新生儿溶血病检测途径解析

张燕娟

（南通市妇幼保健院 江苏南通 226000）

新生儿溶血病在临床上比较常见，其是指母亲与新生儿由于血型的不合所引起的一种免疫性溶血反应。在新生儿溶血病中比较常见的一种类型就是ABO-HDN，当母亲为O型血，而新生儿为A型或者B型血时，极易发生ABO-HDN。有研究人员发现，超过一半的ABO型溶血病都发生在第一胎，这是由于母体在首次妊娠前就已经受到了多种因素的刺激，其体内已经产生了大量的抗A、抗B等IgG之类的抗体[1]。新生儿溶血病并不会对母体造成任何形式的影响，但是其会对导致新生儿出现贫血、心力衰竭等，严重的甚至会导致新生儿死亡，临床上加强对其的检测极其重要。本次选取了160例2017年12月至2018年11月本市各医院的新生儿溶血病患者以及其母亲的血液标本，对其中的158份采用了传统的试管法进行检测，对另外的158份进行凝胶技术检测。具体如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取160例2017年12月至2018年11月本市各医院的新生儿溶血病患者以及其母亲的血液标本各1份，共320份。本组患儿中男74例，女 86例，年龄 1～60 d，平均年龄（33.11±5.69）d。本组 160例母亲均为O型血，但是88例新生儿为A型血，72例为B型血。本次研究符合本院伦理学要求，患者及家属均知情，且自愿参与本次研究。两组一般资料对比无明显差异（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法

取抗人球蛋白试剂、A试剂、B试剂和O试剂红细胞，其均由本市血液中心提供。对新生儿与母亲血型进行检测，将ABO-HDN患者的血液标本分成2份，分别将其标记为凝胶技术组和传统试管组，各包括新生儿的血液标本158份。将传统试管组标本采用传统的试管法进行检测。将凝胶技术组标本采用凝胶技术检测。

改良Coombs试验，将传统试管组患儿血液标本用生理盐水进行洗涤3次，将其配制成浓度为5%的红细胞悬液，并加入抗人球蛋白血清，将其混合。将凝胶技术组标本配制成浓度为0.8%的红细胞悬液，并取其中的50μL，将其加入到抗IgG卡的其中一个小孔内，采用凝胶检测专用离心机离心7～8 min，对其结果进行观察。

游离抗体试验，在传统检测组血液标本中加入抗人球蛋白，对其血清、血型抗体等进行检测。凝胶技术组，取一张IgG卡，在上面标记上6个孔，分别为 A、B、O 和 A′、B′、O′，在 A、B、O 孔内加入25μL的患儿血清，在A′、B′、O′孔中加入25μL离心后的上层清液，再取50μL浓度为0.8%的标准红细胞加入在6个孔中，将IgG卡进行孵育和离心，对其结果进行观察。

1.3 观察指标

观察并比较两种检测方法对新生儿溶血病诊断准确率。诊断标准为改良Coombs试验阳性、抗体释放试验阳性，而游离抗体试验阳性作为参考依据。

1.4 统计学分析

采用SPSS19.0统计软件处理数据，P＜0.05为差异有统计学意义，计数资料用%表示，用X2检验，计量资料用均数标准差表示，用t检验。

2 结果

本组 160例患儿中 ABO-HDN患者有 158例（98.75%），RH-HDN 2例（1.25%）。试管组对新生儿溶血病诊断准确率65.19%（103/158）低于凝胶技术组75.32%（119/158）。试管组改良Coombs试验阳性率、游离抗体试验阳性率、抗体释放试验阳性率分别为13.29%、15.82%和65.19%，凝胶技术组分别为22.15%、37.34%和75.32%，试管组各项结果均低于凝胶技术组，差异明显（P＜0.05），有统计学意义。详见表1所示：

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3 讨论

新生儿溶血病的发病机制是由于母体内存在与胎儿红细胞不符合的血型抗体，导致胎儿体内出现了红细胞的大量溶解和破裂，当新生儿出现溶血病后，会增加其黄疸、贫血、肝脾肿大等疾病的发生率，严重的甚至还会导致患儿出现心力衰竭、胆红素脑病等疾病[2]。因此，应及时采取有效的措施进行检测诊断。临床检测人员大都选取HDN试验，并且其发现，对新生儿溶血病患者及时进行HDN试验，对患者的诊断和治疗均有着非常重要的意义。

传统的试管法操作比较复杂，并且对操作者的要求也比较高，此种检测方法测定的结果不能保存较长的时间，其结果还极易出现假阴性。而凝胶技术不但在检测的过程中，利用了微柱凝胶颗粒的筛选原理，其是在离心仪离心的作用下，将凝集与非凝集的红细胞进行了分离，当凝集的红细胞聚集在了凝胶的上部或者凝胶中时，判定试验结果为阳性，此时没有发生凝集的红细胞会自动的沉积在凝胶管的底部，此时判定试验结果为阴性。此种检测技术充分的利用了抗原可抗体反应的原理，使操作起来更加简便和快捷，并且此种检测方法的检测结果还容易保存，有效的避免了抗体蛋白在蛋白质中的残留，还避免了残留盐分对抗球蛋白进行稀释后引起的假阴性，有效的提高了临床诊断的准确率[3]。

本次研究结果也显示，试管组改良Coombs试验的阳性率、游离抗体试验的阳性率、抗体释放试验的阳性率分别为13.29%、15.82%和65.19%，凝胶技术组分别为22.15%、37.34%和75.32%，试管组各项结果均低于凝胶技术组，差异明显（P＜0.05），有统计学意义。这与刘蕾[4]的研究结果是一致的。进一步提示凝胶技术对HDN阳性的检出是有效的，其诊断效果值得肯定。

综上所述，临床上诊断新生儿溶血病患者时，凝胶技术的检测效果优于传统的试管法检测效果，建议将此种技术应用在更多的临床上。