脊痛消胶囊对神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织白细胞介素-1β、白细胞介素-6及组胺的影响

娄宏君，高曦，张燕丽，徐英杰，邢凌昊，张新

（黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040）

脊痛消胶囊对神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织白细胞介素-1β、白细胞介素-6及组胺的影响

娄宏君，高曦，张燕丽，徐英杰，邢凌昊，张新

（黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040）

目的研究脊痛消胶囊对神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）及组胺（HA）的影响。方法通过手术植入异物使神经根受到卡压的方式建立神经根型颈椎病大鼠模型，将大鼠随机分成脊痛消胶囊组（中药组）、布洛芬缓释对照组（西药组）、模型组，空白对照组，为排除手术创伤所致疼痛对实验结果的影响加设假手术组。于造模3 d后中药组和西药组分别给予不同配比的脊痛消胶囊和布洛芬混悬液灌胃；空白组、假手术组及模型对照组每日给予等量0.9%氯化钠注射溶液灌胃。观测给药后第7天和第14天分批处死实验大鼠取C5至T1脊髓组织，采用酶联免疫法检测IL-1β、IL-6、HA表达量。结果给药后第7、14天模型组大鼠脊髓组织IL-1β、IL-6、HA含量明显升高，与空白对照组比较差异有统计学意义，而中药组大鼠上述物质的表达量与模型组比较相对较少，两组比较差异有统计学意义。结论脊痛消胶囊能有效降低神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织中IL-1β、IL-6及HA的含量。

颈椎病；白细胞介素-1β；白细胞介素-6；组胺；大鼠，Wistar

神经根型颈椎病是临床的常见病，多发病［1-2］。中医药治疗该病有着确切的疗效中药在颈椎病的防治方面具有疗效肯定、毒副作用小、可长期服用等特点，在治疗本病上具有西药不可代替的优势［3-6］。脊痛消胶囊由邓福树教授根据多年临床经验，以清代王清任《医林改错》中的“补阳还五汤”加减而成，该方在临床应用明显缓解颈椎病疼痛症状，具有镇痛效果好、起效快等特点，能够很好地改善临床症状和体征，尤其对神经根型颈椎病疗效确切。为了探明该药物的对神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织IL-1、IL-6及HA的影响行实验研究，先将研究结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验动物 选取清洁雄性Wistar大鼠110只，体质量（200±10）g，该大鼠由黑龙江中医药大学动物实验中心提供（许可证号：SCXK黑2013-004）。

1.2 药品试剂 脊痛消胶囊（黑龙江中医药大学附属第一医院制剂室）；布洛芬缓释胶囊（中美天津史克制药有限公司）；硫酸庆大霉素注射液（天津药业集团新郑股份有限公司）；大鼠组胺（HA）ELISA检测试剂盒（上海研吉生物科技有限公司）；大鼠白细胞介素-1β（IL-1β）ELISA检测试剂盒（厦门慧嘉生物科技有限公司）；大鼠白细胞介素-6（IL-6）ELISA检测试剂盒（厦门慧嘉生物科技有限公司）。

1.3 造模方法 将所有动物驯养1周后，随机分成3组：空白对照组（16只）、假手术组（16只）、造模组（74只）。10%水合氯醛（4mL／kg体质量）大鼠腹腔注射，麻醉后固定俯卧位，剪毛，常规消毒，以第2胸椎棘突为标志，以C7为中心，延棘突纵形切开皮肤及皮下组织，长约3 cm，钝性分离棘突左侧肌肉，暴露棘突及椎板。用蚊式钳轻轻钳去C7左侧椎板，暴露硬脊膜，用眼科神经剥离子将脊髓轻推至右侧，再用显微外科镊夹取长约1.5 cm鱼线轻轻沿脊髓纵轴放至C5至T1神经根腋下。假手术组动物仅切开皮肤、皮下组织，钝性分离棘突旁肌肉，钳去C7左侧椎板，不插线，而后缝合，术后每只动物给予硫酸庆大霉素注射液0.4 mL／只，连续3 d，预防其伤口感染；空白组不做任何处理。

1.4 试验方法 3 d后造模组随机分成3组：脊痛消胶囊组（中药组）、布洛芬缓释组（西药组）及模型组。所有实验动物于造模后第4天开始给药（药物给予均按人与大鼠体表面积换算公式计算）。中药组：每日给予脊痛消胶囊405 mg／kg，溶于0.9%氯化钠注射溶液配成27 mg／mL混悬液，按15 mL／kg灌胃。西药组：每日给予布洛芬缓释54 mg／kg，溶于0.9%氯化钠注射溶液配成3.6 mg／mL混悬液，按15 mL／kg灌胃。空白对照组假手术组及模型组：每日给予0.9%氯化钠注射溶液15mL／kg灌胃。

