慢性乙肝HBV—DNA、MAO及补体C3及C4对患者病情分级的临床意义

徐彦超　　赵红星

[摘要] 目的 探討慢性乙肝HBV-DNA、单胺氧化酶（MAO）及补体C3、C4对患者病情分级的临床意义。 方法 选取我院2015年2月～2017年2月收治的慢性乙肝患者131例为研究对象，分为慢性乙肝组（乙肝组）68例，慢性乙肝合并肝硬化组（肝硬化组）63例。比较两组HBV-DNA、MAO及补体C3、C4水平，并分析 HBV-DNA、MAO及补体与慢性乙型肝炎病理学分级、肝纤维化程度分级的关系。 结果 肝硬化组患者的HBV-DNA、MAO水平明显高于乙肝组，补体C3、C4水平明显低于乙肝组，差异均有统计学意义（P<0.05）。不同病理学分级的患者HBV-DNA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05），补体C3、C4水平随G1、G2、G3、G4分级程度的升高逐渐下降，差异有统计学意义（P<0.05）。不同肝纤维化程度的患者HBV-DNA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05），血清MAO水平随S0、S1、S2、S3、S4分级程度的升高逐渐升高，血清补体C3、C4水平随分级程度的升高逐渐下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 慢性乙肝患者血清HBV-DNA使机体HBV持续复制，这与慢性乙肝的疾病发展及临床结局有密切的关系，测定血清MAO及补体C3、C4水平可对慢性乙肝病理学分级及肝纤维化程度进行判定，从而对慢性乙肝的病情分级及临床诊疗提供参考依据。

[关键词] 慢性乙肝；病情分级；HBV-DNA；MAO；补体

[中图分类号] R512.62 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）31-0005-04

Clinical significance of chronic hepatitis B HBV-DNA， MAO and complement C3 and C4 in classifying patients' condition

XU Yanchao1 ZHAO Hongxing2

1.Department of Infectious Diseases， the First People's Hospital of Huzhou City in Zhejiang Province， Huzhou 313000， China； 2.Department of Radiology， the First People's Hospital of Huzhou City in Zhejiang Province， Huzhou 313000， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of chronic hepatitis B HBV-DNA， monoamine oxidase （MAO） and complement C3， C4 in classifying patients' condition. Methods A total of 131 patients with chronic hepatitis B admitted in our hospital from February 2015 to February 2017 were enrolled. The patients were divided into chronic hepatitis B group（HB group） with 68 cases， chronic hepatitis B combined with liver cirrhosis group （cirrhosis group） with 63 cases. The levels of HBV-DNA， MAO and complement C3 and C4 were compared between the two groups. And the relationship between HBV-DNA， MAO， complement and liver fibrosis grade classification of pathological grade of chronic hepatitis B was analyzed. Results The levels of HBV-DNA and MAO in cirrhosis group were significantly higher than those in hepatitis B group. The levels of complement C3 and C4 were significantly lower than those in hepatitis B group， and the difference was significant（P<0.05）. There was no significant difference in HBV-DNA levels between patients with different pathological grades（P>0.05）. The levels of complement C3 and C4 gradually decreased with the increase of G1， G2， G3 and G4. The difference was statistically significant（P<0.05）. There was no significant difference in HBV-DNA levels between patients with different degrees of liver fibrosis（P>0.05）. Serum MAO levels increased with the increase of S0， S1， S2， S3， and S4 levels. Serum complement C3， C4 gradually decreased with the increase of grade， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion Serum HBV-DNA in patients with chronic hepatitis B can continuously replicate HBV， which is closely related to the development of chronic hepatitis B disease and clinical outcomes. The determination of serum MAO and complement C3 and C4 levels can be used to classify chronic hepatitis B pathology and liver fibrosis. The judgment is made to provide a reference for the classification and clinical diagnosis and treatment of chronic hepatitis B.

