三斑海马的驯化与苗种培育研究

骆大鹏，刘庆明，邱名毅，赵志英，周海珠

(海南省海洋与渔业科学院，海南海口 570100)



三斑海马的驯化与苗种培育研究

骆大鹏，刘庆明，邱名毅，赵志英，周海珠

(海南省海洋与渔业科学院，海南海口 570100)

[目的]通过对三斑海马的驯化与苗种培育试验，丰富三斑海马的生物学基础资料。[方法]从海南本地收集三斑海马亲本，开展人工驯化和苗种培育，并探索其繁殖生物学行为。[结果]亲鱼驯化成活率达到85%，获得三斑海马初孵幼苗2.9万尾，培育1月龄鱼苗1.1万尾，海马最适开口饵料为“小球藻+轮虫+桡足类幼体”。三斑海马亲鱼抱卵量和孵化量存在个体差异，亲鱼抱卵量最少350粒/尾，最多1 020粒/尾，平均660粒/尾。亲鱼孵化量最少220尾，最多720尾，平均580尾。[结论]该研究结果可为海马的苗种繁育和人工养殖提供科学依据。

三斑海马；人工驯化；苗种培育；开口饵料

三斑海马(HippocampustrimaculatusLeach)，俗名“龙落子”，隶属海龙目(Syngnathitormes)海龙科(Syngnathidac)海马属(Hippocampus)，是小型海洋鱼类，因头与躯干成直角，形似马头，且体侧背方第1、4、7节各具一大黑斑而得名。三斑海马主要分布于我国东海、南海以及东非沿海和印度洋地区，属于国家二级保护动物[1]。由于海马具有较高的药用价值和观赏价值，人们对海马的需求量逐渐增加，然而，由于对野生海马的过度捕捞，造成自然资源日益减少。据估计，该物种在我国过去10年内逐年减少，种群数至少减少50%。

目前，对海马的繁殖生物学研究主要集中在大海马、灰海马、刺海马等品种[2-5]。为了科学合理地保护和开发优质野生海马资源，笔者开展了三斑海马的驯化养殖和苗种培育试验，以期丰富三斑海马的生物学基础资料，并为海马的苗种繁育和工养殖提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 亲鱼驯化 试验所用三斑海马来源于海南岛近海，暂养于海南省文昌市清澜港，于2016年4—5月分批转移至海南海研热带海水鱼类良种场开展驯化养殖。共采集海马100尾，体长12～15 cm，体重8～15 g。

采用室内玻璃缸循环水养殖三斑海马。玻璃缸规格为1.2 m(长)×0.8 m(宽)×0.6 m(高)，缸底投放人工海草作为附着物，模拟自然海区的环境，投喂大丰年虫(体长约1.0 cm)、凡纳滨对虾苗(体长0.8～1.0 cm)、冰冻毛虾(体长1.0 cm)等作为饵料，每天投喂2次(09：00和15：00)；投喂前清理排泄物、食物残渣及死亡个体，采用流水养殖，驯化水温26～27 ℃，海水盐度为33‰～35‰，连续充气，溶解氧保持在5 mg/L以上，pH保持在7.8～8.2。

1.2 苗种繁育

1.2.1 育苗管理。每天观察雄鱼的发育情况，并挑选临产雄鱼，放入产苗池流水养殖，每个池放养25～30尾，产苗池规格为1.0 m(长)×1.0 m(宽)×0.8 m(高)，出水口安装60目筛绢网。临产的亲鱼摄食量少，投喂少量的南美白对虾苗。三斑海马一般在晚上孵出幼苗，因此每天20：00以后应停止流水，防止孵化出的海马幼苗流失。产苗后的亲鱼移回亲鱼池继续培育，初孵幼苗需及时打捞，放入育苗池培育。

三斑海马苗种培育在室内进行，苗种培育的水泥池规格为5.0 m×4.0 m×1.0 m，水深0.8 m，水温为26～27 ℃，海水盐度为33‰～35‰，pH保持在7.8～8.2，池中少量充气，水泥池中添加适量小球藻。初孵幼苗密度约为1 000尾/m3，微流水，日换水量约占总水量的25%，每天投喂活饵2次，总投喂量以当天略有剩余为准，7 d后逐渐加大换水量，换水量100%，18～20 d池中放尼龙绳等供苗栖息。

苗种培育期间，每天虹吸池底残饵和粪便2次，保持水质良好，光照强度 2 000 lx，光照周期为12 L∶12 D，避免强光直射，以防止浮游藻类的大量繁殖，并保持水体充足的溶解氧。初孵幼苗比较脆弱，操作要小心，避免因机械损伤而发生死亡。

1.2.2 亲鱼抱卵量与孵化量观察。 解剖部分死亡的受孕雄海马，观察胚胎发育情况，并计数抱卵量；随机选择临产海马放在300 L的孵化桶内，每个孵化桶放1尾临产海马，观察海马幼苗的孵化情况。