1.5 统计学处理 运用SPSS17.0对数据进行分析，两组之间的比较运用配对t检验，多个均数之间比较应用S-N-K检验，组间比较采用One-Way ANOVA分析方法统计。

2 指标及结果

2.1 观察指标 于灌胃后第7天和第14天各组大鼠随机取8只，10%水合氯醛4 mL／kg体质量腹腔注射麻醉，4℃0.9%氯化钠注射溶液灌注，取C5至T1脊髓及神经根组织，称重，冰水内组织匀浆器匀浆，制成20%组织匀浆液，4℃冰箱保存，待测IL-1β、IL-6及HA。

2.2 大鼠脊髓组织IL-1β检测结果 给药后第7、14天，模型组大鼠脊髓组织IL-1β含量与空白对照组及假手术组相比明显升高（P＜0.01）；中药组大鼠脊髓组织IL-1β含量在上述两个时间点均明显低于模型组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01），与空白对照组及假手术组比较亦差异有统计学意义（P＜0.05）；中药组与西药组比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.3 大鼠脊髓组织IL-6检测结果 给药后第7、14天，模型组大鼠脊髓组织IL-6含量明显高于空白对照组及假手术组（P＜0.01）；第7、14天中药组大鼠脊髓组织IL-6含量明显低于模型组，与之比较均差异有统计学意义（P＜0.01），第14天与空白对照组及假手术组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；中药组与西药组比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.4 大鼠脊髓组织HA检测结果 给药后第7、14天，模型组大鼠脊髓组织HA含量明显高于同空白对照组及假手术组（P＜0.01）；第7、14天脊痛消胶囊组大鼠脊髓组织HA含量明显低于模型组，与之比较差异有统计学意义（P＜0.01），第14天与空白对照组及假手术组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；中药组与西药组比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 各组大鼠脊髓组织的IL-1β、IL-6、HA检测结果分析（±s）

表1 各组大鼠脊髓组织的IL-1β、IL-6、HA检测结果分析（±s）

注：与空白组比较，aP＜0.05，cP＜0.01；与假手术组比较，eP＜0.01，dP＜0.05；与模型组比较，bP＜0.01

组别 鼠数（只）IL-1β（ng／L）7 d 14 d IL-6（ng／L）7 d 14 d HA（μg／L）7 d 14 d空白组 8 237.57±41.41 240.00±67.22 98.42±19.61 105.28±25.56 3.01±0.83 3.31±0.63假手术组 8 268.28±74.41 244.85±65.36 125.00±24.85 107.14±19.89 3.71±0.60 3.37±0.59中药组 8 330.14±67.66ab341.42±69.63abd160.85±47.59ab157.85±41.10b4.79±0.92ab4.68±1.63b西药组 8 350.14±71.03bcd361.85±63.74bce172.57±40.98bc169.14±27.81ab4.44±1.77b5.10±1.56abd模型组 8 502.00±94.18ce545.57±114.77ce367.28±86.53ce405.01±114.32ce7.86±1.97ce8.23±2.67ce

3 讨论

现代医学研究［7-15］认为IL-1β是一种细胞因子，由于其功能的多样性，又被称为内源性热原质。IL-1β是一种强有力的致痛物质，IL-1β作用于产生其本身的细胞或临近细胞，多在局部发挥作用，但在一定的条件下，可以通过内分泌的方式作用于远处的靶细胞，介导全身反应。它不仅能协同其他细胞因子促进B、T细胞活化，而且能诱导其他炎性产物的生成，加强白细胞对血管内皮的粘附等。IL-6是细胞因子家族中的重要成员，她是一种多功能的、作用广泛的细胞因子，IL-6广泛参与炎性反应，是一种非常重要的炎症因子IL-6是一种多功能蛋白，可通过自分泌和旁分泌而作用于组织细胞，刺激细胞生长，促进细胞外基质增生，参与炎性反应等过程。组胺（HA）是自体活性物质之一，在体内由组氨酸脱羧基而成，肥大细胞是变态反应的关键性细胞，也是先天免疫过程中重要的起始细胞。实验证明脊痛消胶囊对神经根型颈椎病模型大鼠的作用机制可能是通过方中以黄芪、当归等药物的活血化瘀、清热利尿功能，减少肥大细胞、中性粒细胞及单核巨噬细胞的浸润，降低IL-1β、IL-6等前炎症因子的产生，控制局部炎症的发生和发展。

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R681.531

A

10.3969／J.issn.1672-6790.2014.06.020

2014-03-26）

黑龙江省博士后科研启动金（LBH-Q12008）

娄宏君，主管检验师，Email：LHJ-HZY＠163.com

高曦，博士，博士后，副主任医师，副教授，硕士生导师，Email：13845082037＠139.com