建昌帮和中国药典法炮制的山药中多糖含量比较

时间：2024-05-22

郑燕枝谢明吴火生

摘要[目的]比较建昌帮和中国药典法炮制的山药中多糖含量。[方法]采用超声法提取山药多糖，以料液比、提取时间、提取温度为因素，通过正交试验，得出提取山药多糖的最优条件，采用苯酚-硫酸法测定山药水提液中多糖含量。[结果]山药多糖提取的最佳工艺为料液比1∶30、提取时间1 h、提取温度60 ℃。多糖含量从大到小依次为建昌帮法、中国药典法、生品。[结论]建昌帮法炮制的山药多糖高于中国药典法，为建昌帮炮制法提供试验依据。

关键词山药；多糖；含量；建昌帮法；中国药典法

中图分类号 S632.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）22-0159-03

Abstract[Objective]The research aimed to compare the polysaccharide content of Jianchang group and Chinese pharmacopoeia method in Dioscorea opposite.[Methods]Ultrasonic method was used to extract polysaccharide from Dioscorea opposite. In the case of solid-liquid ratio， extraction time and extraction temperature，the optimum conditions for polysaccharide extraction from Dioscorea opposite were determined by orthogonal test. The content of polysaccharide in Dioscorea opposite extract was determined by phenol-sulfuric acid method.[Results]The best technology of polysaccharide extraction was material liquid 1∶30， extracting time 1 h， extraction temperature 60 ℃.The polysaccharide content from the largest to the smallest was Jianchang group，Chinese pharmacopoeia method，raw material.[Conclusion]The polysaccharide from Jianchang group is higher than that of Chinese pharmacopoeia. This paper provides experimental basis for the processing of Jianchang group.

Key words Dioscorea opposita Thunb.；Polysaccharides；Content；Jianchang group method；Chinese pharmacopoeia method

“建昌幫”是中国南方古药帮和中药炮制的重要流派之一，与“樟树帮”合称为“江西帮”，为全国13个大药帮之一。它发祥于江西南城县，以擅长传统饮片加工炮制、药村集散交易著称。药界至今还有 “药不到樟树不灵（齐），药不过建昌不行”之说[1]。在中药炮制加工的过程中，辅料是十分重要的附加物料，辅料品种多具有地方或者帮派特色。在丰富多样的炮制辅料中，谷糠是建昌帮最具特色的辅料之一。谷糠，又称谷壳、砻糠，是稻谷的外壳，在南方最为常见，入脾胃经。用谷糠与药共制，不仅能使药物均匀受热，色泽鲜艳，还能缓和药性，增强药物健脾祛湿的功效疗效。谷糠的运用，在我国中药炮制界独具特色，“南糠北麸”是我国南北中药炮制技术流派的显著区别[2]。

山药为薯蓣科植物薯蓣（Dioscorea opposite Thunb.）的根茎[3]，味甘，性平，归脾、肺、肾经，既是餐桌上常见的美味又保健的食品，也是常用的中药材之一，具有补脾养胃、生津益肺、补肾涩精等功效，主治脾虚泄泻、久痢、虚劳咳嗽、消渴、遗精等症[4]。山药多糖是怀山药重要的生物活性成分，众多研究发现怀山药多糖具有调节免疫、抗氧化延缓衰老、抗肿瘤抗突变、降血糖降血脂、调节脾胃等作用[5-10]。笔者以多糖含量为指标，利用超声提取法，经单因素试验考察最佳提取条件，并结合正交试验设计，优选山药多糖超声提取的最佳工艺；采用苯酚-硫酸法测定建昌帮和中国药典法炮制的山药中多糖含量，比较其差异，为建昌帮炮制法提供一定的试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

山药药材购于福建百盛药业有限公司。无水葡萄糖（分析纯，批号20160615，国药集团化学试剂有限公司）；苯酚（分析纯，批号20160511，国药集团化学试剂有限公司）；硫酸（分析纯，批号2017111228，三明市三圆化学试剂有限公司）；无水乙醇（分析纯，批号20170516，国药集团化学试剂有限公司）。

1.2 仪器与设备 UV1800PC-DS2型紫外可见分光光度计（上海美普达仪器有限公司）；AL204电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]；电子天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；离心机（长沙湘智离心机仪器有限公司]；HH-4数显恒温水浴锅（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 山药生品及炮制品的制备。

1.3.1.1 生品。山药样品，60 ℃烘干，备用。

1.3.1.2 中国药典法（麦麸炒山药）。先将炒制容器预热至一定程度，均匀撒入定量的麦麸，中火加热，即刻烟起，随即投入山药片，迅速拌炒至淡黄色，偶有焦黄斑，取出，筛去麦麸，摊开晾凉。100 g药材用麦麸10～15 g。

1.3.1.3 建昌帮法（蜜谷糠炒山药）。先将炒制容器预热至一定程度，投入适量蜂蜜，炼蜜，待蜜冒鱼眼泡，投入定量的谷糠，拌炒均匀后，投入山药，以谷糠覆盖山药焖数秒后，快速翻炒，炒至亮黄色，取出，筛去谷糠，摊开晾凉。100 g药材用谷糠100 g，蜂蜜30 g。

1.3.2 工艺流程。

山药及其炮制品→分别粉碎→过12、18号套筛→80%乙醇超声提取→弃去乙醇提取液→加水超声提取→离心取上清液（5 000 r/min，5 min）→测定多糖含量。

