脱—γ—羧基凝血酶原及甲胎蛋白诊断原发性肝癌的临床价值

石亚玲++++++江笑文++++++邝燕玲

[摘要] 目的 探讨脱-γ-羧基凝血酶原（DCP）及甲胎蛋白（AFP）诊断原发性肝癌的临床价值。 方法 选择原发性肝癌患者105例、慢性肝炎患者75例以及肝硬化患者39例为研究对象，分析DCP和AFP检测结果，并与病理金标准进行比较，评价两种方法对原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度。 结果 DCP诊断原发性肝癌的灵敏度为80.95%，特异度为85.96%，与病理结果金标准的一致性好（Kappa=0.762）；AFP诊断原发性肝癌的灵敏度为88.57%，特异度为91.23%，与病理结果金标准的一致性好（Kappa=0.824）；DCP和AFP联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度为91.43%，特异度为96.49%；与病理结果金标准的一致性好（Kappa=0.883）。 结论 DCP和AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度以及与病理检测结果的一致性。

[关键词] 脱-γ-羧基凝血酶原；a甲胎蛋白；原发性肝癌

[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）07（a）-0073-03

原发性肝癌是临床常见的恶性肿瘤，死亡率较高，手术治疗是其根治的主要方法，但是因患者早期常常没有明显的临床症状，而一旦发现，往往已失去了手术治疗时机。因此能够早发现、早诊断、早治疗对原发性肝癌的治疗效果和预后具有重要的意义[1]。甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是临床上最常用的临床指标，但是其特异性和敏感性相对较低，因此主要用于临床筛查。脱-γ-羧基凝血酶原（des-γ-carboxy-prothrombin，DCP）是一种异常的凝血酶原[2-3]，研究发现其在原发性肝癌患者血清中具有较高的阳性率。本研究通过回顾性分析105例原发性肝癌患者的临床资料，分析DCP和AFP在原发性肝癌诊断中的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年1月～2013年12月本院收治的原发性肝癌患者105例为研究对象，均经病理确诊，其中男98例，女7例；年龄32～78岁；病因包括病毒性肝炎、肝硬化、酒精性肝炎及原因不明；所有患者TNM分期为Ⅱ期或者Ⅲ期。另选择在本院诊断治疗的其他肝病患者114例作为对照，包括慢性肝炎75例、肝硬化39例，所有患者均排除原发性肝癌诊断，其中男105例，女9例，年龄30～76岁。两组患者的性别、年龄比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。同时选择健康体检者（排除肝、肾、心脏等疾病）53例为正常对照组，其中男29例，女24例，年龄26～73岁。

1.2 检测方法

所有患者于晨起采集空腹静脉血，分离血清。DCP采用酶联免疫分析法，试剂为美国ADL公司生产；AFP采用电化学发光法，仪器为罗氏公司Cobase601全自动电化学发光仪，试剂为配套试剂。所有操作参照说明书进行。原发性肝癌患者以及肝硬化患者术中切除的肝脏组织进行10%中性甲醛固定，石蜡包埋，切片，脱蜡，染色后进行病理分析。慢性肝炎患者进行经皮肝脏穿刺，获得的肝组织经10%中性甲醛固定后，行石蜡包埋，采用组织病理学方法进行检查。

1.3 评判标准

阳性判断标准：DCP>40 mAU/ml，AFP>400 μg/L。

1.4 统计学处理

采用SPSS 16.0统计软件对数据进行分析，计量资料以x±s表示，采用F检验，一致性采用Kappa一致性检验，相关性采用Pearson相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 4组DCP和AFP水平的比较