[Key words] Chronic hepatitis B； Disease classification； HBV-DNA； MAO； Complement

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）引起的传染性疾病，是肝脏疾病的主要病因，慢性乙肝可逐渐发展为乙肝合并肝硬化甚至肝衰竭，严重影响患者生活质量[1-2]。且近年来有文献报道慢性乙肝合并肝硬化患者的HBV-DNA水平较高，可能是肝纤维化甚至肝癌等疾病的诱发因素[3]。以往判断肝炎活动度及肝纤维化程度主要依靠病理学检查，但因其创伤大，不宜重复操作，临床上逐渐发现单胺氧化酶（MAO）及补体C3、C4等生物学标志物在肝损害的不同阶段具有特征性变化[4-5]。本研究检测分析了131例慢性乙肝患者的HBV-DNA、MAO及补体C3、C4水平变化，探讨其对患者病情分级及疾病诊疗的临床意义，为慢性乙肝患者的临床诊治提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2015年2月～2017年2月收治的慢性乙肝患者131例为研究对象，其中男73例，女58例；年龄25～76岁，平均（40±13）岁。所有研究对象分为慢性乙肝组（乙肝组）68例，其中男39例，女29例，平均年龄（41±11）岁；慢性乙肝合并肝硬化组（肝硬化组）63例，其中男34例，女29例，平均年龄（39±14）岁。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：①研究对象符合《慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）》[6]诊断标准；②病历资料完整的患者；③所有研究对象均签署知情同意。

排除标准：①患甲肝、丙肝等病毒性肝炎患者及酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、药物性肝损伤、脂肪肝、肝癌等疾病患者；②合并心脑血管疾病患者；③参与研究前6个月内服用免疫抑制剂或抗病毒药物者；④妊娠期及哺乳期妇女。

本研究通过医院医学伦理委员会批准。

1.3 方法

1.3.1 病理学检查 观察组患者使用利多卡因行表皮及局部麻醉，取右腋中线第8～9肋间隙为穿刺点，在彩色多普勒超声引导下，用长约15 cm、18G全自动活检枪，实施1 s快速经皮肝穿刺术，于包膜下约3 cm处采集长度≥1.5 cm肝组织，至少包括3个汇管区。用10%中性甲醛液固定标本，以石蜡包埋，并进行连续切片，以HE和网织纤维染色处理[7]。所有操作均由我院病理科专业人员1人独立完成，并参照《病毒性肝炎防治方案》[8]对肝组织病理学及肝纤维化程度进行分级，病理学分级为G1～G4级，肝纤维化程度分为S0～S4级。

1.3.2 指标检测 所有研究对象于清晨空腹时抽取静脉血5 mL，使用离心机分离出血清，采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA水平，检测结果取对数表示；采用速率法检测MAO水平；采用免疫散射法检测补体C3、C4水平，C3正常参考值范围为0.9～1.8 g/L，C4正常参考值范围为0.1～0.4 g/L。所有操作均由我院检验科专业人员操作完成。

1.4 统计学方法

应用 SPSS 17.0 统计软件进行数据分析，计量资料以（x±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，计数资料比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 結果

2.1 两组患者血清HBV-DNA、MAO及补体水平比较

肝硬化组患者的HBV-DNA、MAO水平明显高于乙肝组，差异有统计学意义（P<0.05）。肝硬化组患者的补体C3、C4水平明显低于乙肝组，组间差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 慢性乙肝组不同病理学分级患者的HBV-DNA及补体水平比较

慢性乙肝组不同病理学分级的患者HBV-DNA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；不同病理学分级的患者补体C3、C4水平随G1、G2、G3、G4分级程度的升高逐渐下降，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3慢性乙肝组不同肝纤维化程度患者的HBV-DNA、MAO及补体水平比较

