田七主要病害调查及防治药剂筛选研究

蓝芳+苏坤+覃恩民+唐玉娟+李良波

摘 要：在广西百色市靖西县田七种植区，通过调查和试验发现：田七病害主要为田七黑斑病、炭疽病、根腐病。通过镜检观察到各病害的病原菌分生孢子形态学特征。田间防治试验中，越冬期园地清理与消毒可作为防治田七叶部病害的一种防治措施。室内药剂筛选试验中，供试的4种药剂中防治田七根腐病和炭疽病较好的药剂均为50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液，抑菌率分别达到71.35%、41.89%；防治田七黑斑病较好的药剂为20%苯醚甲环唑微乳剂1000倍液，抑菌率为71.37%。

关键词：作物学；病害防治；药剂筛选；田七

中图分类号：S432.1 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20161233030

三七[Panax notoginseng（Burk.） F.H.Chen]，为五加科人参属多年生草本植物，在广西境内人工栽培的又名田七，其茎、叶、花均可入药，是中国特有的名贵中药材，原产于广西百色和云南文山州[1]。广西是田七的主要产区，目前田七根腐病[3，4]、黑斑病[5]、炭疽病[6]等田七病害在广西田七产区发生较为严重，已成为制约当地田七产业发展最重要的因素。本文通过田间调查，确定广西田七产区的主要病害种类及其病原菌的形态学特性，并进行了室内和田间的化学防治药剂筛选，为田七病害的防治提供理论依据。

1 材料和方法

于2012年5—11月在广西百色市靖西县田七种植区进行田七病害调查，采集具有典型症状的病叶、病茎、病根为标本，根据症状类型分类，装袋保湿，并贴上标签，标记好采集时间、地点。带回实验室24h内及时进行病原菌分离。

1.1 病原菌的分离、纯化

在无菌的条件下，取新鲜病叶，选择典型的病斑，洗干净病叶表面，然后用灭菌解剖刀从病健交界处取小块病组织。用75%的酒精消毒1min，再用0.1%的升汞液表面消毒30s，最后用无菌水清洗3次，把已经处理好的病组织块转移至PDA培养基，置于25℃恒温箱中培养。3～4d后观察病原菌生长情况以及菌落形态。

在培养基中挑出疑似引起相应病症的菌丝转移到新的培养皿中，将疑似菌落每个转接3个培养皿，做好标记，放入培养箱内培养（25～28℃，自然光）。5～6d后，新的培养基长出不同的菌落，此时再将各种病菌的疑似菌落再转移到新的培养基，在培养箱内进行培养。此步骤重复几次，直到分离出单一的菌落。

1.2 病原菌的鉴定

将纯化后的病菌在适宜的条件下培养1个星期左右，待菌落上产生孢子，通过显微镜观察即可鉴定出病原菌。注意观察菌落、孢子堆的大小，颜色和菌丝的生长情况，菌丝的形态，是否有隔，孢子或子实体的形状、颜色、大小、隔膜数目等。

1.3 田间防治试验

1.3.1 越冬期园地清理与消毒防治叶部病害

于2012年2月上中旬采取冬期园地清理与消毒处理和对照，每处理设3个重复。冬期园地清理与消毒处理方法是先清除畦面上的枯死茎叶，再用45%的石硫合剂20倍液喷洒畦面，同时喷洒院内的柱子和荫棚。

1.3.2 发现中心病株早期用药处理防治黑斑病

于2012年3月中下旬，在田七叶部首先发现黑斑病。当发现中心病株时，使用丙环唑2000倍液早期用药处理防治与延迟15d用药处理作对照，每处理重复3次。

1.4 室内药剂筛选试验

供试药剂：50%多菌灵纯白可湿性粉剂（四川国光农化股份有限公司）、50%百菌清水乳剂（广州和为化工有限公司）、50%退菌特可湿性粉剂（河北百纳化工助剂有限公司）、20%苯醚甲环唑微乳剂（海南博士威农用化学有限公司）。

