时间:2024-05-23
国家饲料工程技术研究中心 陈 香 谯仕彦*
北京中农颖泰生物技术有限公司 李 波
湖南伟业动物营养有限公司 易学武
抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,具有抗细菌、真菌、霉菌、病毒、原虫、癌细胞等多种活性,且不易产生耐药性,具有广阔的应用前景(安春菊等,2003)。天蚕素抗菌肽最早由瑞典科学家Boman等于1980年用阴沟通杆菌及大肠杆菌诱导惜古比天蚕蛹后发现的该物质,研究发现,其不但具有广谱抗菌效果,而且对病毒、真菌、肿瘤等都具有一定的杀伤作用(Boman,1995)。
本试验所用天蚕素抗菌肽,是人工设计合成并在枯草芽孢杆菌中成功表达的基因工程产物(Chen等,2009)。体外试验已证明它能有效的抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等有害菌。目前,天蚕素抗菌肽已实现了发酵罐的成功发酵,因此,可将其直接运用于断奶仔猪的饲粮中,本文旨在探讨天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生长性能的影响,促进其在动物生产中的应用。
1.1 试验动物 试验选用240头初始体重(11.64±2.30)kg的杜×大×长健康断奶仔猪进行试验。
1.2 试验设计 试验选用的断奶仔猪按体重相近、遗传基础相似的原则,完全随机分为4个处理,每处理6重复,每重复(圈)10头猪(公、母各半),试验设计为:对照组,即抗生素组(基础饲粮+200 mg/kg 10%的硫酸抗敌素+1000 mg/kg 10%的杆菌肽锌);试验一组、二组、三组在基础饲粮基础上分别添加250、500、750 mg/kg的天蚕素抗菌肽。试验期为28 d,由专人管理与记录,其他日常管理按正常进行。
1.3 试验饲粮 试验采用玉米-豆粕型基础饲粮,参照NRC(1998)猪营养需要量标准配制猪试验基础饲粮及预混料。试验基础饲粮组成及营养水平如表1所示,各试验组饲粮的4%预混料配方见表2,天蚕素抗菌肽由北京中农颖泰生物技术有限公司提供。
表1 基础饲粮组成及营养水平
表2 4%预混料配方 g/kg
1.4 饲养管理 试验猪饲养在封闭式保育猪舍内,水泥地面、漏逢地板各半,通风良好。试验期间每天上午和下午各加料一次,自由采食和饮水,按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。
1.5 检测指标和方法 生长性能指标:分别于试验开始和结束时早晨空腹逐只称量其体重,以重复(圈)为单位记录耗料量,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和饲料转化率(FCR)。腹泻率:每天观察仔猪排粪情况,每天上午、傍晚逐头检查仔猪肛门,观察有无粪便污染及红肿并做好记录。腹泻频率、腹泻指数反映了腹泻的严重程度。
1.6 数据分析 试验数据采用SAS统计,进行方差分析,差异显著则进行Duncan’s多重比较。
试验仔猪采食量、日增重和饲料转化率如表3所示。试验初始的各组体重差异不显著(P=0.99),试验期的平均日增重,试验各组相对于抗生素组均有改善趋势,差异均不显著(P>0.05)。但从各指标的趋势上看,添加天蚕素抗菌肽的试验组的表现优于抗生素对照组。与抗生素对照组相比,饲料转化率则有明显的改善。试验一组、试验二组和试验三组在饲料转化率上比抗生素对照组分别降低了 18.29%(P < 0.01)、7.93%(P <0.05)和14.02%(P<0.05)。各组之间日采食量之间差异不显著(P=0.291)。试验一组、试验二组和试验三组的采食量分别比抗生素对照组降低了14.29%、7.69% 和8.79%(P>0.05)。 这证明试验组的断奶仔猪在不影响日增重的情况下减少了采食量,有效降低生产成本。
表3 天蚕素抗菌肽对断奶仔猪生产性能的影响
3.1 抗菌肽与传统抗生素对比优势 与传统的抗生素相比,抗菌肽除了能杀灭细菌、真菌、寄生虫和病毒以外,对癌细胞也有一定杀伤作用,此外,抗菌肽在先天及获得性免疫方面具十分重要的作用,传统抗生素对细胞的作用靶点通常是单一的个体或者族群,而抗菌肽的作用靶点并不如此特定,可能掺在多靶点;在耐药性上,传统抗生素的抗药性菌产生频率为10-7~10-10,或者仅仅在亚MIC浓度下几代产生,而对于抗菌肽来说,耐药性一般不能直接产生,需要在亚MIC下诱导许多代后才有耐药性菌产生;抗菌肽可以相对独立地发挥其抗菌作用,也可以与其他因子协同作用,显示出更高的活性,抗菌肽之间,抗菌肽与传统抗生素具有协同作用,也与乳铁蛋白、溶菌酶等发生作用以提高活性(Marr等,2006)。
本试验表明,通过在饲粮中添加不同剂量的天蚕素抗菌肽,对断奶仔猪的各项生产性能均有所提高。
3.2 抗菌肽作为饲料添加剂应用的优势 抗菌肽能够耐受饲料制粒时的高温,本试验所采用的是颗粒饲料,试验表明,其抗菌肽生物学活性未受到损失;抗菌肽杀菌机理独特,病原菌不易对抗菌肽产生耐药性,以工程菌工业化发酵生产抗菌肽,可大规模生产,生产周期短,生产成本低且不受季节和气候变化等外在环境的影响。
本试验证明,在断奶仔猪饲粮中添加天蚕素抗菌肽,饲料转化率、促生长和抗腹泻等效果要优于抗生素组(10%的硫酸抗敌素200 mg/kg和10%的杆菌肽锌1000 mg/kg)。其中,以添加250 mg/kg的天蚕素抗菌肽效果最优。
[1]安春菊,盛长忠,李德森,等.一类潜在的新药——抗菌肽[J].中国新药杂志,2003,12(9):704 ~707.
[2]Boman H G.Peptide antibiotics and their role in innate immunity[J].Annual Review of Immunology,1995,13(3):61 ~92.
[3]Marr A K,Gooderham W J,Hancock R E.Antibacterial Peptides for therapeutic use:obstaclesand realistic outlook [J].CurrentOpinion in pharmacolog,2006,6(5):468 ~472.
[4]Chen X,Zhu F M,Cao Y H,et al.Nover Expression Vector for Secretion of Cecropin AD in Bacillus subtilis with Enhanced Antimicrobial Activity[J].Antimicrob Agents Chemother,2009,53(9):3683 ~3689.
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