木醋液与杀菌剂复配对番茄枯萎病和灰霉病的防治效果

肖辉　程文娟　张鹏　张慧　焦汝民　王立艳　赵杰　潘洁

摘要：为明确木醋液对番茄枯萎病和灰霉病的防治效果及其在杀菌剂减量施用方面的作用，通过抑菌圈法和室内盆栽试验，研究木醋液及其与苯甲·多菌灵、腐霉利等杀菌剂配施对番茄枯萎病和灰霉病的防治效果。结果表明，木醋液小于500倍的稀释液对番茄枯萎病病菌、灰霉病病菌菌丝生长均具有显著的抑制作用，100倍稀释液抑菌率分别达85.82%、90.97%;木醋液对番茄枯萎病菌的EC50、EC90分别为4.07、12.22μg/mL，对番茄灰霉病病菌的EC50、EC90分别为3.87、10.62μg/mL，木醋液对番茄灰霉病菌抑制效果好于对枯萎病菌的抑制效果;木醋液小于300倍的稀释液对盆栽番茄枯萎病、灰霉病均具有显著的预防和治疗作用，预防效果好于治疗效果。木醋液与农药配施可提高杀菌剂对番茄枯萎病、灰霉病的防治效果;所选杀菌剂减量20%与木醋液300倍液配合使用，对番茄枯萎病菌、灰霉病菌抑菌率分别达91.43%、70.65%，对番茄枯萎病、灰霉病的预防性防治效果分别为69.62%、74.38%，治療效果分别为64.67%、69.33%，均与农药不减量处理差异不显著。结果表明，木醋液对番茄枯萎病、灰霉病具有很好的防治作用，并且与农药配施可降低农药使用量。

关键词：木醋液;番茄枯萎病;番茄灰霉病;农药减量;防治效果

中图分类号：S436.412文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2021）01-0082-06

作者简介：肖辉（1981—），男，山东泰安人，硕士，副研究员，主要从事农业生态环境研究。E-mail：xiaohui-81@163.com。

设施蔬菜生产属于高投入高产出的集约化种植模式，农药使用量大，是大田作物的十几倍甚至几十倍[1]，农药在保障蔬菜丰产的同时，也存在很多风险，如导致农产品农药残留、致病菌抗药性增加、生态环境污染等，严重威胁人类食品安全和健康[2]。因此，开发农药替代品，减少化学农药使用量，是现代农业发展的必然选择。

木醋液是农林废弃物（秸秆、树枝、木屑等）高温裂解产生的烟气经冷凝形成的一种液体物质，该物质含有酸、醇、酚、酯等有机成分[3]，在农业生产上具有促进植物生长、改善农产品品质，改良土壤、抑菌杀虫等功效。日本在20世纪60年代就开始木醋液的应用研究，现已开发出多种木醋液专用产品[4]。而该类研究在我国起步于20世纪80年代，主要集中于木醋液的精制[5]、成分分析[6-7]、农业增产提质[8-9]、抑菌抗病[10]等方面。王海英等的研究表明，木醋液具有广谱抑菌作用，且对细菌抑制作用要好于对真菌抑制作用[11]。徐岩岩等的研究表明，5%的精制山杏壳木醋液浸种既能有效降低甜瓜细菌性果腐病的发生率，又能促进甜瓜幼苗的生长[12]。李燕等的研究表明，当木醋液浓度为0.1%时对腐霉菌菌丝生长的抑制率可达84.28%[13]。前人已在木醋液抑菌抗病方面做了大量研究，但对于木醋液及其与杀菌剂配施对植物病原菌抑制效果的报道较少。

枯萎病和灰霉病是番茄常见病害，番茄枯萎病是由尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporumf.sp.lycopersiciSnyderetHansen）引起的一种重要的土传病害[14]，该病原菌从根部侵入，侵染性极强[15];番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌（BotrytiscinereaPers.）引发的一种真菌病害，可危害番茄的茎、叶、花和果实[16]，2种病害都会严重降低番茄的产量和品质。当前主要依靠化学药剂进行防治，但长期高频率地大量用药会导致田间病原菌抗药性增强，药剂防效下降，农田生态系统环境污染风险增加。

