复合益生菌制剂对小白鼠生长性能、肠道微生物菌群结构及血清生化指标的影响

时间：2024-05-23

徐凤，邱发明，邱扬

（1.白城医学高等专科学校，吉林白城 173000；2.吉林省畜牧业学校，吉林白城 173000；3.昆明医科大学海源学院，云南昆明 650000）

小白鼠是野生鼷鼠的变种鼠种，大多用于医学研究。昆明系小白鼠作为实验室主要的模式动物被普遍用在生理学、医学、药学等学科的教学与研究中，为研究工作的开展给予了可靠的支持（崔灿，2019；杨慧军，2012）。益生菌主要来源于动物的胃、肠道，是动物胃、肠道消化过程中主要的微生物菌群，在动物消化过程中起着重要的作用，临床中常见的益生菌主要包括乳酸杆菌、乳双歧杆菌、酵母菌、粪尿球菌、肠球菌等，这些益生菌具有促进动物生长发育，调整肠道内菌群平衡，提高免疫机能等多种优点，益生菌可以替代抗菌药物使用，具有广阔的应用前景（刘正旭，2019；李巧兰，2019；亓爱杰，2019）。复合益生菌制剂是由多种益生菌经过特殊工艺制成的一种具有调节作用的活菌制剂，该制剂具有多种营养与保健作用且应用范围广、容易制备、使用方便，被广泛应用于畜禽养殖中（刘政，2017）。因此，本试验在实验小白鼠的基础日粮中添加不同水平的复合益生菌制剂，旨在探讨其对肠道微生物菌群结构及血清生化指标的影响，为复合益生菌制剂在实验小白鼠中进一步的应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料复合益生菌制剂主要由乳酸杆菌、乳双歧杆菌、粪尿球菌、肠球菌4种不同比例的益生菌组成，4种益生菌的活菌数均大于7.5×109cfu/g，由白城医学高等专科学校微生物实验室制备；粪便中大肠杆菌、沙门菌、乳酸杆菌、乳双歧杆菌鉴定试剂盒购于 Elabscience公司；总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酸氨基转移酶（GPT）、天门冬氨酸氨基转移酶（GOT）、血尿素氮（BUN）等试剂盒均购于北京中控生物技术有限公司。

1.2 饲粮配比参考秦哲（2017）文献，根据小白鼠的营养需要，配制基础饲粮，其组成及营养水平见表1。

表1 饲粮组成及营养水平（干物质基础）%

1.3 试验设计与管理采用单因素随机设计试验，选择体质量为（20±2.5）g健康实验昆明系小白鼠360只随机分成4个组，每个组3个重复，每个重复30只，1组饲喂基础日粮为空白对照组，试验2、3、4组分别在基础日粮中添加0.25%、0.5%、1.0%的复合益生菌制剂，试验期为28 d。按照常规饲养管理方式进行饲养与管理，每个重复组单独饲养，自由采食和饮水，饲养环境一致，适合的温度与光照。

1.4 生长性能测定在试验期间记录试验开始与结束的体重及耗料量，测定平均日增重、平均日采食量、料重比等生长性能指标。

1.5 肠道微生物菌群结构测定参照李平（2019）报道方法，试验结束前4 d，采集每个重复组实验小白鼠的新鲜粪便大约50 g，混合均匀进行处理。粪便中大肠杆菌、沙门菌、乳酸杆菌、乳双歧杆菌鉴定按试剂盒说明书进行，分离细菌计数，每克粪便中菌群总数用对数（lg cfu/g）表示。

1.6 血清中生化指标测定在试验结束后，每个组随机抽取10只小白鼠摘眼球取血，离心分离血清。按照说明书测定血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酸氨基转移酶（GPT）、天门冬氨酸氨基转移酶（GOT）、血尿素氮（BUN）等生化指标。

1.7 试验数据统计与分析试验数据用 “平均值±标准差”表示，采用统计学分析软件SPSS 18.0对试验结果进行单因素方差分析，以P＜0.05表示差异显著性。

2 结果

2.1 复合益生菌制剂对实验小白鼠生长性能的影响由表2可知，试验3、4组小白鼠平均日增重较1组相比分别提高31.9%、29.8%（P＜0.05），试验2组高于1组，差异性不显著（P＞0.05），试验 2、3、4 组之间相比，差异性不显著（P ＞ 0.05）；试验2、3、4组平均采食量均高于1组，但差异性不显著（P＞0.05）；试验3、4组料重比较1组相比分别降低 16.2%、15.7% （P＜0.05），试验 2组低于 1 组，差异性不显著（P ＞ 0.05）；试验 2、3、4组之间相比，差异性不显著（P＞0.05）。

