干燥综合征患者肺功能与血小板活化之间的关系

刘健,章平衡,万磊,黄旦,黄传兵,张晓军,孙玥,刘磊

(安徽中医药大学第一附属医院风湿科，合肥 230031)

·论著·

干燥综合征患者肺功能与血小板活化之间的关系

刘健,章平衡,万磊,黄旦,黄传兵,张晓军,孙玥,刘磊

(安徽中医药大学第一附属医院风湿科，合肥 230031)

目的探讨干燥综合征患者肺功能与血小板活化之间的关系。方法选取干燥综合征患者66例设为观察组，同时选取健康体检者30例设为对照组。采用肺功能仪检测患者肺功能，流式细胞术检测外周血血小板分化抗原CD40 配体(CD40L)表达，魏氏法检测血小板(PLT)，ELISA试剂盒检测血小板活化因子(PAF)、血小板α颗粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血小板源性生长因子(PDGF)的水平。结果与对照组相比较，观察组肺功能参数明显降低，PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平明显升高(Plt;0.05)；在观察组患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能异常率最高为75%肺活量位的最大呼气流量(FEF75)，其次是FEV1/ FVC、50%肺活量位的最大呼气流量(FEF50)、25%肺活量位的最大呼气流量(FEF25)、呼气峰流速值(PEF)。与不伴肺功能降低的SS组比较，伴肺功能降低的观察组的PLT、PAF、PDGF水平明显升高(Plt;0.05)。相关性分析显示：SS患者FEV1/ FVC与PDGF呈负相关，FEF25与CD40L呈负相关(Plt;0.01)，FEF50与PAF、GMP-140呈负相关(Plt;0.05，Plt;0.01)，FEF75、PEF与PLT呈负相关(Plt;0.05，Plt;0.01)。结论干燥综合征患者存在肺功能降低，且肺功能降低与血小板活化及其活化产物的水平密切相关。

干燥综合征;呼吸功能试验；血小板活化

干燥综合征(SS)是一种慢性炎症性自身免疫性疾病，主要为外分泌腺体的分泌功能损害，故又名自身免疫性外分泌病[1]。其临床表现主要为口眼干燥、猖獗性龋齿、间歇性交替性腮腺肿痛等。并且常出现其他外分泌腺及腺体外其他脏器受累导致多系统损害的症状。其中以肺间质病变最为常见，肺间质病变是SS临床分期、疾病评估、治疗预后的重要指标[2-3]。SS继发肺间质病变临床表现之一是肺功能水平的降低，因此，应及早进行肺功能水平的检测，及时诊断，并予以早期治疗。研究发现，在干燥综合征患者体内存在着血小板(PLT)参数的异常，并且还出现血小板活化因子(PAF)的水平升高[4]。本研究通过观察SS患者肺功能水平与血小板活化产物PAF、血小板α颗粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血小板源性生长因子(PDGF)、血小板分化抗原CD40配体(CD40L)表达的水平的变化，以期探讨SS肺功能降低与血小板活化之间存在的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2014年3月至2015年4月在安徽中医药大学第一附属医院风湿科门诊及住院治疗的66例SS患者作为观察组(SS组)。其中男4例，女62例;年龄31～74岁，平均(53.5±11.6)岁；病程1～24年，平均病程(11.3±7.8)年。另从安徽中医药大学第一附属医院体检中心选取30例经体检和免疫学检查排除自身免疫性疾病、身体健康、无明显器质性疾病者作为健康对照组(NC组)。男3例，女27例；年龄20～70岁，平均(34.6±7.4)岁。两组在年龄、性别等方面比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)，具有可比性。

1.2 观察组纳入标准 (1)符合原发干燥综合征诊断标准；(2)年龄在30～75岁之间；(3)自愿参加本项研究，同意药物治疗方案并签署知情同意书，按医嘱服用药物，依从性好。

1.3 观察组排除标准 (1)不符合上述纳入标准者；(2)年龄小于30岁或大于75岁者；(3)长期服用慢作用抗风湿药或激素，且在本研究前至少1个月内未停用，或使用非甾体抗炎药，且在本研究前至少1周内未停用；(4)合并心血管、肺、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病；(5)精神病患者；(6)妊娠及哺乳期妇女；(7)研究者认为不宜进行此项临床试验者。

1.4 方法 检测用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、25%肺活量位的最大呼气流量(FEF25)、50%肺活量位的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量位的最大呼气流量(FEF75)和最大呼气流量(PEF)。按照ELISA试剂盒说明书操作测定PAF、GMP-140、PDGF的含量。并用SysmexXT-2000i全自动血细胞分析仪检测PLT。用流式细胞术检测CD40L表达。采集SS患者外周静脉血5 mL，肝素抗凝；取肝素抗凝的全血100 μL，加入小鼠抗人CD40L-FITC 10μL，室温闭光反应30 min；加2 mL溶血剂在室温下溶解红细胞，室温闭光约10 min；PBS洗涤2次，离心5 min(1500 r/min)，弃上清；每份标本加入0.1%多聚甲醛500 μL后用Epics XL流式细胞仪检测，用CeQuest软件分析,计算CD40L的阳性表达率。

2 结果

2.1 SS的肺功能变化 与NC组相比较，SS组肺功能参数FEV1/ FVC、FEF25、FEF50、FEF75、PEF明显降低；在SS患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能异常率最高为FEF75，其次是FEV1/FVC、FEF50、FEF25、PEF。见表1。

