胃癌组织中BTG2蛋白的表达及其临床意义

郑艳红　刘文文　林建波　曹璋

【摘 要】目的：探讨BTG2基因在胃癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学染色法检测76例胃癌组织及癌旁组织中BTG2表达情况，结合胃癌患者临床资料分析BTG2表达与胃癌临床病理参数之间的关系。结果：BTG2在胃癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为39.47%和76.32%，有统计学意义（P<0.05）；BTG2表达水平与患者年龄、性别、病理分化程度、肿瘤大小及部位无关，与淋巴结转移（P<0.05）有关。结论：BTG2在胃癌组织中表达降低，与淋巴转移及预后有关，BTG2可能在胃癌发展进程中发挥一定的作用。

【关键词】胃癌；BTG2；临床意义

中图分类号： R735.2 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）31-0091-003

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2018.31.043

【Abstract】Objective To investigate the expression of BTG2 in gastric cancer tissue and detect its clinical significance. Methods The expression of BTG2 in 76 cases of primary gastric cancer specimens and adjacent tissue specimens were detected by immunohistochemmistry. Results The positive expresssion rate of BTG2 was 39.47% and 76.32% in gastric cancer specimens and adjacent tissue specimens， respectively. Differences were statistically significant （p<0.05）. The expression levels of BTG2 were not correlated with age， gender， degree of differentiation， tumor size and location，but correlated with lymph node metastasis. Conclusion The downregulation of BTG2 is closely correlated with lymph node metastasis of gastric cancer. BTG2 may be used as a molecular marker to identify and predict the progression， metastasis of gastric cancer.

【Key words】BTG2； Gastric cancer； Clinico-pathology

胃癌是最常見的恶性肿瘤之一，严重威胁人们的身体健康。虽然近年来在西方国家胃癌的发生率有所下降，但在我国仍是最常见的消化道恶性肿瘤。据统计，胃癌居我国恶性肿瘤发病率第2位，死亡率第3位，且我国胃癌有发病率和死亡率高、早期胃癌比例低（仅约10%）、进展期病例为主等特点[1]。胃癌的发生有多个癌基因和抑癌基因参与，是一个多阶段多途径逐步演变的过程，140多种基因及其蛋白产物与胃癌的发生发展密切相关。随着分子生物学、基因学的不断发展，寻找与胃癌发生发展及预后相关的生物学指标，检测基因及其表达产物与胃癌临床病理指标的关系，有助于胃癌的早期诊断、病情判断及预后评估，并能为胃癌的靶向治疗提供方向。BTG2是B细胞易位基因2（B cell translocation gene2），是BTG基因家族成员之一，它是细胞增殖抑制基因，可以抑制多种肿瘤细胞的增殖[2-3]。有研究表明，BTG2作为靶点在胃癌细胞生长、增殖状态、细胞周期和凋亡状态和成瘤、侵袭转移能力中起着非常重要的作用[4-6]。但目前尚无其在胃癌标本中的表达情况及与胃癌临床病理关系的研究，本研究通过采用免疫组化方法检测胃癌组织及癌旁组织中BTG2的表达情况，并结合临床病理及随访资料分析，探讨其表达与胃癌的临床病理参数之间的关系。

1 资料和方法

1.1 临床资料

收集我院住院患者外科手术切除并经病理证实的胃腺癌组织标本76例，所有病例术前均未作任何放化疗及其他治疗。其中男性45例，女性31例，年龄<60岁31例，≥60岁45例。按分化程度，高分化10例，中分化腺癌19例，低分化腺癌47例。56例患者有淋巴结转移，20例患者无淋巴结转移，未侵及浆膜层48例，侵及浆膜层18例。同时76例距癌边缘2cm以上的癌旁胃粘膜作正常对照。所有标本取材后尽快用10%甲醛固定，予以常规石蜡包埋，连续4μm厚度切片。术后所有患者均有完整的临床资料和随访资料。

1.2 主要试剂与仪器

鼠抗人单克隆BTG2抗体购自美国Santa Cruz公司，第二抗体购自生物晶美工程有限公司。免疫组织化学MaxVision试剂盒购自福州迈新公司。实验皆按照试剂盒使用说明进行操作。OlympusAH-2型显微镜为日本OLYMPUS公司产品。

