XpertMTB/RIF技术在肺结核诊断及利福平耐药检测中的临床应用

刘永莉 吕正煊（通讯作者） 张凤翔

（1昆明市第三人民医院介入结核科 云南 昆明 650041）

（2昆明医学科学研究所 云南 昆明 650000）

肺结核是严重危害人类健康的呼吸道传染疾病，同时也是导致成年人的死亡的第二大感染性疾病［1］。我国肺结核病防治面临形势较为严峻，统计数据表明，我国每年新增的结核病患者中，肺结核占其40%，达到60万人，而每年死于肺结核病约15万人，高居全球第二位［2］。本研究采用痰涂片、罗氏固体培养基、BACTEC MGI T960系统、Xpert MTB/RIF系统进行活动性肺结核疾病的诊断和耐药性的检验，分析其诊断效果以及对利福平耐药性检测的意义。

1.资料与方法

1.1 资料来源与分组

随机选取2017年2月－2018年2月我院接诊的211例肺结核患者作为样本，并从中筛选出120例作为研究对象。筛选标准为：被确诊为活动性肺结核；无其他并发症；自愿参加该对比研究。其中其中对照组为进行痰涂片检测，观察组1为采用Gene Xpert MTB/RIF技术检测，观察组2为采用罗氏固体培养基法检测，观察组3为采用BAC TEC MGI T960系统方法进行检测。对比四组方法的检测效果以及对利福平耐药性检测结果。

1.2 方法

取患者晨间的口痰作为检测样本。让患者在早晨漱口后咳出浓痰，分别用于各组检测。在取痰时注意以下事项：在医生或医护人员的协助下取样取清晨的痰，因为该时间段痰量多且含菌量多；取痰时患者应漱口3遍及以上。取痰结束后对照组采用痰涂片检测，观察组1采用Gene Xpert MTB/RIF技术检测，痰样品先按1：2的比例加入处理液，涡旋振荡器上进行涡旋振荡15～30s，并放入室温静置，使其液化，再将其转移到反应试剂盒中，再将试剂盒放入GeneXpert仪器（美国Cepheid公司生产）中进行检测。观察组2使用罗氏固体培养基进行结核分枝杆菌培养；观察组3使用BD公司BACTECTM MGITTM 960系统进行检测。

1.3 疗效评定标准和观察指标

根据四组方法的检测结果，对比患者的耐药性和诊断效果。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 四组方法结核分枝杆菌检测结果，见表。

表 四组检测结核分枝杆菌结果比较（例）

2.2 利福平耐药监测结果

对38例痰涂片后呈阳性的患者进行传统药敏试验，其中利福平耐药11例（28.94%），利福平敏感27例（71.06%）；GeneXpert MT/RIF检测出对利福平耐药11例，对利福平敏感26例,。以传统药敏试验作为标准，GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药结核病的敏感性为72.72%，特异性为88.89%。

3.讨论

目前用于结核病诊断的方法有多种，痰涂片法是应用的较早的一种，其操作简单，成本低廉，在结核病诊断过程中起到了重要的作用，但其灵敏度低，特异性低，易受杂菌干扰限制了其推广应用，而罗氏固体培养基法是我国广大医院通用的方法，其敏感性和特异性较高，但缺点在于检测时间长。BACTECTM MGITTM960系统是BD公司推出的快速分枝杆菌培养、鉴定、药敏系统，其灵敏性和特异性较高，但成本较高，Gene Xpert MTB/RIF技术检测分析原理是荧光标记定量诊断技术，能够有效的检测患者的身体是否出现病变症状以及对利福平药物的耐受性进行检测，其应用越来越引起人们的注意[3-5]。

在本次研究中，通过痰涂片法、Gene Xpert MTB/RIF检测法、罗氏固体培养基法、BACTECTM MGITTM960系统检测法四组比较发现，Gene Xpert MTB/RIF检测法、罗氏固体培养基法、BACTECTM MGITTM960用于检测结核病其确诊率要远远高于痰涂片法，其检测结核分枝杆菌灵敏性依次为31.7%、48.3%、40.8%和50.0%。以传统药敏实验作为标准，Gene Xpert MTB/RIF检测法其检测利福平耐药结核病的敏感性、特异性为分别达到了72.72%和88.89%，说明其有较高的敏感性和特异性。另外，Gene Xpert MTB/RIF检测法与BACTECTM MGITTM960系统检测法有相近的灵敏度，但是，其成本远远低于与BACTECTM MGITTM960系统检测。

综上所述，针对肺结核患者在本院采用Gene Xpert MTB/RIF技术以后，相较于痰涂片诊断，其灵敏度更高，其又克服了罗氏固体培养基法检测时间长，BACTECTM MGITTM960系统检测成本高昂等特点，值得在临床应用。