1.2.3 幼苗开口饵料试验。选择初孵海马幼苗(全长0.8～1.0 cm)800尾，放入4个相同规格的试验水泥池，分别编号为1#、2#、3#、4#，每个水泥池投放200尾，水泥池规格为1.0 m(长)×1.0 m(宽)×0.8 m(高)，试验期7 d。在1#、2#、3#、4#试验池分别投喂以下开口饵料：小球藻+轮虫、小球藻+桡足类幼体、小球藻+丰年虫幼体、小球藻+轮虫+桡足类幼体，饵料投喂密度约为20个/mL，养殖期间微流水，每天观察海马的摄食情况。

2 结果与分析

2.1 亲鱼驯化 刚入池的海马能够自然地将尾部缠绕在人工海草上，摄食量很小，不食用冰冻饵料，能够捕食少量鲜活饵料(如活体虾苗或大丰年虫)，活动量少，从第2天开始海马开始增大摄食量，以摄食虾苗为主。养殖初期，部分海马由于尾部受伤，发生细菌感染，经高锰酸钾或聚维酮碘溶液消毒后，仍效果不佳，在后续养殖过程中死亡，经过30 d的养殖，成活率达到85%。

受孕的雄海马育儿囊膨大，在以后的发育中颜色逐渐加深，临产时膨胀至最大，呈椭球形。临产的海马活动量少，基本不摄食；待产完后，育儿囊缩小，亲鱼开始正常摄食。经观察，三斑海马亲鱼在夜里产苗，主要集中在22：00至次日06：00。

2.2 海马苗种培育 初孵幼苗体长0.8～1.0 cm，尾部细长，不能平行游动，只能靠身体弯曲活动。部分体色略黑，活动力较强，能够在水体中上层游动；部分呈灰色或淡黄色，尾部短小，活动力较弱，只能在水面游动。在后续培育过程中，海马幼苗体色逐渐变黑，尾部逐渐变粗，游泳能力明显增强，部分体质较弱的幼苗摄食量少，由于不能适应环境而死亡，呈弯曲状，浮于水面，随着时间的推移，最后沉于池底。此次试验共孵化出海马幼苗2.9万尾，培育1月龄以上海马1.1万尾，成活率达到38%(表1)。

表1 三斑海马育苗情况

2.3 海马抱卵量与孵化量 由于种种原因，该试验中部分受孕海马死亡，对8尾死亡的受孕雄海马8尾进行解剖，并计数抱卵量。因个体差异，雄海马抱卵量差异较大，最少350粒/尾，最多1 020粒/尾，平均660粒/尾。

受孕中期的雄海马育儿囊内的胚胎呈圆形或椭圆形，粉红色，器官分化不明显；临产期的雄海马育儿囊内的胚胎已经发育成熟，器官完全分化，已经脱膜出来，具有初孵海马的形态特征，呈弯曲状，灰色。

对10尾雄海马的孵化量进行了统计，发现不同个体的孵化量差异较大，最少220尾，最多720尾，平均约580尾，初孵幼苗大多数可从池底游到水体中上层，部分幼苗活力差，孵出就死亡，沉于水底。

2.4 海马幼苗开口饵料试验 投喂不同的开口饵料对海马幼苗的存活率影响很大。投喂“单胞藻+丰年虫幼体”组，7日龄幼苗成活率最低，海马幼苗基本不摄食丰年虫幼体，最后死亡；投喂“小球藻+轮虫+桡足类幼体”组，7日龄幼苗成活率最高，达到92%(表2)。

3 讨论与结论

3.1 海马饵料 在人工养殖条件下，幼海马主要摄食鲜活饵料，且具有一定的选择能力，开口摄食期主要摄食如单细胞藻类、轮虫和桡足类无节幼体，然后逐渐开始摄食枝角类、桡足类等[6-8]，只要有适宜饵料和适合的水环境，海马生长速度就很快。该试验结果表明，幼海马开口期投喂轮虫无节幼体、桡足类无节幼体，再加入适当单胞藻，有利于提高海马苗的成活率和生长速度；反之，若投喂单一饵料，不利于海马生长，部分海马甚至不开口摄食而死亡。

表2 三斑海马幼苗开口饵料试验

Table 2 The experiments of initial baits ofH.trimaculatusLeach fries

池号PondNo.投喂饵料种类Typesofinitialbaits投放数量Totalamount尾7日龄数量Amountof7-day-oldH.trimaculatusLeach∥尾成活率Survivalrate%1#小球藻+轮虫20050252#小球藻+桡足类幼体200156783#小球藻+丰年虫幼体200004#小球藻+轮虫+桡足类幼体20018492合计Total80034643

这可能是因为不同个体对不同饵料具有选择性，且不同饵料能为幼海马的生长提供不同的营养。研究表明，孵化24 h内卤虫无节幼体约719.2 μm[9]、桡足类幼体约80～350 μm、轮虫100～300 μm，而1～4 日龄的三斑海马幼鱼口径为0.527 5～0.802 5 mm，可以吞食轮虫、桡足类无节幼体[10]，卤虫无节幼体太大，不利于摄食。虽然轮虫和桡足类幼体大小差异不大，都可以作为海马开口饵料，但桡足类营养十分全面，含有丰富的不饱和脂肪酸、蛋白质、抗氧化剂、虾青素、维生素C和维生素E[11]。卤虫和轮虫的n-3HUFA含量相对较低[12-16]。桡足类的HUFA主要由小分子极性脂质组成，更利于消化吸收[17-18]。为幼海马提供充足的桡足类幼体是海马养殖成败的关键。

