田螺人工养殖诱食剂的筛选试验

黄杰，易弋，罗福广，文衍红，胡大胜，兰健勇，韩书煜

（1.柳州市渔业技术推广站，广西 柳州545006；2．广西壮族自治区水产技术推广总站，广西 南宁530022；3.广西科技大学生物与化学工程学院，广西 柳州545006；4.柳州市谷之韵农业发展有限公司，广西 柳州545115）

田螺是我国大部分地区都有食用传统的一种水生软体动物，南方地区尤为喜爱。在分类地位上，属于软体动物门、腹足纲、中腹足目、田螺科、圆田螺属[1]。田螺常见于各类水域，湖泊、河流、水库、池塘及稻田都是其理想的栖息地，水草茂盛的水域为其最佳栖息地[2]。我国主要的田螺有中华圆田螺（Cipangopaludina cahayensis）、中国圆田螺（Cipangopaludina chinensis）2种。

田螺肉营养丰富，干物质中含粗蛋白55.35%，钙5.22%，磷0.42%，同时还含有丰富的维生素B和矿物质等营养物质[3，4]。其是钙含量远超60多种常见高钙食物，是典型的高蛋白、低脂肪、高钙质的天然动物性保健食品。随着社会经济的发展，人们也越来越喜欢这种具有地方特色的风味食品。但由于农药、化肥的使用，野生的田螺资源越来越少，无法满足日益增加的需求。因此，人工养殖田螺也就成为了养殖业发展的一个新方向[5]。

近年来，柳州螺蛳粉从“路边摊”走进“工业园”，从名不见经传的地方特色小吃发展成为全国“网红”食品，甚至出口到欧美国家[6-7]。2019年，柳州预包装（袋装）螺蛳粉平均每天销售150万包，实体店突破1.8万家，年产值超过60亿元。为了保证螺蛳粉原材料的供应，柳州市从2018年起大力推广田螺的人工养殖。

田螺行动缓慢，因此在人工养殖的条件下，如果投喂的人工饲料不能够有效的吸引田螺前往觅食，而紧紧依靠它的随机活动找到食物的概率比较低。在人工饲料中适当添加诱食剂，能促进田螺进食，从而提高养殖效益。该文选择了常见的几种诱食剂，并人工添加到基础饲料中，通过比较田螺对于的趋食性，筛选可能用于田螺人工饲料制作的诱食剂，以期为探索田螺人工养殖的科学方法提供一些依据。

1 材料及方法

1.1田螺

中国圆田螺，体质量1.0~1.5 g/只，采集自柳州市谷之韵农业发展有限公司位于柳州市柳江区里高镇的田螺养殖基地。田螺采集后于实验室暂养1 d，然后选择活力强的进行后续试验。

1.2养殖用水

自来水预先曝气充氧12 h。此时，养殖水中溶氧量约7~10 mg/L。

1.3诱食剂种类及饲料制作

选取四种氨基酸（丙氨酸、甲硫氨酸、天门冬氨酸、异亮氨酸）、两种含硫化合物（甜菜碱、大蒜素）、酒糟干粉共7种诱食剂，以高筋面粉为基础饲料，将诱食剂以不同比例添加于高筋面粉。其中氨基酸和含硫化合物类诱食剂个分成3个不同的添加量：0.2%、0.4%、0.6%，酒糟干粉添加量为固定的20%。高筋面粉与水按5∶3的质量比混合揉捏制成面团备用，每次试验现做现用。该文使用面粉作为基础饲料主要考虑到面粉无味，可以有效的减少饲料本身的味道对于试验结果的影响，而且面粉加水揉捏成团后成型性好，不易在水中溶散，也便于试验的开展。

1.4迷宫式养殖箱制作

试验养殖箱为75 cm×50 cm×30 cm（长×宽×高）的周转箱，参考季延滨等人的试验[8]，用黑色PP板将周装箱焊接成迷宫式养殖箱（图1）。每个养殖箱被PP板分隔成7个区域，中央区域标记为C区，为实验开始是放螺的位置。邻近C区的为B区，添加诱食剂的面团放置的区域为A区，各区之间由5 cm的开口作为田螺行进的通道。田螺从C区开始爬行，经过2次选择后进入A区。