慢性乙肝组不同肝纤维化程度的患者HBV-DNA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；不同肝纤维化程度患者的MAO水平随S0、S1、S2、S3、S4分级程度的升高逐渐升高，血清补体C3、C4水平随分级程度的升高逐渐下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

随着人们生活方式的改变，慢性乙肝患者逐渐增多。而慢性乙肝发生的主要原因是感染HBV病毒，因此乙肝的治疗关键是抗病毒治疗。血清HBV-DNA是HBV感染最直接的指标，血清HBV-DNA阳性说明HBV具有复制性和传染性，且HBV-DNA水平越高，HBV复制越活跃、传染性越高[9-11]。本文中慢性乙肝合并肝硬化组患者的HBV-DNA水平高于慢性乙肝组，与袁媛等[12]研究结果一致，而高水平的HBV-DNA对肝细胞的损伤增大[13-14]。本研究进一步比较不同病理学分级及纤维化程度的患者HBV-DNA水平，未发现HBV-DNA水平与慢性乙肝病理学分级及纤维化程度有相关性。因此，尽早采取措施抑制HBV复制，改善肝功能，控制疾病发展尤为重要。

MAO 是一种水溶性酶，主要存在于机体肝、肾等组织的线粒体中，可促使机体胶原和弹性硬蛋白的结合，临床上常用作肝纤维化程度的诊断指标。机体在感染HBV后，肝脏发生慢性炎症反应，炎症反应进一步刺激肝脏形成纤维组织增生，随肝纤维化程度加重，血清MAO水平增加[15-16]，这与本研究结果相同，慢性乙肝合并肝硬化患者的血清MAO水平明显高于慢性乙肝患者，且肝纤维化程度越高，血清MAO水平越高，进一步说明MAO可用于诊断慢性乙肝患者肝纤维化程度。

HBV是一种非细胞毒性病毒，机体在遭受该病毒感染时，易产生相应的免疫反应，体液免疫和细胞免疫共同发挥免疫作用，抵御HBV感染[17-19]。而体液免疫中的补体C3、C4作用重大。本研究发现，补体C3、C4水平与患者病情有关。慢性乙型肝炎合并肝硬化患者的血清补体C3、C4水平较慢性乙型肝炎患者明显下降。表明慢性乙型肝炎患者免疫功能异常，与肝脏受损有关，且随肝脏损伤程度加重，补体水平逐渐下降，这与强占荣[20]、林孟新[21]等研究结果相似。朱书利[22]也认为，补体C3、C4水平降低与HBV感染肝细胞受损导致补体合成减少及免疫功能紊乱补体大量消耗有关。本研究进一步比较不同病理学分级患者的补体C3、C4水平，结果发现，G1期C3、C4水平最高，随着病理学分级升高补体水平逐渐下降；不同的肝纤维化程度患者比较，S1期C3、C4水平最高，随纤维化程度加重，补体水平逐渐下降，与郭飞波[4]研究结果一致，说明补体C3、C4水平与慢性乙肝的病情分级有关。

综上所述，慢性乙肝患者血清HBV-DNA使机体HBV持续复制，这与慢性乙肝的疾病发展及临床结局有密切的关系，测定血清MAO及补体C3、C4水平可对慢性乙肝病理学分级及肝纤维化程度进行判定，从而对慢性乙肝的病情分级及临床诊疗提供参考依据。

[参考文献]

[1] 付艳玲. 慢性乙型肝炎抗病毒治疗耐药管理研究进展[J].热带医学杂志，2014，14（10）：1392-1395.

[2] Tian Y，Ni D，Yang W，et al. Telbivudine treatment corrects HBV-induced epigenetic alterations in liver cells of patients with chronic hepatitis B[J]. Carcinogenesis，2014，35（1）：53.

[3] 赵龙凤，王艳. 临床一线抗病毒药物对慢性乙型肝炎治疗结局的影响[J]. 中华肝脏病杂志，2017，25（7）：485-489.

