发酵豆粕对凡纳滨对虾生长性能和酶活性的影响

燕 磊， 赵 敏， 朱 伟， 席庆凯， 刘天骥，

吴月明1， 王正国1， 孙春华1，李 巍3，李洪琴1， 朱正鹏1*

（1.新希望六和股份有限公司，北京朝阳 100102；2.青岛农业大学，山东青岛 266109；3.成都枫澜科技有限公司，四川成都 611731）

豆粕作为一种优质饲料原料，不仅蛋白质含量高，而且氨基酸种类丰富，已在饲料工业中广泛应用（胡梦红等，2007）。但与鱼粉相比，豆粕蛋氨酸含量低，且含多种抗营养因子，从而降低了水产动物对其营养物质的吸收和利用率，而且还会对水产动物的免疫系统造成破坏（杨玉娟等，2016）。利用微生物发酵技术可以有效降解豆粕中的抗营养因子，并将大豆蛋白降解为优质小肽蛋白源，大大提高豆粕的营养性能和使用价值 （杨耐德等，2008）。然而，不同加工工艺对发酵豆粕的质量影响很大，其饲喂效果存在很大差异 （张代等，2017）。目前，鲜有关于发酵豆粕对凡纳滨对虾作用效果比较的报道，因此，本研究将不同加工工艺生产的豆粕添加到饲料中饲喂对虾，研究其对凡纳滨对虾生长性能和酶活性的影响，以期为发酵豆粕在对虾饲料中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验豆粕及饲料配方 本试验所用去皮豆粕和干发酵豆粕均购于市场，湿基发酵豆粕由公司内部提供。试验配制3种饲料，分别添加6%去皮豆粕、4%干发酵豆粕、7%湿发酵豆粕，调整鱼粉、花生粕、玉米DDGS比例，保证蛋白质含量一致。试验日粮组成及营养水平见表1。

1.2 试验动物及饲养管理 本试验在新希望饲料研究院即墨特水养殖基地进行，试验选取初始体质量为3.6~4.2 g体格壮、活力好、规格整齐、无明显疾病的对虾99900尾，随机分成3组，每组6个重复，每个重复5550尾对虾。分别投喂以上三种饲料，即去皮豆粕、干发酵豆粕、湿发酵豆粕饲料。试验期为73 d。

表1 试验日粮组成及营养水平%

饲养管理参照刘君华（2017）的研究方法，每日投料 4 次（06:00、10:00、14:00、18:00），每周对投饵量进行调整。水池内配置充氧设施，并定时开启，以保证虾池中溶解氧>5 mg/L，盐度为30‰自然海水，水温23~32℃，pH 7.5~8.5，氨氮浓度低于1.0 mg/L，亚硝酸盐浓度低于0.01 mg/L。

1.3 样品收集 饲养试验结束时，将试验虾禁食24 h，然后计算每个水泥池试验虾的数量并称取总重量，用于计算试验虾存活率 （SR）、末重（FBW）、质量增加率（WG）、特定生长率（SGR）和饲料转化率（FE）。生长性能计算公式如下：

质量增加率/%=（W2-W1）/W1×100；

特定生长率/%=（lnW2-lnW1）/T×100；饲料转化率/%=F/（W2-W1）×100；

成活率/%=终末虾尾数/初始虾尾数×100。

式中：T为试验天数，d；W2为试验结束时各处理鱼的平均体质量，g；W1为试验开始时各处理鱼的平均体质量，g；F为试验期间所用饲料总重，g。

试验结束，每池随机选取6尾试验虾取肝胰脏，并置于-80℃冰箱保存，用于分析酚氧化酶（PO）、总抗氧化能力（TAS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性。

1.4 样品分析 将饲料样品烘干 （105℃）至恒重，采用凯式定氮法（VELP，UDK142自动蒸馏装置，意大利）测定粗蛋白质含量，索氏抽提法测定脂肪含量（SOX416，Gerhardt，瑞典），失重法测定灰分含量；参照国标测定方法 （GB/T5009.124-2003），使用日立L-8800型氨基酸分析仪测定饲料氨基酸组成；肝胰脏样品送至南京建成生物科技有限公司测定相关酶活性。

1.5 数据统计 采用SPSS 17.0软件对数据结果进行单因素方差分析（One-way ANOVA），差异显著后进行Duncan’s多重比较，数据以“平均值±标准差”表示，差异显著水平为0.05。