木醋液具有杀菌抗病作用，如能部分替代农药进行番茄枯萎病和灰霉病的防治，将对降低农药使用量、保障食品安全起到积极的支撑作用。本研究以番茄根部的枯萎病和地上部的灰霉病为对象，采用抑菌圈法和盆栽试验研究木醋液及木醋液与农药配施对2种病害的防治效果，以期为木醋液植物病害防治及杀菌剂减量应用提供依据。

1材料与方法

1.1试验材料

供试番茄枯萎病菌（Fusariumoxysporumf.sp.lycopersiciSnyderetHansen）、灰霉病菌（BotrytiscinereaPers.），由天津市农业科学院植物保护研究所提供;培养基为PDA培养基（马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL）。

供试木醋液由松树锯末450℃干馏，裂解气体冷凝、纯化得到棕黄色液体，pH值为2.7，乙酸含量为20.7%。

供试农药：20%苯甲·多菌灵悬浮剂，陕西汤普森生物科技有限公司生产;50%腐霉利可湿性粉剂，日本住友化学株式会社生产。

供试番茄品种为金冠5号。

试验时间：2018年11—12月;试验地点：天津市农业资源与环境研究所微生物实验室。

1.2试验方法

1.2.1室内抑菌试验

采用菌丝生长速率法。木醋液抑菌试验设5个处理，分别为CK（清水），木醋液100、300、500、1000倍稀释液。每个处理重复4次。木醋液与农药配施抑菌试验设6个处理，分别为CK;T1：农药（枯萎病为苯甲·多菌灵2000倍液;灰霉病为腐霉利300倍液）;T2：木醋液300倍液+农药;T3：木醋液300倍液+农药减量20%（在T1的基础上减量，即2400倍液，下同）;T4：木醋液300倍液+农药减量40%;T5：木醋液300倍液+农药减量60%。每个处理重复4次。

含药PDA平板的制作：加热PDA培养基至熔化后按试验设计比例添加药液，培养基与药液比例为9∶[KG-*3]1，倒入直径9cm的培养皿中，凝固后用直径5mm打孔器在菌落边缘打取菌饼，每个平皿中接种2块菌饼，带菌面朝下，盖上皿盖，置于培养箱中25℃恒温培养。当对照菌斑直径达到皿2/3时，用游标卡尺测量各处理菌落直径，计算抑菌率，并将抑菌率转化为机率值，将剂量取对数，求出毒力回归方程，并计算EC50、EC90。

番茄灰霉病菌于2018年11月10日接种，11月13日测定;番茄枯萎病菌2018年11月10日接种，11月15日测定。

抑菌率=（对照菌落生长直径-处理菌落生长直径）/（对照菌落生长直径-菌饼直径）×100%。

1.2.2盆栽试验

木醋液对番茄枯萎病、番茄灰霉病的预防和治疗试验设5个处理，分别为CK：对照（清水）;T1：木醋液100倍稀释液;T2：木醋液300倍稀释液;T3：木醋液500倍稀释液;T4：木醋液1000倍稀释液。每个处理重复4次。

木醋液与20%苯甲·多菌灵悬浮剂配施预防和治疗番茄枯萎病设6个处理，分别为CK：对照（清水）;T1：苯甲·多菌灵2000倍稀释液;T2：木醋液300倍稀释液+苯甲·多菌灵2000倍稀释液;T3：木醋液300倍稀释液+苯甲·多菌灵减量20%（在T1的基础上减量，下同）;T4：木醋液300倍稀释液+苯甲·多菌灵减量40%;T5：木醋液300倍稀釋液+苯甲·多菌灵减量60%。每个处理重复4次。

木醋液与50%腐霉利可湿性粉剂配施预防和治疗番茄灰霉病试验设计同上，腐霉利为300倍稀释液。

1.2.2.1枯萎病预防试验盆栽番茄苗期5～6张叶时按试验设计，每株5mL药液，灌根处理番茄苗，24h后灌根接种5mL番茄枯萎病菌孢子悬浮液（5×106CFU/mL）。每处理重复4次。在温度为28℃、相对湿度80%条件下培养14d。调查发病情况。

1.2.2.2枯萎病治疗试验每株番茄苗灌根接种5mL番茄枯萎病菌孢子悬浮液（5×106CFU/mL），24h后，用灌根方式每株苗施入5mL药液。每处理重复4次。在温度28℃、相对湿度80%条件下培养14d。调查发病情况。

