常用药用复合材料中的2，4-二氨基甲苯含量对比探讨

时间：2024-05-22

梅丽芳刘盈君谢新艺

（1.广东省医疗器械质量监督检验所包装材料容器检验中心；2.广东省医疗器械质量监督检验所）

药用复合材料是指各种塑料与纸、金属或其他塑料通过粘合剂组合而成的用于包装药品的材料，可制成膜、袋、硬片。

目前，在复合软包装材料中，我国使用最多的粘合剂是双组分聚氨酯粘合剂，其中绝大部分是以甲苯二异氰酸酯（Toluenediisocyanate, TDI）为主要原料聚合而成的，TDI 遇水后容易水解生成有致癌性的2,4-二氨基甲苯[1,2]。2,4-二氨基甲苯又名甲苯二胺，易溶于沸水、乙醇和乙醚，是染料、医药、农药、聚氨酯合成中非常重要的有机化工原料[3]。2,4-二氨基甲苯会刺激人体的皮肤、粘膜等，可麻醉中枢神经系统，引发湿疹、类似丹毒的痂皮等，还可能产生气管炎、支气管炎、哮喘等中毒表现[4]，人体若长期接触可能会出现头痛、失眠、恶心、呕吐以及溶血性贫血等多种症状。当这些复合包装材料接触药品时，上面残留的2,4-二氨基甲苯可能会迁移到药物中，从而对人体造成危害。然而，我国药包材标准暂未收录对药用复合材料中2,4-二氨基甲苯的含量测定方法及限度要求。

本研究拟采用HPLC-MS 法检测常用药用复合材料中的2,4-二氨基甲苯，对比不同规格、不同厂商生产的药用复合材料在不同提取时间下溶出2,4-二氨基甲苯含量的差异和变化规律，可为各药品包装材料生产商对其生产的包装材料溶出2,4-二氨基甲苯的风险以及药品生产经营企业选择适宜的包装材料包装药品提供参考依据，同时，为药包材引入2,4-二氨基甲苯风险监控点的检测方法提供参考思路。

1. 仪器与试药

LCMS-8040 日本岛津公司三重四极杆液质联用仪；安全智能型反压高温蒸煮锅；普通型超纯水机；电子天平；2,4-二氨基甲苯对照品（纯度＞99.8%，德国Dr.Ehrenstorfer GmbH 公司，批号为G150549）；甲醇、甲酸为色谱纯；去离子水。

2. 方法与结果

2.1 色谱-质谱条件

色谱柱：岛津 Shim-packVP-ODS(150×2.0 mmI.D.,4.6 μ m)；流动相：甲醇—0.1%甲酸溶液(60:40)；柱温：30℃；流速：0.4 mL/min；进样量：5.0 μ L。离子源：电喷雾离子源（ESI），正离子模式；DL 温度：200℃；雾化气流量：3.0 L/min；干燥气流量：15.0 L/min；加热快温度：400℃；DP 电压：3.5 kV；监测方式：多反应监测模式（MRM）。经三重四极杆液质联用仪测定，通过驻留时间以及MRM 子离子相对丰度定性、标准曲线外标法定量[1]，可确定质荷比108 为定量离子，质荷比106 为定性离子。

2.2 供试品制备

取适量洗净并晾干的药用复合材料，裁取200 cm2，剪切成约3×0.3 cm 的条状，放置于250mL 锥形瓶中，精密加入去离子水100 mL，用电子天平称定重量。放入高压灭菌锅中，升温至120℃，保持30 分钟，停止加热，待锅内与外界的压差降至0 后，取出，冷却至室温，用去离子水补足减失的重量，用0.22 µm 水系微孔滤膜过滤后，即得。

2.3 对照品储备液制备

精密称定对照品2,4-二氨基甲苯适量，用去离子水配置成质量浓度为2667.5 μ g/L 的对照品储备液，置于4℃冰箱备用。

2.4 专属性试验

精密吸取按照“2.2”方法制备的2,4-二氨基甲苯对照品溶液、供试液、加标供试液以及空白液各5.0 µL，依次注入高效液相色谱-质谱仪，得到相应的色谱图。见图1。由图可知，2,4-二氨基甲苯的驻留时间为0.753 min，本方法对2,4-二氨基甲苯含量的测定有较强的专属性。

图1-1 2,4-二氨基甲苯对照液色谱图

图1-2 供试液色谱图

图1-3 加标供试液色谱图

图1-4 空白液色谱图

2.5 线性关系

精密量取不同体积的对照品储备液，配置成6 个不同质量浓度的对照溶液，注入高效液相色谱-质谱仪，以2,4-二氨基甲苯峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归，得到回归方程Y=8457.10X+1383.63，相关系数r=0.9991。结果表明，2,4-二氨基甲苯含量在1.067~53.35 μ g/L的浓度范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验

平行制备的6 份加标供试液，加标浓度均为5.335 μ g/L 的2,4-二氨基甲苯对照液，连续测定，计算2,4-二氨基甲苯测得量的RSD 为3.40%。于24 h 后再制备6 份进行测定，计算得24h 后的RSD 为3.10%，12 份样品中的RSD 值为3.67%，精密度良好。

2.7 检测限和定量限试验

精密量取对照品储备液，按浓度稀释法进行分析，信噪比3:1 时测得的量为检测限，本方法的检测限为0.213 μ g/L；以信噪比10:1 时测得的量为定量限，本方法的定量限为1.067 μ g/L。

2.8 加样回收率试验

取已测定浓度的样品9 份，分别精密加入5.335 μ g/L、10.67 μ g/L 和16.005 μ g/L 三个加标对照浓度，每种加标浓度平行制备3 份，注入高效液相色谱-质谱仪，得到平均回收率为99.16%，回收率的RSD 为5.31%。方法具有良好的精密度和回收率。

2.9 不同样品的测定

收集5 种不同材质、不同规格、不同厂商生产的常用药用复合材料，按照2.2 的方法进行前处理，注入HPLC-MS 进行分析，每种样品各测三份，得到各样品在120℃加热30 min 时溶出2,4-二氨基甲苯的浓度结果。同时，为了对比研究不同规格、不同厂商生产的药用复合材料在不同提取时间下溶出2,4-二氨基甲苯的含量的差异和变化情况，本试验在保持其他样品前处理方法及条件不变的情况下，增加两个加热时间点，分别为保持15 min 和45 min。结果见表1。

表1 试验结果

表1 试验结果（续表）

3. 讨论

由表1 中结果可得出以下几个结论：同一规格、同一厂商生产的药用复合材料随着前处理过程中加热提取时间的增加，所溶出的2,4-二氨基甲苯的含量也随之不断增加且溶出2,4-二氨基甲苯的速度各有不同；在相同的加热提取时间下，不同规格的复合药品包装材料所提取溶出的2,4-二氨基甲苯的含量各不相同，比较几种材质的样品，PVC/PVDC 这一材质的两种样品所溶出的2,4-二氨基甲苯的含量低于定量限；同一规格、不同厂商生产的复合药品包装材料所提取出的2,4-二氨基甲苯的量也有较大差异。

综合上述，常用药用复合材料普遍存在2,4-二氨基甲苯的溶出，且不同的规格、生产厂商以及加热提取时间均会对溶出2,4-二氨基甲苯的含量产生不同程度的影响。