表2 复合益生菌制剂对实验小白鼠生长性能的检测结果

2.2 复合益生菌制剂对实验小白鼠肠道微生物菌群结构的影响由表3可知，试验3、4组粪便中大肠杆菌的含量较1组相比分别降低19.2%、18.5% （P＜0.05），试验2组低于1组，差异不显著（P ＞ 0.05），试验 2、3、4 组之间差异不显著（P ＞0.05）；试验 2、3、4组粪便中的沙门菌含量均低于1组，差异性不显著（P ＞ 0.05）；试验 3、4组粪便中乳酸杆菌和双歧杆菌含量较1组相比分别提高31.9%、31.5%、16.8%、16.2% （P ＜ 0.05），试验2组高于 1 组，差异性不显著（P ＞ 0.05），试验 2、3、4组之间相比，差异不显著（P＞0.05）。

表3 复合益生菌制剂对实验小白鼠肠道微生物菌群结构的检测结果lg cfu/g

2.3 复合益生菌制剂对实验小白鼠血清生化指标的影响由表4可知，试验3、4组血清中TP含量较1组相比分别提高 14.7%、14.4% （P＜0.05），试验2组高于1组，差异性不显著（P＞0.05），试验2、3、4 组之间相比，差异性不显著（P ＞ 0.05）；试验2、3、4组血清中的ALB含量均高于1组，但差异性不显著（P ＞ 0.05）；试验 2、3、4 组血清中的 GOT 含量均低于1组，但差异性不显著（P＞0.05）；试验3、4组血清中GPT、BUN含量较1组相比分别降低 11.1%、11%、21.7%、21.3%（P ＜ 0.05），试验 2组低于 1 组，差异性不显著（P ＞ 0.05），试验 2、3、4 组之间，差异性不显著（P＞0.05）。

表4 复合益生菌制剂对实验小白鼠血清生化指标的检测结果

3 讨论

益生菌中富含多种营养物质，具有多种作用与功效，被广泛应用于鸡、猪、牛、羊健康养殖过程中。研究表明，益生菌可以显著提高动物的生长性能（亓爱杰，2019）。本试验研究表明，试验3、4组小白鼠平均日增重较1组相比分别提高31.9%、29.8%（P ＜ 0.05），试验 2、3、4组平均采食量均高于1组（P＞0.05），试验3、4组料重比较1组相比分别降低16.2%、15.7%（P＜0.05）。说明复合益生菌可以提高实验小白鼠的生长性能。可能由于复合益生菌中富含多种营养物质及消化酶类，可促进饲料在实验小白鼠体内的消化吸收，提高饲料在体内的利用率，促进实验小白鼠生长，从而提高小白鼠的生产性能，以0.5%添加为适宜。

动物肠道中包括益生菌菌群和致病菌群，其中益生菌菌群中的乳酸杆菌和双歧杆菌是机体重要的生理性细菌，具有抗感染、增强免疫力及拮抗有害微生物的作用（杨巧丽，2017）。益生菌菌群和致病性菌群结构保持动态平衡，当致病菌群占主要地位时，就会引起动物腹泻等疾病，动物肠道中微生物菌群的平衡对动物健康起着重要的作用（张任帅，2017）。本试验研究表明，试验3、4组粪便中大肠杆菌的含量较1组相比分别降低19.2%、18.5% （P ＜ 0.05），试验 2、3、4组粪便中的沙门菌含量均低于1组（P＞0.05），试验3、4组粪便中的双歧杆菌和乳酸杆菌含量较1组相比分别提高 31.9%、31.5%、16.8%、16.2% （P ＜ 0.05）。说明复合益生菌制剂可以降低大肠杆菌、沙门菌等有害菌的数量，提高其双歧杆菌和乳酸杆菌含量水平，从而改善实验小白鼠的的肠道微生物菌群结构，促进肠道微生态平衡。

国内外许多相关研究表明，物质在有机体内代谢过程与肝、肾等功能生化指标具有一定相关性，血液生化指标动态变化在一定程度上可以直接反映动物的健康状况（张召兴，2018）。肝、肾功能器官代谢过程中与血清中总蛋白、总蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及尿酸的含量有关，其指标的高低可以直接影响肝、肾的代谢功能（鲍坤，2015）。本试验研究表明，试验3、4组血清中TP含量较 1组比分别提高 14.7%、14.4% （P＜0.05），试验2、3、4组血清中的ALB含量均高于1组（P ＞ 0.05），试验 2、3、4组血清中的 GOT 含量均低于1组（P＞0.05），试验 3、4组血清中 GPT、BUN含量较1组相比分别降低 11.1%、11%、21.7%、21.3%（P＜0.05）。说明复合益生菌制剂对实验小白鼠的肝肾无明显损伤作用，还可以提高其肝、肾代谢水平，其作用机理有待进一步研究。