1.2.2.3灰霉病预防试验盆栽番茄苗期5～6张叶时按试验设计，叶面喷施药液，叶面无残留后24h，接种病菌（1×105～1×106CFU/mL分生孢子悬浮液，叶面喷雾）。每处理重复4次。在温度为28℃、相对湿度90%条件下培养14d。调查发病情况。

1.2.2.4灰霉病治疗试验盆栽番茄苗期5～6张叶时，叶面喷雾接种病菌（1×105～1×106个/mL分生孢子悬浮液），24h后，按试验设计，叶面喷施药液，每处理重复4次。在温度28℃、相对湿度90%条件下，培养14d。调查发病情况。

2018年11月19日，枯萎病、灰霉病预防试验灌溉或喷施药液，治疗试验接种病原菌;11月20日，枯萎病、灰霉病预防试验接种病原菌，治疗试验灌溉或喷施药液;2018年12月4日，调查发病情况。

枯萎病分级标准[17]如下，0级：无症状;1级：1或2张叶子明显变黄以致脱落;2级：3或4张真叶变黄，叶片萎蔫下垂;3级：5或6张真叶变黄，或真叶萎蔫下垂;4级：全株严重萎蔫以致枯死。计算病情指数和防治效果。

灰霉病分级标准参照GB/T17980.28—2000《农药田间药效试验准则》，0级：无病斑;1级：单叶片有病斑1～3个;3级：单叶片有病斑4～6个;5级：单叶片有病斑7～10个;7级：单叶片有病斑11～20个，部分密集成片;9级：单叶片有病斑密集占叶面积1/4以上。计算病情指数和防治效果。

病情指数=∑（各级病叶数（株数）×相对病级值）/（调查总叶数（总株数）×最高代表极值）×100。

防治效果=（空白对照的病情指数-药剂处理后的病情指数）/空白对照病情指数×100%。

1.2.3数据处理

采用SPSS20.0进行数据统计分析处理，LSD法进行显著性检验（P<0.05）。

2结果与分析

2.1木醋液对番茄枯萎病、灰霉病的防治效果

2.1.1不同浓度木醋液对番茄枯萎病菌和灰霉病菌的抑制作用

木醋液对番茄枯萎病和灰霉病病菌菌丝生长均有很好的抑制作用（表1），枯萎病菌菌落直径木醋液100倍稀释液<300倍稀释液<500倍稀释液<1000倍稀释液≈对照，表明木醋液稀释倍数越小抑菌效果越明显，稀释倍数小于500倍时，对枯萎病菌具有显著的抑制效果，其中木醋液100倍液（T1处理）的抑菌率可达85.82%。通过毒力回归方程计算得出，EC50为4.07μg/mL，EC90为12.22μg/mL。木醋液稀释倍数小于500倍时对番茄灰霉病菌具有显著的抑制效果，且稀释倍数为100倍时，对番茄灰霉病菌抑菌率达到90.96%，EC50为3.87μg/mL，EC90为10.62μg/mL。木醋液对番茄灰霉病菌和枯萎病菌抑菌效果也存在差异，木醋液稀释100倍时对灰霉病菌的抑制率要比枯萎病菌抑制率高5.14百分点，且EC50、EC90分别低4.94%和13.07%，表明木醋液对番茄灰霉病菌抑制效果要好于对枯萎病菌的抑制效果。

2.1.2木醋液对番茄枯萎病及灰霉病的防治作用

盆栽试验结果显示，木醋液对番茄枯萎病和灰霉病具有很好的预防和治疗作用（表2），且木醋液100倍和300倍稀释液的防治效果均显著高于500倍、1000倍稀释液和CK的防治效果，表明木醋液稀释倍数小于300倍时，对番茄枯萎病和灰霉病均具有预防和治疗作用。而且，木醋液100倍和300倍稀释液对枯萎病的预防效果分别比治疗效果高12.77、4.54百分点，表明木醋液对枯萎病的预防作用要高于治疗作用，对灰霉病的防治作用也表现出同样趋势。木醋液100、300、500、1000倍稀释液对灰霉病的预防效果分别比对枯萎病的预防效果高8.40、14.91、2.72、1.34百分点，比治疗效果上也分别高出了10.62、11.86、3.39、4.24百分点，表明木醋液对灰霉病和枯萎病的预防作用要好于其治疗作用，且对灰霉病的防治效果高于对枯萎病的防治效果。

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