1.3 免疫组织化学染色

采用免疫组织化学Max VisionTM法， DAB显色试剂盒及免疫组织化学Max VisionTM试剂盒均为北京中杉公司产品。常规切片脱蜡水化，抗原修复后，其具体操作步骤按试剂盒说明书进行，DAB显色及苏木精复染，脱水后中性树胶封片。

1.4 结果判定

镜下观察胞质和胞膜内出现棕黄色颗粒为蛋白表达，以两种计分方法相结合来进行阳性结果判定，（1）以10个高倍视野内阳性细胞的百分比计分：无阳性细胞记0分，阳性细胞率<25%记1分，阳性细胞率26%～50%记2分，阳性细胞率>51%记3分。（2）以染色强度计分：细胞不着色记0分，黄色记1分，棕黄色记2分，黄褐色记3分。采用二级计分法，两项分值相加，≥3分视为BTG2蛋白表达阳性，<3分则视为BTG2蛋白表达阴性。

1.5 统计学分析

采用SSPS19.0统计软件进行统计学分析，计数资料用χ2检验，计量资料采用t检验，等级分组资料采用秩和检验，相关性检验用Pearson法。以P<0.05为组间差异有统计学意义。

2 结果

（1）BTG2蛋白在胃癌与癌旁组织中的表达 免疫组化结果显示76例胃癌组织中30例BTG2蛋白表达阳性， 阳性表达率39.47%，76例癌旁正常组织中58例表达阳性，阳性表达率76.32%。胃癌组织中BTG2蛋白的表达低于癌旁组织的表达，差异有统计学意义（P<0.05）。

（2）BTG2蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系 BTG2在不同年龄、性别、分化程度、肿瘤大小、发病部位胃癌患者间的表达差异无统计学意义（P>0.05），而在有无淋巴结转移胃癌患者间的表达差异有统计学意义（P<0.05，表1）。

3 讨论

胃癌是普外科临床常见的消化道恶性肿瘤，近年来，胃癌的早期诊断及治疗技术水平明显提高，但80%患者就诊时已到晚期，现有治疗手段有限，单纯手术治疗后的总体生存率为20%左右，总体疗效仍然较差，仍然是我国造成癌症相关死亡的常见原因[7]。胃癌的发生是从正常胃粘膜上皮发生慢性胃炎到胃癌前病变，经过一系列基因突变导致胃癌发生，其病因及其发病机制尚未阐明，现认为其发生发展过程涉及多种基因的激活与失活，引起相应表达产物蛋白质的质或量发生改变，细胞凋亡失去控制，发生癌变并进一步侵袭转移，而浸润和转移是晚期胃癌最显著的病理学特征，与患者预后直接相关[8]。隨着肿瘤分子生物学的发展，胃癌的分子靶向治疗和个体化治疗被认为是提高生存率的重要措施[9]。因此，有必要对胃癌相关的基因及其表达产物进行研究，明确其与胃癌临床病理特征的关系，有助于发现指导胃癌靶向治疗和个体化治疗的分子标记物。

BTG2基因是B细胞转移因子家族成员之一，由158个氨基酸残基组成，目前国内外研究结果表明，B细胞转移因子家族成员包括BTG2具有抑制细胞增殖、促进细胞成熟分化、促进细胞凋亡、调解细胞周期进程的功能，但其具体调控机制尚未形成明确结论[10-13]。研究表明，BTG2在肠癌、肝癌、喉癌细胞中表达显著降低，并和肿瘤的临床病理参数具有相关性[12， 14]。本研究验证了BTG2蛋白在胃癌组织及癌旁组织的表达程度及其与临床病例特征的关系。

本研究通过免疫组化方法发现BTG2蛋白在胃癌组织及癌旁组织中有不同程度的表达，在胃癌组织中的表达显著减低，胃癌组织中BTG2蛋白表达呈阴性，而对照组癌旁组织中患者BTG2蛋白表达呈阳性。分析BTG2蛋白表达水平变化与临床病理参数之间的关系时发现，其表达与胃癌患者年龄、性别、分化程度、肿瘤大小及部位无关，而与胃癌淋巴结转移有关，BTG2蛋白表达缺失可能促进胃癌淋巴结转移。综上所述，BTG2作为一个候选抑癌基因，其蛋白在胃癌组织中缺失表达可能参与胃癌的进展。

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