图1 迷宫式养殖箱俯视图简图

1.5试验方法

制备4个迷宫式养殖箱，水深10 cm，在C区各投放50个中国圆田螺。其中一个箱不放饲料作为对照，其余3只箱为平行试验，在A区放同一浓度下的3种不同添加剂饲料和酒糟饲料。放入田螺10 min后放入面团进行试验，2 h后观察试验结果。其中酒糟饲料只有一个浓度，是为了作为对照方便数据分析时候将不同批次的诱食效果做均一化处理。

1.6诱食效果的判定

为了更直观的表示诱食效果，我们定义了以下下几个概念，以便将诱食效果定量表示。规定试验结束时，诱食剂对C区的田螺的区域诱食度Qc=0，对B区的田螺区域诱食度Qb=2，对A区田螺的区域诱食度QA=4；田螺在空白组中相对于试验组自由扩散到相对位置的C区自由扩散度Rc=0，扩散到相对位置的B区的自由扩散度Rb=0，扩散到相对位置发的A区的自由扩散度Ra=4。

某诱食剂诱食度K计算方法如下：

式中：Na为试验结束时在某诱食剂A区存在的螺数，Nb为试验结束时最接近该诱食剂的B区存在的螺数，Na0为试验结束时该诱食剂在空白组相对位置的田螺数，Nb0为试验结束时该诱食剂在空白组相对位置最接近的B区的田螺数。所以K表示去除自由扩散影响后的真实诱食剂效果。

相对诱食度K’=K某诱食剂/K酒糟。

2 结果

2.1 田螺随机活动的显著性差异分析

为了确认田螺的随机活动不会对试验结果造成影响，首先进行了空白试验，即不添加饲料，让田螺在养殖箱中自由活动，试验共进行5次，对随机活动到A区田螺的数量进行了F检验和T检验。结果见表1。

表1 随机活动到A区田螺数量的显著性分析

从表中可以看出活动到A区各区的田螺数量在1~4个之间，2~3个居多。T检验结果显示各个区域之间的田螺数量不存在统计学意义差异。也就表明田螺活动到A区完全是一个随机行为，不存在明显的趋向性。

2.2 诱食剂第一次筛选

根据1.5所述的试验方法分别对不同添加量的诱食剂进行了诱食效果试验，试验结果见图2~图4。

图2 添加量0.2%的诱食剂对田螺的诱食效果

图3添加量0.4%的诱食剂对田螺的诱食效果

试验结果显示诱食剂对田螺的趋食性有明显的诱导作用。除异亮氨酸外，其他诱食剂的效果要优于酒糟，而丙氨酸、甜菜碱和大蒜素的诱食效果要优于其他诱食剂。除了甲硫氨酸在0.6%的添加量下的效果要优于另外2个较低的添加量外，其余诱食剂在此浓度下的诱食效果均最差，说明田螺对于过于强烈的气味刺激还是有排斥的。丙氨酸0.2%，甜菜碱0.4%，大蒜素0.2%这几个浓度是3种诱食剂各自几个添加量中效果最好的，且与酒糟的诱食效果都具有极具统计学意义差异。

选择在投放田螺2 h后观察结果，是因为田螺的活动跟水体中氧气含量关系非常大[9]，水体中氧气一旦降低太多，田螺就会沿着箱壁爬到水面呼吸。由于做的是诱食剂筛选，又不能够向水体中增氧，否则氧气的搅动会将香味成分混合，无法分析。经过前期预实验，发现投放田螺2 h后，田螺活动性还较强，诱食的趋向性也比较明显，所以选择在这个时间点观察结果。

