AFP、GGT、AST/ALT在肝细胞癌中的诊断价值研究

阳思涛，秦雪

（1.广西医科大学，广西 南宁 530021；2.广西生物医药协同创新中心，广西 南宁 530021；3.广西医科大学第一附属医院 检验科，广西 南宁 530021）

0 引言

肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，至今仍然是人类健康的主要威胁，给患者带来了沉重的心理压力和经济负担。自20世纪80年代AFP引入以来，其在医疗实践中的应用以及对肝癌中作用的认识不断发展和扩大，它也是目前世界上应用最广泛的HCC血清生物标志物。然而，其自身的局限性，许多晚期肝癌患者的AFP检测结果呈阴性。当前，有效的肝癌治疗手段，手术切除和肝移植，其5年总生存率也仅为7%[1]。HCC患者的预后效果与能否准确、早期诊断密切相关。虽然当今计算机断层扫描（CT）和磁共振成像（MRI）技术的进步极大地提高了肝癌的诊断性能，但是它们成本高昂，且不利于早期发现检测和筛查[2]。血细胞计数和肝功能检查作为当今常规体检项目，目的在于反映机体免疫水平和营养状况[3]，这项研究回顾性分析了甲胎蛋白（AFP）、血清γ-谷氨酰转移酶（GGT）和天冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶比值（AST/ALT）在肝脏疾病患者和健康体检者中的差异表达情况，目的探讨AFP、GGT、AST/ALT在肝脏疾病中的诊断价值，为肝脏疾病诊断和检查者的早期监测提供依据，具体分析如下。

1 资料和方法

1.1 纳入患者基本资料

1.1.1 研究对象

将2019年1月至2019年12月在广西医科大学第一附属医院接受治疗的肝细胞癌患者选定为研究小组，选择同一时期肝硬化和健康体检者作为对照群体，进行回顾性分析研究。

1.1.2 研究组

选择根据《病毒性肝炎防治方案》中符合肝癌诊断标准经本院确诊为肝细胞癌，以及排除可能影响检验指标的癌症患者，共110例，其中男性58例，女性52例，平均年龄（51.87±10.11）岁。

1.1.3 对照组

把同一时期本院肝硬化患者和体检中心体检结果无临床异常意义的人群作为对照组，其中肝硬化组(LC)52例，男性36例，女性16例，平均年龄（51.13±13.24）岁；健康体检组(HG)83例，男性43例，女性40例，平均年龄（48.63±11.46）。

1.2 方法

AFP、GGT、AST/ALT均采用电化学发光法检测，使用美国雅培全自动生化免疫分析流水线系统及其配套试剂。

1.3 统计学处理

使用IBM SPSS 23.0和GraphPad Prism 5 软件进行统计分析。计数资料运用卡方检验，结果用率表示。连续变量分析结果用均值±标准差表示。对各组数据进行正态性检验测试，正态分布资料选择单因素方差分析，结果表示为±s；多组别非正态分布资料选择Kruskal-Wallis H 检验，结果用四分位数［M(P25-P75)］表示，P＜0.05为差异具有统计学意义。Spearman 秩相关分析各指标之间关联性。绘制单独以及联合检测受试者工作曲线（ROC）曲线计算曲线下面积(AUC)比较各指标诊断效能。

2 结果

2.1 基本资料比较

三组间年龄和性别比较差异没有统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 各组研究对象年龄和性别比较

2.2 各组AFP、GGT、AST/ALT检测结果比较

肝细胞癌组、肝硬化组AFP、GGT、AST/ALT均明显高于健康体检组(P＜0.05)，见表2。

表2 不同组别中 GGT、AFP、AST/ALT 的四分位数比较［M(P25-P75)］

2.3 AFP、GGT、AST/ALT在肝细胞癌中诊断效能评价

2.3.1 GGT、AFP、AST/ALT诊断肝细胞癌的受试者工作曲线分析

单独检测时AFP的ROC曲线下面积AUC(95% CI)最大，为0.840(95% CI 0.781-0.899)，差异具有统计学意义(P＜0.05)。联合检测时，AFP+GGT+AST/ALT的AUC最大，为0.953(95% CI 0.926-0.981)(见表3、图1、图2)。

