甘油磷脂酰胆碱含量测定方法的改进

黄祥元　唐伟　蒋艾青

【摘 要】改进甘油磷脂酰胆碱原料中甘油磷脂酰胆碱含量测定方法，将3%的醋酸汞溶液改为冰醋酸。用高氯酸滴定液（0.1mol/L）进行滴定，用电位法指示滴定终点。甘油磷脂酰胆碱在0.16g～0.24g范围内成良好的线性关系（r=0.9999），平均回收率为99.51%（n=6，RSD=0.16%）。该方法操作简单、专属性强、准确可靠，可用于甘油磷脂酰胆碱原料的含量测定。

【关键词】甘油磷脂酰胆碱;电位滴定法;含量测定

中图分类号： TQ646;O655.2 文献标识码： A 文章編号： 2095-2457（2019）17-0165-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.17.078

Improvement of the Method for the Determination of Glycerophosphatidylcholine

HUANG Xiang-yuan TANG Wei JIANG Ai-qing

（Yongzhou Vocational and Technical College， Yongzhou Hunan 425000， China）

【Abstract】Animproved method for the determination of glycerophosphatidylcholine in glycerol phosphatidylcholine raw materials was developed. The 3% mercury acetate solution was replaced by glacial acetic acid. The titration was carried out with perchloric acid titration solution （0.1mol/L） and the titration end point was indicated by potentiometry. Glycerophosphatidylcholine showed a good linear relationship in the range of 0.16g-0.24g （r=0.9999）， with an average recovery of 99.51% （n=6， RSD=0.16%）. The method is simple， specific， accurate and reliable， and can be used for the determination of glycerophosphatidylcholine.

【Key words】Glycerol phosphatidylcholine; Potentiometric titration; Content determination

甘油磷脂酰胆碱（Glyceryl phosphoryl choline，GPC）为体内天然存在的水溶性磷脂代谢产物，它主要由胆碱、甘油和磷酸构成，其分子式为C8H20NO6P。根据报道，甘油磷脂酰胆碱是乙酰胆碱和磷脂酰胆碱的前体，并且在治疗帕金森疾病、脑部损伤、动脉硬化、类风湿以及老年记忆力衰退方面具有重要的医药价值。为了革除汞盐的使用，本试验对甘油磷脂酰胆碱含量测定方法进行了改进，仅将样品制备中3%的醋酸汞溶液改为冰醋酸，试验结果表明，改进的方法操作简单、专属性更强、结果准确可靠。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器：785DMP电位滴定仪，玻璃-饱和甘汞电极、AG135电子天平。

试剂：高氯酸、冰醋酸、醋酸酐，均为分析纯;甘油磷脂酰胆碱原料3批由厂家提供（批号为20170801、20160802、20160803）。

1.2 高氯酸标准溶液配制

按GB/T 601-2002，配制0.1mol/L高氯酸标准溶液。

1.3 供试品溶液的制备与滴定方法

供试品溶液的制备：取本品约0.2g，精密称定，置100ml烧杯中，加冰醋酸10ml与醋酸酐40ml，搅拌使溶解，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于25.72mg的甘油磷脂酰胆碱。

样品滴定方法[4]：取本品约0.2g，精密称定，置100ml烧杯中，加冰醋酸10ml与醋酸酐40ml，搅拌使溶解。搭建试验装置，固定好酸式滴定管，将混合均匀的样品溶液放置在磁力搅拌器上，放入磁力搅拌器并插入玻璃复合电极，开启搅拌器开关，待pH计读数稳定后，开始滴定。每加入一定量滴定液需待电位稳定后方可记录电位数值。为保证试验数据的准确性，每次滴定的高氯酸标准溶液体积不宜过大。本试验中，开始先以每次1mL的速度加入标准溶液，当接近滴定终点时，减少为每次0.1mL。记录每次滴加高氯酸标准溶液后滴定管的读数V（mL）及测量的电位值E（mV）。

1.4 空白试验

精密量取冰醋酸10ml与醋酸酐40ml，置100ml烧杯中，将其混合后，采用1.3中样品滴定方法滴定，记录试验数据。

2 结果与讨论

2.1 空白试验

精密量取冰醋酸10ml与醋酸酐40ml，置100ml烧杯中，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，结果空白消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）的体积为0.02ml，结果表明空白试验无干扰。

2.2 线性关系考察

精密称取甘油磷脂酰胆碱原料（批号20170801）0.16g、0.18g、0.20g、0.22g、0.24g，照“1.3”项下的方法制备供试品溶液，用电位滴定法分别测定其含量，以取样量（g）为横坐标，消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）体积数（ml）为纵坐标进行线性回归，结果见表1。

通过表数据表明：甘油磷脂酰胆碱在0.16g～0.24g范围内，其取样量与消耗滴定液体积数成良好的线性关系。

2.3 精密度试验

精密称取甘油磷脂酰胆碱原料（批号20170801）0.2g，6份，照“1.3”项下的方法制备供试品溶液，用电位滴定法分别测定其含量（按干燥品计算），结果见表2。

通过上表试验结果表明：电位滴定法测定甘油磷脂酰胆碱含量，精密度良好。

2.4 稳定性试验

精密称取甘油磷脂酰胆碱原料（批号20170801）0.2g，6份，照“1.3”项下的方法制备供试品溶液，分别于0h、2h、4h、8h测定其含量（按干燥品计算），结果见表3。

通过上表试验数据表明：供试品溶液在8h内含量测定基本稳定，本方法有良好的稳定性。

2.5 回收率试验

取已知含量为98.87%的甘油磷脂酰胆碱原料（批号20170801），精密称定，6份，分别加入甘油磷脂酰胆碱对照品，照“1.3”项下的方法制备供试品溶液，按上述方法测定其含量，计算回收率，结果见表4。

通过上表试验数据表明：本方法回收率良好。

2.6 样品测定

精密称取3批甘油磷脂酰胆碱原料各0.2g，分别置100ml烧杯中，各加冰醋酸10ml与醋酸酐40ml，搅拌使溶解，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，用电位法指示终点，并将滴定的结果用空白试验校正，测定结果见表5。

3 结论

本试验只是在原参考文献试验[4]的基础上，将3%的醋酸汞溶液改为冰醋酸，结果与原方法相比，本方法滴定突跃更明显。参考非水溶液滴定法（中国药典2010年版二部附录VII B）可知，通常氢氯酸盐应加入醋酸汞试液滴定，而甘油磷脂酰胆碱非氢氯酸盐，故可直接滴定，有效地革除了汞盐的使用，大大降低了对人体的危害及对环境的污染，试验证明，该方法重复性好，稳定性好，准确度高。

【参考文献】

[1]刘丹，张康逸，等.非水点位滴定法测定甘油磷脂酰胆碱[J].中国油脂.2012，37（3）：82-84.