[4] 郭飞波. 慢性乙肝患者血清补体C3、C4与肝炎分级程度以及肝纤维化程度的关系研究[J]. 中国免疫学杂志，2017，33（3）：426-428.

[5] 周艾强，陈阳术. 细胞自噬影响实验性大鼠肝纤维化进展的分子机制以及药物抗肝纤维化的作用研究[J]. 广东医学，2017，38（15）：2280-2283.

[6] 中华医学会肝病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）[J]. 中华内科杂志，2011，50（2）：1-12.

[7] 李霞，陈群，杨柳. 实时超声弹性成像技术评估肝纤维化程度的研究[J]. 中西医结合肝病杂志，2018，28（1）：46-47.

[8] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会，肝病学分会. 病毒性肝炎防治方案[J]. 中华内科杂志，2001，40（1）：62-68.

[9] 魏娟，王生，周迪，等. 乙型肝炎病毒前S1抗原与血清HBV-DNA及HBVM的相关性分析[J]. 中华医院感染学杂志，2014，24（14）：3391-3393.

[10] 张宝，李世龙，么作义，等. 唐山地区慢性乙型肝炎患者临床特征与HBV基因型的相关性研究[J]. 中华医院感染学杂志，2016，26（5）：982-984.

[11] Seto W K，Lam Y F，Fung J，et al. Changes of HBsAg and HBV DNA levels in Chinese chronic hepatitis B patients after 5 years of entecavir treatment[J]. Journal of Gastroenterology & Hepatology，2014，29（5）：1028-1034.

[12] 袁媛，陈骥，王亚莉. HBeAg阴性慢性乙肝合并肝硬化患者血清HBV-DNA水平与肝功能的关系[J]. 山东医药，2017，57（1）：81-83.

[13] 方向，邓伟. HBV DNA整合与肝癌关系的研究进展[J]. 山东医药，2017，57（42）：102-104.

[14] 刘英丽，张青云. 甲胎蛋白和α-L-岩藻糖苷酶及乙肝病毒核酸水平与原发性肝癌的关系[J]. 标记免疫分析与临床，2016，23（3）：241-243.

[15] 袁秀梅，王爱霞，齐发梅. 乙肝、丙肝和肝硬化患者血清单胺氧化酶、腺苷脱氨酶及胆碱脂酶水平的比较[J]. 国际检验医学杂志，2014，35（9）：1194-1195.

[16] 沈震，费新应，刘文涛，等. 牡甲化纤方治疗各种原因所致慢性肝病肝纤维化患者的临床研究[J]. 中西医结合肝病杂志，2017，27（1）：23-25.

[17] 刘志华，齐青松，张志安，等. 慢性乙型肝炎患者外周血CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞的变化及临床意义[J]. 热带医学杂志，2014，14（3）：342-344.

[18] 杨新星，李东升，周继光，等. 乙肝病毒感染不同阶段抗原肽特异性细胞毒性T淋巴细胞的初步研究[J]. 中国免疫学杂志，2016，32（10）：1496-1502.

[19] 李勇，陈锦皇，舒晓刚，等. 已免疫CD4+记忆性T淋巴细胞介导HBV转基因小鼠抗HBsAg免疫应答的研究[J].中华肝脏病杂志，2016，24（12）：897-901.

[20] 强占荣，易彩霞，刘颖，等. 慢性HBV感染者外周血淋巴细胞亚群及血清IgG和补体检测的临床意义[J]. 内科，2016，11（1）：1-3.

[21] 林孟新，苏智军，郭如意. 乙型肝炎患者血清免疫球蛋白和補体C3/C4检测的意义[J]. 实用肝脏病杂志，2015， 18（2）：182-183.

[22] 朱书利. 血清补体C3、C4水平检测对慢性乙型肝炎患者肝组织病理学的意义评价[J]. 临床和实验医学杂志，2016，15（5）：459-462.

（收稿日期：2018-05-23）