表3 GGT、AFP、AST/ALT单独及联合检测诊断肝细胞癌的AUC(95% CI)对比

图1 单独检测诊断肝细胞癌的ROC曲线分析

图2 联合检测诊断肝细胞癌的ROC曲线分析

2.3.2 AFP、GGT、AST/ALT的约登指数比较

AFP、GGT、AST/ALT约登指数最大值对应的诊断临界值以及此时的敏感度和特异性，见表4。

表4 GGT、AFP、AST/ALT 诊断HCC时的约登指数比较

2.3.3 AFP、GGT和AST/ALT诊断肝细胞癌的相关性分析

所有研究对象在Spearman 秩相关分析中，AFP、GGT和AST/ALT三项指标之间都具有相关性，见表5。

表5 AFP、GGT和AST/ALT诊断肝细胞癌的相关性分析

3 讨论

肝细胞癌（HCC）是最常见的肝癌类型[4]，其主要风险因素是乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染以及过量饮酒和黄曲霉毒素B1暴露，发病率和病死率较高，约占原发性肝癌的90%[5]。每年新增的HCC确诊病例大约有50多万例，筛查和早期诊断是降低肝癌高死亡率的关键。磁共振成像等成像技术和AFP等肿瘤标记物是目前推荐的非侵入性诊断方法。AFP属于血清蛋白家族，是最早发现的蛋白肿瘤标志物之一，也是诊断HCC的主要血清学标志物[6]，通常认为人类的AFP病理阈值为血浆浓度20ng/mL，血浆浓度400 ng/mL以上是肝癌的可靠诊断指标。HCC患者AFP血浆水平和HBV感染、肿瘤较大、细胞分化不良和血管侵犯正相关。肿瘤进展过程中AFP升高，在转移性肿瘤患者中检测到最高水平[7]。然而，肝癌诊断和很多循环肿瘤标记物一样面临敏感性和特异性的双重问题，AFP不仅在肝癌患者中上升，慢性肝病，胃肠道肿瘤，生殖器官恶性肿瘤患者以及妊娠期女性中也可以观察到AFP增加，尤其是，AFP在慢性乙型肝炎患者中阳性率为30%，乙型肝炎后肝硬化患者中阳性率为34%，这表明其特异性不高[8]。高达40%的肝癌患者尤其是疾病早期患者中，AFP结果为阴性，这反映了其低敏感性[9]。除此之外，肝癌的筛查还存在检测到的肿瘤通常预后不良，治疗方法极少的问题。

有研究指出，即使慢性乙型肝炎和乙肝后肝硬化患者AFP检测结果为阴性，GGT、AST/ALT＞1（即AST＞ALT）升高时，也要警惕肝细胞癌的发生。GGT、AST/ALT在肝脏疾病筛查中属于重要酶学指标，在各种肝脏疾病诊断中具有重要价值[10]。此次研究结果显示，肝细胞癌、肝硬化患者血清AFP、GGT、AST/ALT明显高于健康体检对照者。AFP、GGT、AST/ALT在鉴别诊断肝细胞癌与非肝细胞癌之间具有重要意义,且三者之间存在明显相关性，此外，三项指标联合检测具有最佳诊断性能。GGT广泛存在于人体的各组织脏器中，血清GGT大部分来源于肝脏，GGT水平在肝癌以及肝内阻塞患者中都会显著上升，癌细胞也合成GGT。但是，GGT在肝细胞癌诊断中假阳性率很高，胆囊炎，胆结石[10]，胰腺肿瘤或硬化性胆管炎，急慢性肝炎以及肝硬化患者中也有可能升高。ALT主要存在于肝细胞的非线粒体中，在肝脏、肾脏、心脏、骨骼肌中含量依次递减。而大约80%的AST存在于肝细胞的线粒体中，AST含量上升，通常反映更加严重的肝脏损伤。患有肝细胞癌的患者由于癌细胞的侵袭，正常的肝细胞受到损害，ALT和AST水平升高，并且AST/ALT比值通常＞1。研究报道，结合分析血清GGT水平和AST/ALT对肝细胞癌具有重要的诊断价值[11]。增加AST/ALT可有效消除胆囊炎，胆结石，胰腺肿瘤和硬化性胆管炎引起的假阳性，提高诊断准确性。这也和此次研究相似，三项联合检测时诊断性能最佳。总之，AFP结合分析血清GGT活性和AST/ALT可有助于早期诊断肝细胞癌及早期诊断AFP阴性的肝细胞癌和健康体检者的自我监控。但由于本次研究纳入的研究对象地区比较局限，人数较少，往后还需要进一步实验研究探讨出HCC诊断的最佳依据。