不同厂家EB 病毒血清抗体试剂盒对鼻咽癌检测的效果比较

蔡秀萍 蔡伟鹏

(1 广州中医药大学第三附属医院检验科 广东 广州 510378)

(2 中山大学孙逸仙纪念医院检验科 广东 广州 510120)

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是我国南方地区，特别是广东地区高发的头颈部恶性肿瘤。由于其发作隐匿，表现不典型，发现时患者大多已经处于晚期或末期。而在鼻咽癌的早期，5 年生存率可高达95%[1]。EB 病毒（Epstein-Barr virus，EBV）的感染已被证实与鼻咽癌的发生和发展密切相关，EBV 相关抗体已成为鼻咽癌重要的无创性血清标志物，常规用于高危人群筛查，国内上市的 EBV 血清抗体检测试剂盒以酶联免疫吸附法(ELISA)为主。然而，市场上的检测试剂盒品种众多，每个类别有多个厂家的产品可供选择。因此，本文对来自于不同厂家的EBV 血清抗体EAIgA、VCA-IgA 检测试剂盒诊断鼻咽癌的准确度、诊断价值进行了评价和比较，以期为相关试剂盒在临床使用选择和性能改进提供相关的依据。

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集来自中山大学孙逸仙纪念医院2017 年4 月—2017 年12 月在门诊和住院部经病理检查确诊为鼻咽癌的患者血清标本56例，本院同期健康体检者的血清标本20例，年龄为25～65岁，其中男性51 例，女性25 例。

1.2 试剂和仪器

A、B、C 厂家的EB 病毒抗体EA-IgA、VCA-IgA 试剂；D、E厂家的EB 病毒抗体VCA-IgA 试剂。所有厂家的试剂均在有效期内使用。检测方法均为ELISA。检测仪器为MULTISKAN MK3 酶标仪(芬兰雷勃)，HHB 型电热恒温温育箱(广州)。

1.3 检测方法

实验操作严格按照说明书进行，常规条件下进行测定。以病理活检诊断结果作为金标准进行判断，如果病理检测结果为鼻咽癌阳性，实验试剂检测也为阳性时则判为真阳性，如果病理检测为阳性，而试剂检验为阴性，则判断为假阴性；如果病理检测结果为阴性，该试剂检测也为阴性，则判为真阴性，如病理检测为阴性，而该试剂检验为阳性，则判断为假阳性。灵敏度=真阳性/病理阳性×100%，特异度=真阴性/病理阴性×100%，准确度=（真阳性+真阴性）/检测数×100%。随机选择20%血清样品（16 个样品）重复实验。

1.4 统计学方法

使用 Microsoft Excel 整理数据，计算检测结果的准确度。应用MedCalc 和GraphPad Prism 6.0 软件进行ROC 曲线分析，并进行统计学检验（准确度为卡方检验，AUC为z检验）。P ＜0.05定义为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 EB 病毒抗体检测试剂盒检测结果与临床病理活检结果比较

A、B、C 三厂家EA-IgA 检测试剂盒诊断NPC 的阳性率分别为71.429%，53.571%，80.357%，准确度分别为78.947%，65.789%，84.211%，差异有统计学意义（P=0.023），C 试剂盒准确度最高，A 次之，B 最差。5 家VCA-IgA 检测试剂盒产品间的准确度差异无统计学意义（P=0.163），对诊断NPC 的阳性率分别为92.857%，92.857%，87.500%，89.286%，78.571%，准确度分别为92.105%，93.421%，86.842%，88.158%，81.579%，五家产品对诊断NPC 的准确度均高于80%，见表1。

2.2 EB 病毒抗体检测试剂盒诊断的准确性

各厂家试剂盒对NPC 的诊断价值各有不同。EA-IgA 三家厂家的检测试剂盒AUC 均大于0.9，均具有较好的诊断价值，三家试剂盒两两间AUC 差异无统计学意义（P ＞0.05）。VCA-IgA 五家试剂盒两两间AUC 差异均无统计学意义（P ＞0.05），见表2。

表1 EB 病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的检测结果[n（%）]

表2 EB 病毒抗体检测试剂盒诊断鼻咽癌的ROC 参数

3.讨论

鼻咽癌（NPC）是一种起源于鼻咽部上皮细胞的恶性肿瘤，地理分布独特，在大部分地区是一种较为罕见的癌症，但在东南亚和中国南方，其发病率特别高[2]。目前认为，它的致病原因主要包括环境因素、遗传易感以及EB 病毒感染。而EB 病毒感染是主要的原因，它在逃避宿主免疫监视中，能够通过获得抗逆性表型而在体内具有选择性生长的能力[3]。Ji 等[4]在一项长达15 年的大规模随访研究中发现，在鼻咽癌临床发现的前几年，EB 病毒IgA 抗体的水平就持续升高，可以作为血清标志物，利于NPC 早期检测。另一项研究也同样发现，针对EB 病毒的IgA 抗体可以识别高危人群，并且可以有效筛查早期无症状的NPC 患者[5]。EB 病毒血清抗体的检测包括IgG 和IgA 抗体，而IgG 抗体是一种较为丰富的全身性抗体，主要反映患者长期暴露于高度流行的EB 病毒病原体下，而不能很好的区分鼻咽癌和非鼻咽癌；IgA 抗体是近期的病原体暴露在粘膜表面而产生的寿命较短的抗体，为一线鼻咽癌风险评估的有利血清学标志物，故我们的研究主要针对IgA 抗体试剂盒的比较。目前，改善NPC 流行地区患者整体预后的最主要方法是通过大规模人群筛查，提早发现，及时治疗。而血清学抗体检查具有无创、方便、经济、快速、重复性好等特点，不同品牌试剂盒性能难免存在差异，需对不同品牌试剂进行比对分析和评估，以免影响鼻咽癌筛查和诊断的准确性。

本研究通过对市面上常用的几家不同厂家的EA-IgA、VCAIgA 试剂盒的诊断性能进行分析，发现各厂家试剂盒AUC 均大于0.8，具有较好的诊断性能。但在准确度、灵敏度和特异度上有所差异，在实际临床应用中应根据实际需要进行选择，或是通过项目组套方式，避免漏检。