物溶液稀释后出现明显色泽梯度为止。⑧每个反应孔中均加入100 μl 2M硫酸溶液，孔内颜色逐渐由蓝变为黄。10 min内在酶标仪上，450 nm处以空白孔对照调零后，再测各孔OD值进行测定结果并逐一记录。

1.3 观察指标

根据标准品浓度和OD值设定NPY标准曲线作为观察指标，再依据该标准曲线方程分别计算出样本的浓度值，并一一记录。

1.4 统计学方法

应用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，P值均取双侧概率，α值均取0.05为检验水准。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验和F检验，如差异较显著则采用LSD-t检验进行组间两两比较校正，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组和对照组血清NPY水平比较

研究组血清NPY水平表达明显高于对照组（P<0.001），表明NPY可能参与EMS的发病机制。见表2。

2.2 不同疼痛程度的EMS患者血清NPY水平比较

根据VAS将研究组划分为不同疼痛程度的4组（无痛组、轻微痛组、中等痛组、重度疼痛组），其4组间血清NPY水平比较，差异有统计学意义，重度疼痛组表达最高，无痛组表达最低，各组间两两比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.3 研究组与对照组SAS、SDS评分比较，研究组血清NPY在不同焦虑、抑郁程度患者中的表达

研究组SAS评分显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。按照SAS评分划分标准，将研究组划分为无焦虑组（n=49）和焦虑组（n=59），焦虑组与无焦虑组比较，血清NPY表达更低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表5。

研究组SDS评分显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表6。按照SDS评分划分标准，将研究组划分为无抑郁组（n=47）和抑郁组（n=61），抑郁组与无抑郁组比较，血清NPY表达更低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表7。

3 讨论

NPY作为神经肽家族中一员，广泛存在于神经系统，是一种多效性因子，参与机体多项重要的生理功能，如影响细胞增殖、心血管和代谢功能和神经元兴奋性[4]。研究最多、影响最广的表现在以下几个方面：血清NPY水平可以在心肌缺血缺氧或心肌梗死、高血压等状态下起伏明显[5];慢性肾功能衰竭患者血清中NPY表达升高显著[6];血清NPY还对胰岛素分泌起调控作用，参与饮食、生长发育等内分泌的调控[7]。以上均与机体应激状态关系密切。近年血清NPY与神经性疼痛的研究进展迅速，Fu等[8]报道了NPY作用于脊髓NPY Y1受体，抑制脊髓背角细胞内由外周神经损伤诱导，驱动慢性神经性疼痛的感觉和情感成分的信号通路，Sun等[9]研究发现表明，NPY基因可能在神经性疼痛中发挥重要作用，可能将来作为神经性疼痛的治疗靶点。血清中NPY除了血小板释放以外，大多数来源于支配部位的交感神经，交感神经受到外界刺激引起兴奋产生NPY，释放入血，因而NPY血清水平可从侧面反映机体的应激状态。本研究中血清NPY水平随EMS疼痛及疼痛相关的焦虑、抑郁程度而变化，论证NPY与机体的应激状态相关。

近些年较多文献报道NPY与情感、心理的关系密切，NPY系统可能是神经保护或抗抑郁化合物的潜在治疗靶点，尤其是Y2和Y5受体在神经系统疾病和精神疾病如抑郁症中的神经保护作用[10]。动物实验研究证实，海马中NPY低表达的大鼠比正常表达的大鼠更倾向于情绪低落，NPY表达水平与情感障碍密切相关，由此推断NPY低表达基因型人群同样会表现出强烈的负面情绪[11]。但是，当机体长期处于应激状态下，血清NPY水平会逐渐下调，从而出现情感障碍，由此可见血清NPY对机体应激反应起到重要的调控作用[12];研究还发现，NPY也可反作用降低下丘脑的生物学作用，从而反作用调低应激反应[13]。通过蛋白、基因等不同层面的实验方法均证实NPY表达与抑郁程度密切相关[14]。更为有趣的是，焦虑和抑郁患者经治疗症状明显缓解后，血清NPY表达可上调至正常，表明NPY水平与焦虑、抑郁密切相关[15]，由此推断NPY可成为抗抑郁药研究热点。那么NPY通过何种途径起调控作用？有学者研究发现，血清NPY可能通过其受体Y1和/或Y2产生级联效应，起到抗焦虑、抗抑郁和抑制癫痫的作用[16]。内源性NPY能够起到调控机体应激状态，那么外源性NPY是否亦有此功效呢？有研究将NPY注入大鼠海马CA3区后，再注入外源性Y1受体可以起到较明显致抗抑郁作用，而注入外源性Y2受体却可增加抑郁[17]。受此启发，实验证明注射外源性NPY、Y1受体激动剂可明显抗焦虑和（或）抑郁作用，而外源性NPY拮抗剂有明显致焦虑或抑郁的作用[18]。由此可见，NPY通过调节其受体Y1、Y2来调控诸如焦虑、抑郁等情绪应激行为，NPY-Y1通路和NPY-Y2通路可能在应激状态调控过程中分别担任不同的作用[19]。为进一步了解Y1、Y2受体是协同还是拮抗作用，实验人员通过情绪障碍动物模型得到验证，NPY-Y1通路能够明显缓解动物的情绪焦虑和抑郁，而NPY-Y2通路则恰恰相反，由此断定NPY-Y1通路和NPY-Y2通路在情绪调控方面是相反或拮抗作用[20]。当然也存在少数不同观点，认为血清NPY水平并不能真实反映中枢神经系统（CNS）中的NPY水平表达，因而认定其与抑郁焦虑等心理障碍和应激状态无明显相关性[21]，有待于进一步验证。综合以上，大多數文献认定NPY参与机体疼痛机制，参与机体调节焦虑、抑郁心理障碍机制。本研究结论与大多数文献结论相一致，在EMS患者中NPY可能参与EMS疼痛、焦虑和抑郁机制。

本研究结果证实NPY在EMS患者血清中水平较健康人群高，表明其可能参与EMS的发生、发展;血清NPY与EMS疼痛程度表达一致，表明其与EMS疼痛密切相关;血清NPY与EMS疼痛相关的焦虑、抑郁程度表达一致，表明其与EMS疼痛相关的焦虑、抑郁密切相关。综上所述，血清NPY与EMS疼痛相关的应激状态密切相关，推测NPY可能与EMS发生、发展及疼痛机制、心理障碍密切相关，有可能成为EMS疼痛治疗及心理治疗的新靶点。

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（收稿日期：2021-06-07）