慢性肝病组、肝硬化组及正常对照组的DCP和AFP水平均低于原发性肝癌组，差异有统计学意义（P<0.01）（表1）。

表1 4组DCP和AFP水平的比较（x±s）

与原发性肝癌组比较，*P<0.01

2.2 原发性肝癌组DCP检测结果与病理金标准的一致性

DCP诊断原发性肝癌的灵敏度为80.95%，特异度为85.96%，与金标准具有较好的一致性（Kappa=0.762）（表2）。

表2 原发性肝癌组DCP检测结果与病理金标准的一致性（n）

2.3 原发性肝癌组AFP检测结果与病理金标准的一致性

AFP诊断原发性肝癌的灵敏度为88.57%，特异度为91.23%，与金标准具有很好的一致性（Kappa=0.824）（表3）。

表3 原发性肝癌组AFP检测结果与病理金标准的一致性（n）

2.4 原发性肝癌组DCP和AFP联合检测结果与病理金标准的一致性

DCP和AFP联合诊断原发性肝癌的灵敏度为91.43%，特异度为96.49%，与金标准具有很好的一致性（Kappa=0.883）（表4）。

表4 原发性肝癌组DCP和AFP联合检测结果与病理金标准的

一致性（n）

2.5 DCP和AFP水平的相关性

血清DCP和AFP水平无相关性（r=0.041，P>0.05）。

3 讨论

原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其病因和发病机制尚未确定，目前认为与肝硬化、病毒性肝炎以及黄曲霉素等化学致癌物质和环境因素有关。AFP是一种糖蛋白，主要来自胚胎的肝细胞，胎儿出生后约两周AFP从血液中消失，因此正常人血清中AFP含量<10 μg/L。当肝细胞发生癌变时，又恢复了产生AFP的功能，且随着病情恶化，AFP在血清中的含量会急剧增加，因此AFP就成了诊断原发性肝癌的一个特异性临床指标。血清AFP持续≥400 μg/L，并能排除妊娠、活动性肝病等，即可考虑肝癌的诊断[4]。AFP作为诊断原发性肝癌的特异性肿瘤标志物，具有确立诊断、早期诊断、鉴别诊断的作用。临床发现，部分肝硬化患者会持续出现AFP≥400 μg/L，却多年都没有肝癌的迹象；约20%的晚期肝癌患者，直至病故前，AFP仍<10 μg/L。

DCP是一种异常凝血酶，与正常的凝血酶相比，其γ-羧基谷氨酸结构中有一个或者多个谷氨酸残基不完全羧化为γ-羧基谷氨酸，从而失去正常的凝血功能[3，5]。正常的凝血酶在肝细胞微粒体内依赖维生素K的γ-谷氨酰羧化酶、维生素K环氧化酶和维生素K还原酶作用，结构中γ-羧基谷氨酸的10个谷氨酸残基羧化成γ-羧基谷氨酸，转变成有活性的凝血酶原，任何一个位点羧化不全，就会失去凝血酶原功能，形成DCP[6-7]。肝癌细胞可能相关酶的羧化能力发生变化，羧化酶活性下降，对维生素K摄取及利用障碍，导致DCP形成。袁联文等[8]研究显示，癌组织产生过量DCP是肝癌血清DCP的主要来源，是一种预后标志物，但肝癌血清DCP浓度是癌组织和非癌组织产生DCP浓度的整体表现。有研究显示，DCP可能具有刺激肝癌细胞生长、浸润和促进转移等作用[7]。钟志敏等[9]研究显示，DCP对原发性肝癌具有较高的诊断价值，且能鉴别诊断原发性肝癌、继发性肝癌及其他良性肝脏疾病，DCP和AFP联合诊断可以提高原发性肝癌的诊断效能。

本研究结果显示，DCP诊断原发性肝癌的灵敏度为80.95%，特异度为85.96%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.762）；AFP诊断原发性肝癌的灵敏度为88.57%，特异度为91.23%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.824）；DCP和AFP联合诊断原发性肝癌的灵敏度为91.43%，特异度为96.49%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.883）。DCP和AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度及与病理金标准的一致性。

综上所述，DCP作为肝癌细胞内羧化异常而产生的一种异常凝血酶原，其在原发性肝癌患者的血清水平有所升高，可以作为诊断原发性肝癌的相关指标之一；且DCP与AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度以及与病理检测结果的一致性，对诊断AFP阴性的肝癌患者起较好的补充作用。

[参考文献]

[1] 周天智，胡建，龚建平.原发性肝癌的早期诊断流程及治疗进展[J].中国现代普通外科进展，2013，16（12）：1001-1004.

[2] 黄锦，宋汉明.脱-γ-羧基凝血酶原对肝细胞癌诊治的临床价值[J].国际检验医学杂志，2011，32（12）：1335-1336.

[3] 王天舒，杨卫华.脱-γ-羧基凝血酶原测定对肝细胞癌的诊断价值[J].标记免疫分析与临床，2012，19（1）：48-50.

[4] 熊海燕，赵枰.甲胎蛋白异质体在原发性肝癌诊断中的价值[J].标记免疫分析与临床，2013，20（6）：399-401.

[5] Carr BI，Kanke F，Wise M，et al.Clinical evaluation of lens culinaris agglutinin-reactive alpha-fetoprotein and des-gamma-carboxyprothrombin in histologically proven hepatocellular carcinoma in the United States[J].Dig Dis Sci，2007，52（3）：776-782.

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[7] 陈明慧，李雪川，唐伟，等.脱-γ-羧基凝血酶原与原发性肝癌[J].生命的化学，2008，28（1）：69-71.

[8] 袁联文，唐伟，周建平，等.肝癌组织中脱-γ-羧基凝血酶原的测定及意义[J].世界华人消化杂志，2006，14（1）：45-49.

[9] 钟志敏，王维，莫云丹，等.脱-γ-羧基凝血酶原对原发性肝癌的诊断价值探讨[J].检验医学，2013，28（5）：382-386.