按照生长速率法进行药效测定：将PDA培养基加热融化，冷却到45℃左右后，将配好的母液与PDA培养基按1：9的比例混匀后制成含量一定药剂的平板培养基。用打孔器在培养了3d的菌落边缘打取菌饼，放于含药的PDA平板中间。设置不加药的PDA平板空白对照，每处理做3次重复，放在25℃恒温箱中培养3d后检查结果，测量菌落的直径并记录数据。

2 结果与分析

2.1 田七主要病害症状及病原菌形态

在广西百色市靖西县田七种植区，田七病害主要为田七黑斑病、炭疽病、根腐病。在苗期主要病害为田七根腐病，危害程度高，造成严重缺苗，部分地方缺苗率高达80%。移栽定植后的主要病害为田七黑斑病，危害程度高。在苗期时也会危害幼苗茎部，使幼苗折倒。

2.1.1 田七黑斑病

2.1.1.1 田七黑斑病的症状

田七黑斑病主要危害叶片，在叶尖或叶中间产生水渍状褐色病斑，病斑形状为椭圆形、圆形或不规则形。病斑中央為褐色，病健交界处为黄色，易破碎。当空气湿度高时，病斑扩大并呈黑褐色。危害茎部、叶柄时会使病部缢缩， 凹陷而扭折，有椭圆黑色病斑。

2.1.1.2 田七黑斑病病原菌分生孢子形态

通过显微镜观察田七黑斑病病原菌分生孢子为人参链格孢Alternaria panax Whetzel，病菌在PDA培养基上生长前期菌丝为白色，后期变为灰黑色，培养基背面颜色为黑褐色。镜检分生孢子梗为单生或簇生，不分枝，褐色，有隔膜，直型或曲折型。镜检分生孢子黄褐色，倒棍棒形，单生或者2～3个串生，有3～8个隔膜，43～113μm×l0～15μm（图A）。

2.1.2 田七炭疽病

2.1.2.1 田七炭疽病症状

田七炭疽病危害叶片时出现圆形或近圆形黄褐色病斑，边缘红褐色明显，有同心轮纹，后病斑变褐色，严重时破裂穿孔。叶柄和茎染病时出现梭形黄褐色凹陷斑，造成叶柄盘曲或茎部扭曲。危害茎基部时造成成株倒伏或根茎腐烂。

2.1.2.2 田七炭疽病病原菌分生孢子形态

通过显微镜观察田七炭疽病病原菌分生孢子为茄镰孢Fusarium so-lani，病菌在PDA培养基上生长前期菌丝为白色，后期变为灰白色。培养7d之后菌落出现淡红色粘粒，为其分生孢子堆。镜检分生孢子无色单胞，镰刀状，顶端尖锐，末端钝圆，19～23μm×2.5～4.0μm（图B）。

2.1.3 田七根腐病

2.1.3.1 田七根腐病症状

田七根腐病主要危害田七根部，使地上部分长势差，叶片变黄。挖出病株发现根部染病处变成褐黄色并腐烂，后期病根呈黑褐色，稀泥状。

2.3.1.2 田七根腐病病原菌分生孢子形态

通过显微镜观察田七根腐病病原菌分生孢子为胶孢炭疽菌Colletotrichum，病菌在PDA培养基上菌丝为灰白色，菌落具条纹，密厚。镜检分生孢子为不规则纺锤型，宽短，有3个或多个隔膜，26～40μm×5.2～6.3μm（图C）。

2.2 田间主要病害的防治试验

2.2.1 园地清理与消毒对防治田七叶部病害的影响

2012年2月上中旬对田七园地进行清理、消毒处理。清除畦面上的枯死茎叶，再用45%的石硫合剂20倍液喷洒畦面，同时喷洒院内的柱子和荫棚。结果见表1。

表1结果表明：防治效果（%）=（对照组平均发病率-实验组平均发病率）/对照组平均发病率×100%=（54.97-15.81）/54.97×100%=71.24%，防治效果较好。