1.3.3 山药多糖提取的最佳条件。

分别考察不同的料液比、提取时间、提取温度下，采用苯酚-硫酸法检测山药多糖含量，初步得到山药多糖的最佳提取条件并进行正交设计优化提取工艺。

1.3.3.1 葡萄糖标准曲线制作。精密吸取葡萄糖对照品溶液（0.1 mg/mL） 0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1 mL，加蒸馏水至2 mL，加入1 mL 5% 苯酚溶液和5 mL浓硫酸，于40 ℃水浴中加热40 min，冰水浴5 min，按紫外—可见分光光度法（2015 年版《中国药典》一部附录）规定， 490 nm 处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、葡萄糖浓度（mg/L）为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程。

1.3.3.2 山药多糖含量的测定。

精密称取山药干燥粉末1.00 g，置具塞锥形瓶中，精密加入80% 乙醇10 mL 超声0.5 h，弃去乙醇提取液，加蒸馏水30 mL，60 ℃超声1 h 提取多糖，离心，取上清液1 mL，加蒸馏水稀释10倍，即得供试品溶液。精密量取供试品溶液0.5 mL于10 mL具塞刻度试管中后，按“1.3.3.1”方法测定吸光度，按标准曲线测定供试品中多糖含量，按下式计算山药中多糖的含量。

1.3.3.3 山药多糖提取工艺的优化。

在单因素的基础上，采用正交试验优化山药多糖的提取工艺。以料液比、提取时间、提取温度进行L9（33）正交试验，以多糖含量为依据选出最佳工艺条件，具体试验方案见表1。

1.3.4 建昌帮和中国药典法炮制的山药中多糖含量。方法同“1.3.3.2”项。

2 结果与分析

2.1 葡萄糖溶液标准曲线以吸光度为纵坐标、葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线，得出线性回归方程为Y=16.677X-0.015 2，相关系数r=0.999 5，表明葡萄糖浓度在0.005～0.055 mg/mL 线性关系良好。

2.2 山药多糖提取的最佳条件

2.2.1 料液比对山药多糖提取率的影响。精密称取山药干燥粉末1.00 g，置具塞锥形瓶中，选取不同的料液比（1∶10、1∶20、1∶30、1∶40 mL/g），精密加入80%乙醇10 mL 超声提取30 min，弃去乙醇提取液，加蒸馏水，50 ℃超声30 min，其他操作同“1.3.3.2”，结果见图2。由图2可知，山药多糖的含量随着料液比的增加而上升，但当料液比超过30 mL/g时，测得多糖含量开始降低。因此，初步确定最佳料液比为1∶30。

2.2.2 提取时间对山药多糖提取率的影响。精密称取山药干燥粉末1.00 g，置具塞锥形瓶中，精密加入80%乙醇10 mL超声提取30 min，弃去乙醇提取液，加蒸馏水30 mL，提取温度50 ℃，选取不同的提取时间（15、30、45、60 min），其他操作同“1.3.3.2”，结果见图3。由图3可知，山药多糖的含量随着提取时间的延长而上升，但当时间超过45 min时，测得多糖含量开始降低。因此，初步确定最佳提取时间为45 min。

2.2.3 提取温度对山药多糖提取率的影响。精密称取山药干燥粉末1.00 g，置具塞锥形瓶中，精密加入80% 乙醇10 mL 超声提取30 min，弃去乙醇提取液，加蒸馏水30 mL，超声45 min，选取不同的提取温度（30、40、50、60 ℃），其他操作同“1.3.3.2”，结果见图4。由图4可知，山药多糖的含量随着提取温度的升高而上升，但当温度超过50 ℃时，测得多糖含量开始降低。因此，初步确定最佳提取温度为50 ℃。

2.3 正交试验结果

采用正交试验优化山药多糖的提取工艺。以料液比、提取时间、提取温度进行L9（33）正交试验，结果见表2。

由表2可知，超声法提取山药多糖的最佳条件为A3B3C3，即料液比1∶30、提取时间60 min、提取温度60 ℃。极差分析表明，在超声法提取山药多糖的3个因素中，影响山药多糖得率的主因子依次为提取温度、料液比和提取时间。

2.4 建昌帮和中国药典法炮制的山药多糖含量测定

称取山药干燥粉末约1 g，置具塞锥形瓶中，精密加入80% 乙醇10 mL 超声0.5 h，弃去乙醇提取液，加蒸馏水30 mL，60 ℃超声1 h 提取多糖，离心，取上清液1 mL，加蒸馏水稀释10倍，即得供试品溶液。精密量取供试品溶液0.5 mL于10 mL具

塞刻度试管中后，按“1.3.3.1”方法测定吸光度，按标准曲线法测定供试品中多糖含量，并计算山药多糖的含量。结果表明（表3），建昌帮和中国药典法炮制的山药中多糖含量从大到小依次为建昌帮法、中国药典法、生品。

3 结论

（1）超声提取法提取山药多糖的最佳工艺为料液比1∶30、提取时间60 min、提取温度60 ℃。

（2）山药经建昌帮和中国药典法炮制后多糖含量较生品均有所升高。可能是辅料麦麸和谷糠能使山药均匀受热，质地变得较生品疏松，从而有助于山药多糖的溶出。且建昌帮法炮制的山药多糖含量高于中国药典法，可能与建昌帮所用的辅料蜜谷糠有关，具体有待進一步研究，该研究为建昌帮法炮制山药提供了试验依据。

参考文献

[1]孟振豪，钟凌云.建昌帮中药炮制概况[J].江西中医药大学学报，2016，28（1）：110-112.

[2]吴蜀瑶，李洋，吴志瑰，等.建昌药帮的传统炮制特色[J].江西中医药，2016，47（11）：11-14.