固相萃取-气相色谱/质谱联用法检测茶叶中15种农药残留

时间：2024-05-14

李琳，马淑青，代飞飞，聂丹丹

（潍坊市疾病预防控制中心，山东潍坊 261061）

山东省作为江北茶区之一，所产日照绿茶、崂山绿茶、莒南茶、沂蒙绿茶等受到广大消费者的欢迎。近年来，由于茶叶饮用安全问题，其多类农药残留的分析检测成为行业关注的焦点[1-2]。考虑到茶叶基质复杂，建立了固相萃取[3]-气相色谱/质谱联用法[4-5]（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC/MS）测定茶叶中15种农药残留的分析方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

15种农药标准品（100 μg·mL-1），均购自农业农村部环境保护科研监测所；乙腈、丙酮、正己烷和二氯甲烷，美国Fisher；氯化钠（优级纯）、无水硫酸镁（分析纯），国药集团；Cleanert PC/NH2-SPE固相萃取柱（500 mg/500 mg/6 mL），美国Agela。

1.2 仪器与设备

手动固相萃取仪（北京莱伯泰科）；ISQ单四极杆GC/MS联用仪（美国赛默飞）；N-EVAP氮吹仪（美国Organomation）；涡旋振荡器（德国Heidolph）；LYNX400高速落地离心机（美国赛默飞）；ARA520电子天平（奥豪斯）。

1.3 标准储备溶液与标准溶液配制

将置于室温平衡后的15种农残标准溶液全部移入50 mL容量瓶中，用正己烷溶液（色谱级）少量多次清洗各标准溶液小瓶合并洗液至容量瓶中，定容至50 mL，配制成浓度为2.0 μg·mL-1的混合标准储备液。再将标准储备液稀释成浓度为0.2 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1、0.6 μg·mL-1、0.8 μg·mL-1和1.0 μg·mL-1的标准系列溶液。

1.4 实验条件

1.4.1 色谱条件

色谱柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；载气：高纯He；柱流量：1.0 mL·min-1；进样口温度：280 ℃；采用不分流进样，进样量：1 μL；程序升温：40 ℃保持1 min，之后以30 ℃·min-1升温至130 ℃，再以5 ℃·min-1升温至250 ℃，最后以10 ℃·min-1升温至300 ℃并保持5 min；接口温度：280 ℃。

1.4.2 质谱条件

轰击电子能量：70 eV；全扫描范围：40～550 amu；采用全扫描模式和选择离子监测模式采集信号；电离源温度：230 ℃。

1.5 样品提取与净化

准确称取1.0 g均匀粉碎的茶叶样品于50 mL离心管中，加水10 mL涡旋混匀并浸泡30 min，再加入10 mL乙腈和1 g氯化钠，涡旋振荡0.5 min，待液液分层后加入4 g无水硫酸钠，迅速旋上瓶盖，振荡涡旋1 min，10000 r·min-1离心5 min，取5.0 mL上清液于45 ℃水浴中氮吹至近干，10 mL丙酮分3次加入，提取液采用二氯甲烷（1∶1）洗脱样品，洗脱液经过PC/NH2-SPE固相萃取柱净化提取，收集于KD浓缩瓶中，氮吹至0.5 mL，待GC/MS分析测定。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的优化

根据“相似相容”原理，选择适合各待测组分化学性质的TG-5MS色谱柱分离15种农药残留；40 ℃保持1 min，以30 ℃·min-1升温至130 ℃，以5 ℃·min-1升温至250 ℃，再以10 ℃·min-1升温至300 ℃保持5 min；进样方式选择不分流进样。通过全扫描方式确定每种待测目标物的保留时间和定性定量离子，见表1。总离子流图（见图1）显示，在TG-5MS色谱柱中15种农药残留能有效分离。

图1 15种农药的总离子流图（TIC图）

表1 15种农药的保留时间和特征定性定量离子

2.2 方法的线性范围、标准曲线和检出限

混合农药残留标准系列配制5个浓度，浓度在0.2～1.0 μg·mL-1，以浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标绘制标准曲线并进行线性回归分析。15种农药标准溶液的回归方程、相关系数、检出限见表2。

表2 15种农药标准溶液的回归方程、相关系数、回收率、精密度

2.3 方法的精密度与回收率

准确称取1.0 g空白茶叶样品6份，分别加入0.8 μg·mL-1的混合标准溶液，混匀后静置1 h，按上述1.5试验步骤提取净化后上机测定，分别计算其加标回收率与相对标准偏差（Relative Standard Deviation，RSD），结果见表2。结果表明，方法的平均加标回收率为85.3%～92.8%，各待测组分相对标准偏差（n=6）为3.8%～8.6%，符合农药残留分析的要求。