2.2 SS患者外周血血小板及血小板活化产物的变化 与NC组比较，SS组PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平明显升高(Plt;0.05)。见表2。

2.3 伴或不伴肺功能降低的SS患者外周血血小板及血小板活化产物的变化 与不伴肺功能降低的SS组比较，伴肺功能降低的SS组的PLT、PAF、PDGF水平明显升高(Plt;0.05)。见表3。

表1 RA患者肺功能的变化

表2 SS患者外周血血小板及血小板活化产物的变化

表3 伴或不伴肺功能降低的SS患者外周血血小板及血小板活化产物的变化

2.4 SS患者肺功能参数与血小板及血小板活化产物的相关性分析 相关性分析显示：SS患者FEV1/ FVC与PDGF呈负相关(Plt;0.05)，FEF25与CD40L呈负相关(Plt;0.01)，FEF50与PAF、GMP-140呈负相关(Plt;0.05，Plt;0.01)，FEF75、PEF与PLT呈负相关(Plt;0.05，Plt;0.01)。见表4。

表4 SS患者肺功能参数与血小板及血小板活化产物的相关性分析

注：表格内为r值；aPlt;0.05，bPlt;0.01

3 讨论

SS肺间质病变导致感染以及呼吸功能的衰竭，是其死亡的主要原因之一[5-6]。因此，早期对SS患者肺功能及其影像学的监测尤为重要。通过本研究可以发现，SS组肺功能参数FEV1/ FVC、FEF25、FEF50、FEF75、PEF明显降低；在SS患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能异常率最高为FEF75，其次是FEV1/FVC、FEF50、FEF25、PEF。FEV1/ FVC反映其限制性通气功能障碍的改变；PEF反映其阻塞性通气障碍的改变；FEF25、FEF50、FEF75反映其小气道阻塞及通气功能的减退。有报道[7]提示，结缔组织病肺间质病变可引起小气道阻塞，表现为FEF25、FEF75下降，且发生率高，本研究结果提示SS患者肺功能改变主要表现为小气道功能障碍。SS属结缔组织病范畴，病理基础是血管炎，常表现为血液黏稠度增加，血液流行缓慢，微循环障碍，皮肤血管病变[8]、血管内皮细胞损伤[9]等。在临床上还发现SS患者存在血小板的水平异常[10]。而血小板活化后可产生多种活性物质PAF、GMP-140、PDGF、CD40L。在我们的研究中发现，SS患者体内存在PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平的升高。

PAF能激活血小板、单核-巨噬细胞和中性粒细胞，还可直接作用于肺血管内皮细胞膜受体，致使血管内皮细胞的损伤[11]。肺组织可存在PDGF活性增加，从而促进肺动脉平滑肌细胞的增殖、肥大和迁移。GMP-140是一种颗粒膜蛋白。CD40L还可刺激炎症部位的单核巨噬细胞分泌血管内皮生长因子,增加血管通透性,提高炎性渗透,促进内皮细胞生长、迁移和新生血管形成[12]。当SS患者出现血管受累表现为血管炎时，肺部的血管很容易发生病变，从而出现血管内皮的损伤，导致肺功能的降低，通过我们的研究分析发现与不伴肺功能降低的SS组比较，伴肺功能降低的SS组的PLT、PAF、PDGF水平明显升高，并且通过相关性分析发现SS患者FEV1/ FVC与PDGF呈负相关，FEF25与CD40L呈负相关，FEF50与PAF、GMP-140呈负相关，FEF75、PEF与PLT呈负相关。说明血小板活化及血小板活化产物的水平升高能够导致SS患者肺功能的降低。

综上所述，SS患者不仅存在肺功能的降低，还存在血小板的活化及血小板活化产物的大量分泌，且血小板的活化及其活化产物的大量分泌与SS肺功能降低密切相关。

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Relationshipbetweenplateletactivationandlungfunctioninpatientswithsjogren′ssyndrome

LiuJian,ZhangPingheng,WanLei,HuangDan,HuangChuanbing,ZhangXiaojun,SunYue,LiuLei

(DepartmentofRheumatology，theFirstAffiliatedHospitalofAnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Hefei230031，China)

ObjectiveTo explore the relationship between platelet activation and lung function in patients with sjogren′s syndrome.MethodsSixty-six cases of SS and 30 cases of healthy control were selected.The German Jager MasterScreen automatic lung function tester was used to detect the pulmonary function parameters.Flow cytometrydetection was used to detect the CD40L.PLT was analyzed by automatic blood cell analyzer.And the levels of PAF,GMP-140 and PDGF were detected by ELISA.ResultsCompared to the NC group,pulmonary function parameters of RA were significantly decreased,but PLT,PAF,GMP-140,PDGF and CD40L were significantly increased (Plt;0.05).Forty patients with abnormal lung function,accounted for 60.61%,was observed,in which the highest abnormal lung function was FEF75,followed by FEV1/FVC,FEF50,FEF25and PEF.Compared with SS patients without lung function reduced,PLT,PAF,and PDGF were significantly increased in SS patients with lung function reduced(Plt;0.05).Spearman analysis showed that FEV1/ FVC was negatively correlated with PDGF,and FEV25was negatively correlated with CD40L(Plt;0.01),FEF75and PEF were negatively correlated with PLT(Plt;0.05).ConclusionThere is decreased lung function in patients with SS,which is closely related to platelet activation and products .

Sjogren′s syndrome；Respiratory function tests；Platelet activation

国家自然基金青年项目(81403388);安徽省自然基金项目(1508085QH159);安徽省高校自然科学基金重点项目(KJ2017A281)；安徽省重点实验室资助项目(1606c08238)

刘健，主任医师，教授，博士生导师，Email:liujianahzy@126.com

R442.8

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2017.06.008

2017-06-16)