在养殖中后期，海马可以摄食糠虾、丰年虾、对虾苗等鲜活饵料，也可以投喂冰冻饵料(如冰冻糠虾、冰冻毛虾等)。宁卓等[9]研究发现，相对于冷冻糠虾，鲜活糠虾能够更好地满足海马亲鱼的营养需求，提高子代的生长性能和成活率。该研究结果表明，长期投喂冰冻毛虾或单一丰年虾，海马摄食率明显降低，体质减弱，发病率高；投喂鲜活虾苗，可以明显提高海马活力和存活率，并促进生长，这可能是由于冰冻饵料的营养不能满足海马生长的需要，且携带一些致病菌，导致水质变化或直接感染海马。

鲜活饵料的供给是海马养殖过程中的关键。不同生长时期需要不同的饵料，在自然海区海马的摄食饵料种类众多，然而能大规模人工培养的种类只有部分桡足类、枝角类、部分虾苗等，且生产成本高。迄今为止尚未找到合适的人工饵料可以代替鲜活饵料，这一直抑制着海马产业化的发展。

3.2 海马亲鱼抱卵量与孵化量 杜庆红等[2]研究表明不同年龄的海马繁殖力差异较大，其中2龄的亲本繁殖量最大，平均产量在600尾以上。该研究表明三斑海马亲鱼繁殖量为220～720尾，除了年龄因素外，这可能与受精率有关，受精率越高，苗种孵化量越大；反之，受精率越低，苗种孵化量越小。

亲鱼抱卵量是海马繁殖力最直接的体现，然而，尚未见到国内学者对海马抱卵量进行研究。笔者对三斑海马抱卵亲鱼进行解剖与观察，其抱卵量为350～1 020粒，不同个体差异很大，接近临产期抱卵量有减少的趋势。由此可见，三斑海马亲鱼的抱卵量与孵化量存在一定差异，这可能与饵料和环境等因素有关，饵料不足，或者环境差，影响其胚胎发育，再加上海马抱卵量越大，胚胎之间的竞争也越大，部分胚胎由于未获得充足的营养而发育缓慢或停止发育，然后发生凋亡，这直接影响到海马幼苗的孵化量。

3.3 海马疾病 海马的应激性较差，在季节转换时和雨天容易发生死亡，特别是在台风季节，水质变化大，海马死亡率高。笔者在2014年和2015年的试验中遭遇台风天气，海水盐度急剧下降，海马死亡率高，这可能与物种免疫力有关。

三斑海马养殖过程中，容易发生烂尾病和肠炎病，经过隔离治疗后效果不佳，大部分三斑海马最后死亡。盛军庆[10]从患病海马体内分离到菌株，并鉴定为副溶血弧菌。为了减少损失，在三斑海马养殖过程中应加强水质调控和饵料强化，并做好预防工作。

[1] 中华人民共和国濒危物种科学委员会．海马属，包括冠海马、刺海马、日本海马、克氏海马、管海马和三斑海马[EB/OL]．[2016-07-03].http：//www.cites.org.cn/database/?action=item&cid=115.

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Study on Artificial Domestication and Seedling Cultivation ofHippocampustrimaculatus

LUO Da-peng, LIU Qing-ming，QIU Ming-yi et al

(Hainan Academy of Ocean and Fisheries Science, Haikou, Hainan 570100)

[Objective] To make the artificial domestication and seedling cultivation experiments ofHippocampustrimaculatusLeach and enrich the biological basic data ofH.trimaculatusLeach. [Method] The parent fishes were collected from Hainan to make artificial domestication and seedling cultivation experiments. And their reproductive biological behaviors were studied. [Result] The survival rate of parent fish after artificial domestication reached 85%. 29 thousand hatched fries ofH.trimaculatusLeach were harvested, and 11 thousand one-month-old fish fries were cultivated. The optimum initial bait forH.trimaculatusLeach was “chlorella + rotifers + copepods larvae”. There were individual differences in the amount of egg load and the amount of hatched eggs inH.trimaculatusLeach. The minimum, maximum and average values of egg load amount per parent fish were 350, 1 020 and 660 respectively. The minimum, maximum and average values of the amount of hatched eggs per parent fish were 220, 720 and 550 respectively. [Conclusion] The results can provide scientific basis for the offspring cultivation and artificial breeding ofH.trimaculatusLeach.

HippocampustrimaculatusLeach；Artificial domestication；Seedling cultivation； Initial bait

海南省科研院所专项(KYYS-2014-62)。

骆大鹏(1980- )，男，四川峨眉人，高级工程师，硕士，从事水生生物繁育研究。

2016-08-12

S 968.9

A

0517-6611(2016)31-0147-03