2.3 第二次筛选

由于丙氨酸0.2%，甜菜碱0.4%，大蒜素0.2%这3个条件没有在同一个批次的试验中进行，作者额外将这3个条件放在一起进行了第二次筛选，同样选择酒糟最为对照，结果见图5。结果显示，3种诱食剂放在一起对各自的诱食效果还是有一定影响的。丙氨酸的相对诱食度略微上升，而甜菜碱和大蒜素的相对诱食度都有所下降，大蒜素的相对诱食度超过了甜菜碱，达到4.68。统计学分析表明甜菜碱和大蒜素的诱食效果要显著高于丙氨酸，但大蒜素的相对诱食度超过了甜菜碱，二者之间却没有统计学意义差异。不过从添加量上比较，大蒜素的用量只有0.2%，低于甜菜碱的0.4%，二者如果成本差距不大，使用大蒜素更为合理。

图5 诱食剂第二次筛选结果

3 讨论

试验中甜味氨基酸丙氨酸、甜菜碱诱食效果明显好于微苦的异亮氨酸和无味的天门冬氨酸；在诱食剂特殊气味偏好上，中国圆田螺更偏好带有刺激性的大蒜味道的大蒜素，但是对甲硫氨酸的特殊气味、和具有酒香味的酒糟干粉偏好性不明显。所以，就诱食效果来说中国圆田螺更偏好味甜、带大蒜刺激味道的诱食剂。通过该次试验发现，在饲料中添加适当浓度的诱食剂，能有效的提高田螺对食物的趋向性，在所测试的7种诱食剂中，大蒜素和甜菜碱的效果较好。

同种诱食剂的不同添加量对同一水产动物的诱食程度也是不一样的，但不一定是越高越好。潘训彬等人研究了苏氨酸、精氨酸等6种氨基酸单体对史氏鲟的诱食作用，结果表明较低浓度的氨基酸即可对史氏鲟表现出良好的诱食活性，过高浓度则会抑制其摄食[10]。周爽男在对诱食剂影响管角螺摄食和生长影响的研究中也发现添加氨基酸诱食剂对管角螺摄食有一定促进作用；随添加量增加，摄食率也增加；添加量达0.2%后；随添加量增加，摄食率反而降低，其中甘氨酸表现的最为明显[11]。该试验也得到类似的结果，除了甲硫氨酸外，其余几种诱食剂在0.6%的添加量下的诱食效果均最差，说明田螺可能对于过于强烈的气味刺激有排斥。

该次试验选用酒糟作为对照诱食剂主要是因本地有养殖户使用该物质添加在米糠、麦麸等主要原料中制作田螺饲料。当然，他们在使用酒糟的时候并没有考虑到诱食的作用，而是因为酒糟干粉在该地容易购买，而且价钱也不高。田螺是一种杂食性动物，常以泥土中的微生物和腐殖质及水中浮游植物、幼嫩水生植物、青苔等为食，蔬果、菜叶、米糠、麦麸、和各种动物下脚料等也能食用[12-13]。酒糟含大量的淀粉，也有一定的粗蛋白（15%~22%），理论上是可以作为田螺饲料的。

迷宫养殖箱的制作参考了季延滨等人的试验[8]，在他们的诱食剂筛选试验中，对虾要经过4次选择才能达到最终的诱食剂区域。考虑到田螺行动缓慢，该试验将4次选择降低为2次。此次试验所用的迷宫养殖箱1次只能测试4种诱食剂，去除一个对照，实际能测的只有3个，大大限制了试验的开展。但这个尺寸的塑料箱已经是作者能够从市面上买到的最大的箱子了。所以后续如果要加大诱食剂的筛选范围，只能通过人工焊接制作更大的养殖箱，而且要做成圆形。圆形箱子的边缘到中心点的距离都一样，这样能够最大程度的增加诱食剂的投放区域。

过去，市场上田螺的来源主要依靠捕捞野生资源，所以针对田螺养殖的基础性研究非常少。如今，田螺人工养殖的前景越来越大，广西、湖南、广东等地都有大量养殖户开始从事田螺养殖。因此，希望各地的科研工作者能够适时的开展关于田螺人工养殖的相关研究，为养殖户能够科学、高效地养殖田螺提供理论依据和技术支持。