（收稿日期：2014-05-05 本文编辑：李亚聪）

DCP是一种异常凝血酶，与正常的凝血酶相比，其γ-羧基谷氨酸结构中有一个或者多个谷氨酸残基不完全羧化为γ-羧基谷氨酸，从而失去正常的凝血功能[3，5]。正常的凝血酶在肝细胞微粒体内依赖维生素K的γ-谷氨酰羧化酶、维生素K环氧化酶和维生素K还原酶作用，结构中γ-羧基谷氨酸的10个谷氨酸残基羧化成γ-羧基谷氨酸，转变成有活性的凝血酶原，任何一个位点羧化不全，就会失去凝血酶原功能，形成DCP[6-7]。肝癌细胞可能相关酶的羧化能力发生变化，羧化酶活性下降，对维生素K摄取及利用障碍，导致DCP形成。袁联文等[8]研究显示，癌组织产生过量DCP是肝癌血清DCP的主要来源，是一种预后标志物，但肝癌血清DCP浓度是癌组织和非癌组织产生DCP浓度的整体表现。有研究显示，DCP可能具有刺激肝癌细胞生长、浸润和促进转移等作用[7]。钟志敏等[9]研究显示，DCP对原发性肝癌具有较高的诊断价值，且能鉴别诊断原发性肝癌、继发性肝癌及其他良性肝脏疾病，DCP和AFP联合诊断可以提高原发性肝癌的诊断效能。

本研究结果显示，DCP诊断原发性肝癌的灵敏度为80.95%，特异度为85.96%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.762）；AFP诊断原发性肝癌的灵敏度为88.57%，特异度为91.23%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.824）；DCP和AFP联合诊断原发性肝癌的灵敏度为91.43%，特异度为96.49%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.883）。DCP和AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度及与病理金标准的一致性。

综上所述，DCP作为肝癌细胞内羧化异常而产生的一种异常凝血酶原，其在原发性肝癌患者的血清水平有所升高，可以作为诊断原发性肝癌的相关指标之一；且DCP与AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度以及与病理检测结果的一致性，对诊断AFP阴性的肝癌患者起较好的补充作用。

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[9] 钟志敏，王维，莫云丹，等.脱-γ-羧基凝血酶原对原发性肝癌的诊断价值探讨[J].检验医学，2013，28（5）：382-386.

（收稿日期：2014-05-05 本文编辑：李亚聪）

DCP是一种异常凝血酶，与正常的凝血酶相比，其γ-羧基谷氨酸结构中有一个或者多个谷氨酸残基不完全羧化为γ-羧基谷氨酸，从而失去正常的凝血功能[3，5]。正常的凝血酶在肝细胞微粒体内依赖维生素K的γ-谷氨酰羧化酶、维生素K环氧化酶和维生素K还原酶作用，结构中γ-羧基谷氨酸的10个谷氨酸残基羧化成γ-羧基谷氨酸，转变成有活性的凝血酶原，任何一个位点羧化不全，就会失去凝血酶原功能，形成DCP[6-7]。肝癌细胞可能相关酶的羧化能力发生变化，羧化酶活性下降，对维生素K摄取及利用障碍，导致DCP形成。袁联文等[8]研究显示，癌组织产生过量DCP是肝癌血清DCP的主要来源，是一种预后标志物，但肝癌血清DCP浓度是癌组织和非癌组织产生DCP浓度的整体表现。有研究显示，DCP可能具有刺激肝癌细胞生长、浸润和促进转移等作用[7]。钟志敏等[9]研究显示，DCP对原发性肝癌具有较高的诊断价值，且能鉴别诊断原发性肝癌、继发性肝癌及其他良性肝脏疾病，DCP和AFP联合诊断可以提高原发性肝癌的诊断效能。

本研究结果显示，DCP诊断原发性肝癌的灵敏度为80.95%，特异度为85.96%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.762）；AFP诊断原发性肝癌的灵敏度为88.57%，特异度为91.23%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.824）；DCP和AFP联合诊断原发性肝癌的灵敏度为91.43%，特异度为96.49%，与金标准的一致性较好（Kappa=0.883）。DCP和AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度及与病理金标准的一致性。

综上所述，DCP作为肝癌细胞内羧化异常而产生的一种异常凝血酶原，其在原发性肝癌患者的血清水平有所升高，可以作为诊断原发性肝癌的相关指标之一；且DCP与AFP联合检测能够显著提高原发性肝癌诊断的灵敏度、特异度以及与病理检测结果的一致性，对诊断AFP阴性的肝癌患者起较好的补充作用。

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[4] 熊海燕，赵枰.甲胎蛋白异质体在原发性肝癌诊断中的价值[J].标记免疫分析与临床，2013，20（6）：399-401.

[5] Carr BI，Kanke F，Wise M，et al.Clinical evaluation of lens culinaris agglutinin-reactive alpha-fetoprotein and des-gamma-carboxyprothrombin in histologically proven hepatocellular carcinoma in the United States[J].Dig Dis Sci，2007，52（3）：776-782.

[6] Wang SB，Cheng YN，Cui SX，et al.Des-gamma-carboxy prothrombin stimulates human vascular endothelial cell growth and migration[J].Clin Exp Metastasis，2009，26（5）：469-477.

[7] 陈明慧，李雪川，唐伟，等.脱-γ-羧基凝血酶原与原发性肝癌[J].生命的化学，2008，28（1）：69-71.

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[9] 钟志敏，王维，莫云丹，等.脱-γ-羧基凝血酶原对原发性肝癌的诊断价值探讨[J].检验医学，2013，28（5）：382-386.

（收稿日期：2014-05-05 本文编辑：李亚聪）