2.2.2 田七黑斑病早期防治试验效果

表2结果表明对于防治田七黑斑病，在发现中心病株时用药与延迟15d后再用药，防治效果不明显，发病率相差不是很大，相差了15.58%。

以上试验结果表明，越冬期园地清理与消毒可作为防治田七叶部病害的一种防治措施，防治效果不错。而对于防治田七黑斑病来说，施药时间是否及时对防治效果有一定的影响。

2.3 药剂筛选试验结果

表3结果表明，不同药剂对田七不同的病害防治效果不同。其中50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液适宜用来防治田七根腐病，抑菌率达到71.35%，对田七炭疽病的防治效果较差，抑菌率为41.89%，而对田七黑斑病没有防治效果。50%退菌特可湿性粉剂1000倍液对田七炭疽病的防治效果较好，抑菌率为34.31%，对田七根腐病和田七黑斑病防治效果差，抑菌率仅为19.23%和11.33%。20%苯醚甲环唑微乳剂1000倍液对田七黑斑病的防治效果最好，抑菌率为71.37%，对田七根腐病防治效果其次，抑菌率为57.50%，对田七炭疽病防治效果差，抑菌率仅为27.07%。50%百菌清水乳剂1000倍液对田七根腐病的防治效果较好，抑菌率为50.00%，对田七黑斑病和田七炭疽病防治效果差，抑菌率分别为15.90%和2.24%。

从以上结果来看，不同药剂对不同田七病害防治效果有很大差异。在供试的4种药剂中，防治田七根腐病和炭疽病的较好药剂均为50%退菌特可湿性粉剂1000倍液，防治田七黑斑病较好的药剂为20%苯醚甲环唑微乳剂1000倍液，但抑制效果都不是很理想。这可能与药剂选择、药剂浓度、实验误差有关，这有待于进一步深入研究。

3 讨论

田间调查发现：田七病害种类繁多，主要表现为黑斑病、炭疽病、圆斑病、根腐病等，黑斑病等叶部病害在广西靖西等产业种植区发生较严重。云南文山是三七的主要种植产区，官会林[9]等发现：在文山产区根腐病最为严重，最高达70%，损失占各种病害的70%～85%，是田七生产中的毁灭性病害，成为制约田七产业持续发展及农业生态建设的重要屏障。这说明田七在不同种植区的主要病害是不同的，其发生和发展在很大程度上与当地的的温度、湿度等外界条件有关。

在室内药剂筛选试验中，比较了4种供试药剂对根腐病的抑菌效果，50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液对根腐病抑菌效果较好。在实际生产中，为了避免病害菌对农药的适应性，可将这几种药剂在田七种植过程中轮换使用，以有效防治病害的发生。

参考文献

[1]蒋妮，覃柳燕，叶云峰. 三七病害研究进展[J].南方农业学报，2011，42（9）：1070-1074.

[2]徐良，黄荣韶.广西靖西县田七种植业的现状与展望[J].广西农业生物科学，2006，26（1）：71-75.

[3]骆平西，许毅涛.三七根腐病病原鉴定及药剂防治研究[J].西南农业学报，1991，4（2）：77-80.

[4]缪作清，李世东，刘杏忠，等.三七根腐病病原研究[J].中國农业科学，2006，39（7）：1371-1378.

[5]冯光泉，王勇，李忠义.腐霉利、菌多王对三七黑斑病的防治效果[M].人参研究，2000，12（1）：46-48.

[6]韦继光，陈育新.靖西田七炭疽病的调查和防治试验[J].广西农学院学报，1990，9（2）：17-24.

[7]叶云峰，蒋妮.广西田七重要病害的防治药剂初步筛选[J].西南农业学报，2015，28（1）：177-181.

[8]舒彬，韩春梅.三七的主要病虫害及其防治[J].四川农业科技，2011（9）：43.

[9]官会林，杨建忠，陈煜君，等.三七设施栽培根际微生物菌群变化及其与三七根腐病的相关性研究[J].土壤，2010，42（3）：378.

作者简介：蓝芳（1967-），女，广西宾阳人，广西大学研究生院，助理研究员，主要从事药用植物资源与研究生管理；李良波（1980-），男，湖北仙桃人，广西大学农学院，副教授，主要从事植物化学研究。