转基因玉米的检测手段分析

赵彦涛

摘 要：近年来转基因生物技术快速发展，对农作物产量及品质的提高等方面起到非常重要的作用。但是转基因食品的安全性目前还处于模拟两可的状态，尚未有确切的定论，因此有必要加大对转基因食品检测手段方面的分析研究。文中总结了目前国内外在转基因玉米检测方面应用较多的几种检测手段，并对其未来发展趋势进行了展望。

关键词：转基因玉米；检测手段；展望

中图分类号：S513 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20181033022

转基因玉米是当前应用最广泛的转基因作物之一。目前我国转基因玉米种植的面积在转基因作物种植的总面积中占比达到20%以上，虽然目前对转基因玉米是否有害尚无确切的证据，但是在定论之前做好转基因玉米的检测工作是非常有必要的。目前国内外在转基因玉米检测方面应用的技术手段较多，转基因玉米产品的种类不同、或者检测的目的不同，采取的检测技术也不同，现简单总结几种常用的检测手段。

1 基于蛋白质的检测方法

转基因作物中外源蛋白的检测可以利用ELISA（酶联免疫吸附法）、Western杂交等方法，具体是将需要检测的转基因作物中的目的蛋白的基质通过一定的步骤抽提出来，再利用抗体、目的蛋白之间可以产生特异性结合的特点，进而通过产生的信号进行检测。

1.1 酶联免疫吸附法

此种方法具有以下特点：抗原抗体的免疫反应在固体的表面发生；蛋白质检测的标记物为某种特定的酶。转基因作物表达的外源蛋白的抗体可以结合待检测样品的外源蛋白，再通过酶标反应、酶促反应等表现出颜色反应，进而做出判断。此种检测方法可以定量，优点是需要较少的样品即可，操作标准，可对大批样品进行检测，缺点是其他因素容易影响检测的结果，造成假阳性。

1.2 Western杂交法

此种杂交方法是将抗体与抗原在硝酸纤维素膜上实现特异性结合，从而对外源基因进行检测的目的。将蛋白质提取分离出来，转移到固相膜上与抗体结合，再通过标记物进行检测。此种检测方法的灵敏性很高，但是涉及到的操作复杂，步骤较多，有较高的技术要求，日常检测中不太适合采用此方法。

2 基于核酸的检测方法

2.1 定性PCR检测技术

此种技术的原理与DNA复制过程的原理类似，在聚合酶的作用下，体外快速扩增目的片段，在很短的时间内将微量的目的DNA片段扩增到原来的百万倍以上，再根据电泳、染色结果进行检测。此种方法的优点是灵敏度高、速度快。

2.2 复合定性PCR检测方法

此种检测方法是在相同的反应管中对2对或者超过2对的引物进行扩增，达到同时检测多个目的片段的作用，检测的效率高，费用低，灵敏度高。

2.3 巢式PCR

巢式PCR有内引物、外引物2对引物，外引物在目的模板DNA的外侧，外引物在此模板外引物的内侧，简单来说就是外引物经过扩增后获得产物，而此产物又与内引物互补，可以作为内引物的模板，经过扩增2次，检测的灵敏度大大提高，对微量DNA样品的检测也更加的准确。

2.4 基因芯片检测法

基因芯片，也称DNA芯片，就是对待检测样品中的DNA等进行标记，与探针进行杂交，利用探针上杂交信号做出分析，以反映出待测材料中大量基因的表达图谱。

2.5 竞争性定量PCR

此种检测方法的原理根据转基因样品的DNA构建出与其有竞争作用的DNA，竞争DNA与样品DNA需要的底物、引物都相同，形成竞争关系，再经过电泳，根据做出的曲线图进行定量检测。

2.6 实时荧光定量PCR检测法

此种检测方法就是将荧光基团加入到PCR反应体系中，通过积累的荧光信号对PCR整个过程进行实时监测，然后结合标准曲线进行定量检测。在实时荧光定量PCR检测法中，应用最为广泛的当推TaqMan荧光定量PCR，其探针简单，特异性高。

3 其他的检测方法

3.1 PCR-ELISA检测法

这种方法是利用免疫学的方法对PCR的产物进行检测，可将PCR技术的高效以及ELISA技術的高特异性充分地发挥出来；免疫PCR。

3.2 免疫PCR

就是DNA标记免疫测定技术，检测转基因玉米的原理就是用PCR检测免疫学反应，先对抗原抗体复合物用一段DNA片段（序列已知）进行标记，再进行PCR扩增，之后对产物进行检测（采取常规的检测方法即可）。

目前，包括转基因玉米在内的所有转基因作物以及其产品检测技术的推出都需要慎之又慎，这些检测技术推出的最终目的，就是希望能够提高转基因作物检测的灵敏度、准确度。以后检测技术发展的趋势主要是品系的特异性检测、复合型的PCR检测等，以上几种常规方法分别各具优缺点，如果能将以上几种常规检测方法的优点结合使用，不仅可以满足基本的转基因作物的检测需求，还可以大大提高检测技术的水平，为转基因作物的发展起到很好的推动指导效果。

参考文献

[1]于君枫，方波.玉米及其制成品转基因成分检测研究[J].科教导刊，2011（15）：97.