2 结果

2.1 生长性能和饲料效率 发酵豆粕对凡纳滨对虾生长性能和饲料效率的影响如表2所示，其中干发酵豆粕和湿发酵豆粕两组之间终末均重无显著性差异（P＞0.05），但分别显著高于去皮豆粕组 2.74、4.14 g（P ＜ 0.05）；湿发酵豆粕组质量增加率和特定生长率显著高于另外两组（P＜0.05），其中湿发酵豆粕组质量增加率和特定生长率显著高于去皮豆粕组96.03%、0.38%/d；干发酵豆粕和湿发酵豆粕组成活率高于去皮豆粕组3.1%、1.8%，但差异不显著（P＞0.05）。

2.2 酶活指标 发酵豆粕对凡纳滨对虾酶活性的影响如表3所示，干发酵豆粕组超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力及酚氧化酶活性高于去皮豆粕组 3.86、0.21 U/mg prot、0.18 U/mL，低于湿发酵豆粕组 1.74、0.16 U/mg prot、0.24 U/mL，但各试验组之间无显著性差异（P＞0.05）。

表2 发酵豆粕对凡纳滨对虾生长性能及饲料效率的影响

表3 发酵豆粕对凡纳滨对虾酶活性的影响

3 讨论

3.1 发酵豆粕对凡纳滨对虾生长性能及饲料效率的影响 目前，已有研究表明，一定量的发酵豆粕替代鱼粉对鱼类生长性能无显著性影响 （王立改等 ，2018；Liang 等 ，2017；Barnes 等 ，2015；Barnes等，2012）。彭松等（2015）在凡纳滨对虾的研究中发现，以6%发酵豆粕等氮替代鱼粉，对虾的生长性能和饲料效率未受影响；另外，试验动物个体大小对植物蛋白的敏感程度不一样。冷向军等（2007）研究表明，发酵豆粕代替鱼粉的比例超过20%时，对虾（0.1 g）体质量增加率有下降的趋势。杨耐德等（2008）研究发现，发酵豆粕替代量低于33.33%时，对虾（1.82 g）生长性能和饲料效率无显著差异。本试验中发酵豆粕组终末均重、质量增加率及特定生长率均高于去皮豆粕组，且湿基发酵豆粕组生长性能显著高于去皮豆粕组，这与李小梅等（2012）研究结果一致。这可能是豆粕经微生物发酵之后，大量高分子蛋白质被分解成利于消化吸收的小分子多肽，这些小肽提高了机体蛋白质的合成效率，进而提高了对虾的生长性能。而湿发酵豆粕，未经过烘干过程，而直接进入了饲料生产制粒过程，更多的保留了发酵中产生的有益菌次生代谢产物，更有利于对虾的摄食和生长。另外，杨玉芬等（2009）研究发现，在发酵过程中，适当增加水分含量，可以促进乳酸菌的繁殖，进一步促进其对底物发酵产生有机酸，而有机酸是衡量发酵质量的重要指标，乳酸含量越高，表示发酵质量越好（刘媛媛等，2006）；另外，蔡国林等（2008）研究发现，有机酸具有独特的芳香，可掩盖饲料中的不适气味，提高饲料适口性，这可能是湿基发酵豆粕应用效果优于干发酵豆粕的原因。

3.2 发酵豆粕对凡纳滨对虾酶活性的影响 众所周知，免疫学指标能够反映机体的免疫功能和生理状况，而饲料中添加适量的发酵豆粕可以提高鱼类免疫机能（陈萱等，2005）。宋文新（2009）研究发现，发酵豆粕替代10%的鱼粉可以提高黑鲷幼鱼碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶及血清溶菌酶活性；吴钊（2016）研究发现，发酵豆粕替代鱼粉可以显著提高大黄鱼肝脏中超氧化物歧化酶活性，但对肝脏中谷丙转氨酶和谷草转氨酶没有显著性影响。在本研究中发现，干发酵豆粕和湿发酵豆粕组超氧化物歧化酶活性均高于去皮豆粕组，而且湿发酵豆粕组总抗氧化能力显著高于去皮豆粕组，这可能是发酵过程中产生了游离型大豆异黄酮，从而提高了其生物活性，这与彭松等（2015）的研究结果一致。Sang等（2016）研究发现，饲料中添加发酵豆粕可以显著提高生长期岩鱼血清抗氧化酶活性；豆粕中的抗营养因子会引起鱼体的氧化胁迫现象，造成鱼体的应激反应，而发酵工艺可以有效降低豆粕中的抗营养因子，这可能是发酵豆粕组对虾总抗氧化能力高于去皮豆粕组的原因。

4 结论

本次试验条件下，饲料中添加发酵豆粕能改善凡纳滨对虾生长性能及饲料效率，而且湿基发酵豆粕效果优于干发酵豆粕。